3 討論
中藥藥對是根據藥性配對，藥物間相互作用以達 到更好療效的配伍形式，是方劑的重要組成部分。研究中藥藥對的作用，有利于掌握用藥規律，闡明中藥 復方的作用機制。虎杖微寒，可清熱利濕﹑解毒，散 瘀止痛；桂枝辛溫通絡，且反佐制約苦寒傷陽凝瘀之 弊。因此，我們復制大鼠急性痛風性關節炎模型，研 究藥對虎杖 - 桂枝對大鼠踝關節腫脹度以及對細胞 因子IL-1β、TGF-β 及 TLR2、TLR4/MyD88 信號的影 響，結果發現，虎杖 - 桂枝藥對可抑制痛風性關節炎大鼠關節腫脹度，降低 IL-1β 含量、下調 TLR2 TLR4、MyD88 的基因表達，減輕炎癥反應。 本實驗研究采用經典的 MSU 注射大鼠踝關節造模方法，該方法會出現大鼠關節紅腫、發熱疼痛，行 走不便，具有急性痛風的特征。給予不同劑量的虎杖 - 桂枝藥對后，大鼠關節的腫脹度明顯緩解。病理學 研究也發現，不同劑量的中藥藥對虎杖 - 桂枝可減 少關節滑膜炎癥、細胞浸潤和血管充血。痛風是 MSU 結晶引起的炎癥反應，細胞的炎癥級聯反應通 常是與單核巨噬細胞的刺激和活化而產生的炎癥介質 有關，其中，包括 IL-1β，腫瘤壞死因子（TNF-α）， IL-6 等，研究已經證實 IL-1β 是單核細胞的細胞系 產生的最重要的促炎細胞因子，并且 IL-1β 的產生 是急性痛風性炎癥發病的必要物質[10-11]。轉換生長因 子 β 受體（TGF-β）對細胞的生長、分化和免疫功能 都有重要的調節作用， 其中， TGF-β1 又可抑制 IL-1、IL-6 的合成與致炎活性。急性痛風炎癥發病 期間，IL-1β 的含量顯著性增加，后期 TGF-β1 的含 量上調誘導痛風的自發緩解，通過多個方面抑制炎癥反應也得到了驗證。本實驗結果表明，不同劑量的 虎杖 - 桂枝藥對均可不同程度的降低 IL-1β 的含量， 減輕機體炎癥反應的作用。
Toll 受體（TLRs）是先天免疫的識別受體，能夠識 別 PAMPs 和損傷相關分子模型（DAMPs），主要表達 于免疫細胞， 包括單核細胞、巨噬細胞和粒細胞 等[13-14]。TLRs 屬于Ⅰ型跨膜蛋白受體，多數 TLRs 有 細胞質 Toll/IL-1 受體（IL-1R）域，它是激活下游信號 途徑所需的部位，從而導致 NF-κB 的活化[6]，并誘導 炎癥因子如 IL-1 和粘附分子等基因的表達，國外研 究[14-15]表明，IL-1β 的產生確實與 TLR4 的激活有關。 髓樣分化因子 88（MyD88）是一種轉接蛋白，TLRs 通 過 MyD88 依賴性途徑或 MyD88 非依賴性途徑進行信 號傳遞，識別入侵病原體，激活天然免疫，其中， TLR2 是由 MyD88 依賴性途徑介導的；TLR4 可同時 經過 MyD88 和 TRIF 兩條途徑進行信號傳導，MyD88 在 MSU 產生免疫反應中是必不可少的轉接蛋白[11-15]，
此通路在炎癥發病中具有重要作用。本實驗結果顯 示：模型組 TLR2、TLR4、MyD88、IL-1β 表達量均 顯著性增高，可激活 TLRS/MyD88 信號通路，促使 IL-1β 的合成釋放，增強機體的炎癥反應。各給藥組 均能不同程度下調 TLR2、TLR4、MyD88 的表達量而 減少 IL-1β 的表達量，抑制機體的炎癥反應。
藥對虎杖 - 桂枝對痛風性關節炎大鼠模型急性炎癥有明顯的抑制作用，可緩解關節腫脹，減少關 節滑膜炎癥細胞浸潤反應和血管充血。其作用可能 是通過抑制 IL-1β 的分泌， 抑制炎癥過程中的 TLR2、TLR4/MyD88 信號通路，減少炎癥因子的生 成。TLRs/MyD88 信號通路是治療痛風一個非常有前 景的靶點，為后續探討中藥治療痛風作用奠定了基礎。