實驗方法原理
丙烯酰胺的聚合已經應用于聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE），也應用于酶的包埋。長的聚合物鏈通過交聯 N，N'-亞甲基二丙烯酰胺連接而成（圖 1）。聚合反應是通過N，N，N'，N'-四甲基乙二胺（TEMED）和過硫酸銨引發的。通過改變交聯劑的數量，可以控制聚合物網孔尺寸，以此確定酶被固定而底物和產物能從催化位點自由地擴散。
實驗材料 酶溶液
試劑、試劑盒 丙烯酰胺NN'-甲基丙烯酰胺NNN'N'-四甲基乙二胺過硫酸銨Tris-HCl磷酸鉀
儀器、耗材 高速攪拌器
實驗步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
在 8 ml 的酶溶液中，加入 1.5 g 的丙烯酰胺、80 mg 亞甲基二丙烯酰胺、10 ul 四甲基乙二胺和 30 ul 10％ 過硫酸銨。反應的混合物被控制在 37℃，還必須避免溫度的升髙。聚合在 20 min 內發生。然后，用抹刀把凝膠切割成小片，再添加 10 ml pH 7.5 0.1 mol/L 磷酸鉀緩沖液，凝膠粒子被高速攪拌器進一步地磨碎。凝膠微粒在玻璃料上被沖洗三次，之后直接用于酶的測試。
注意事項
其他
試劑：
丙烯酰胺（Mr＝71.1）
N，N'-甲基丙烯酰胺（Mr＝154.2）
N，N，N'，N'-四甲基乙二胺（TEMED，Mr＝116.2）
過硫酸銨（過硫酸銨 Mr＝228.2，10％ 水溶液，新鮮配制）
0.1 mol/L Tris-HCl pH 7.2
0.1 mol/L 磷酸鉀，pH 7.5
0.1 mol/L 酶溶液（8 mg 溶于 8 ml 0.1 mol/L Tris-HCl pH 7.2）