試劑、試劑盒 乙醇β-巰基乙醇
儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Rapid Total RNA System
實驗步驟
一、材料
1.緩沖液、溶液和試劑
乙醇,70%和100%
β-巰基乙醇
2.特殊設備
轉子-定子均化器或類似設備
3.其他
Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)
二、方法
(1）加β-巰基乙醇制備裂解溶液。
(2）按照廠商的方案要求，向細胞和組織樣品中加裂解溶液（裂解液體積取決于所處理樣品的大小）。用轉子-定子均化器或類似設備均化。
(3）向裂解產物中加等體積的70%乙醇。均質化裂解產物以使沉淀分散。
(4）將裂解產物置隨試劑盒提供的離心套柱中，在微量離心機中12000~16000g離心。
(5）用700ul洗滌緩沖液1洗滌一次，12000~16000g離心1min。
(6）用洗滌緩沖液2洗滌兩次，每次500ul,12000~16000g離心1min。
(7）12000~16000g離心2min以移棄殘留洗滌緩沖液。
(8）參照試劑盒的使用說明用適董的水從柱中洗脫RNA。然后儲存于-70°C。較少的樣品可用45ul水洗脫，樣品較多可用20ul水洗脫。