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  • 發布時間:2020-07-23 17:00 原文鏈接: 代謝全譜分析檢測

      非靶代謝組學無偏向性檢測所有內源小分子代謝物,通過全譜分析對小分子代謝物定性和相對定量,了解生物體內小分子代謝物的整體代謝特征和變化規律。基于代謝全譜的功能探究,便于從整體水平,在復雜的代謝網絡中尋找潛在的重要通路,是解決復雜生物學問題的重要途經,也是許多科學研究進一步深入的前提。

      可靠的檢測平臺和分析軟件為高質量檢測數據保駕護航

      全譜分析技術流程

      以上為代謝物全譜分析的基本流程,下面我們開始細述各類細節。

      1、 樣本保存

      離體樣本必須在液氮速凍后-80℃保存,嚴禁反復凍融。

      2、 樣品前處理

      在代謝組學研究中,最常用的樣本前處理方式是有機溶劑沉淀蛋白,接著使用高速離心或者超濾技術移除沉淀。研究者們喜歡用有機溶劑例如甲醇進行一步提取,既縮短前處理時間,又可以避免過多的雜質混入,縮短色譜柱壽命,影響檢測結果。在某品牌眼藥水全譜分析過程中,代謝物提取步驟為加甲醇渦旋、靜止、離心和過濾收集上清。

      3、 代謝物檢測

      LC-MS、GC-MS或核磁共振對代謝物進行定性和定量檢測,如Thermo, Ultimate 3000LC +Thermo Scientific? Q Exactive? HF液質聯用儀,以液相色譜作為分離系統,質譜為檢測系統,樣品在質譜部分和流動相分離,被離子化后,經質譜的質量分析器將離子碎片按質量數分開,經檢測器得到質譜圖,獲得原始數據。

      4、 離子流圖

      (ESI+)表示正離子檢測模式,即在檢測過程中質量分析器只掃描正電荷離子而濾除負電荷離子,從而獲得正電荷離子的信息;(ESI-)表示負離子檢測模式,原理同正離子模

      5、數據預處理

      數據處理的軟件眾多,針對Thermo Scientific? Q Exactive? HF原始數據對應專門分析軟件Compound discoverer 3軟件,可對LC/MS檢測數據進行提取和預處理,整理成二維數據矩陣形式,包含保留時間RT(Retention time)、分子量(Molecular Weight)、觀察量(樣本名稱)、峰強度等信息,進行后續去全譜鑒定。

      6、 全譜鑒定

      根據LC-MS產生的二級質譜圖或者Mass值基于mzCloud數據庫和網絡數據庫Metlin進行全譜鑒定,對代謝物注釋和分類。例如某品牌眼藥水的全譜分析鑒定其主要包括亞油酸及其衍生物、脂肪酸及其衍生物、氨基酸及其衍生物和吲哚基羧酸及其衍生物等。

      全譜分析技術優勢

      全譜分析應用

      代謝物全譜分析可廣泛應用于農業、醫療和生產各個領域中,豐富的樣本前處理經驗,高通量的質譜檢測和專業的數據處理分析,可高效準確地獲取全譜分析結果。

      關于科創質量

      科創質量是一家專業從事生命科學相關領域研究的技術服務公司。作為專業的一站式技術解決方案供應商,科創以科學研究為首任,以客戶為中心,向全國生物醫藥企業和高校科研院所提供一系列的技術服務,并致力于搭建全國生物醫藥領域研發服務平臺。公司實驗室配置精良,擁有龐大的譜圖解析數據庫和專業的分析研發工程師,可為客戶提供專業可靠的分析檢測服務。


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