主要是蛋白胨和牛肉粉用來提供細菌生長所需的碳源、氮源、氨基酸以及維生素。氯化鈉維持培養基中的滲透壓，瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血提供氯化血紅素和輔酶I，為嗜血桿菌屬的生長提供特殊營養。
巧克力平板培養基還能夠培養其他細菌，主要的原因是血液中有V、X因子，這兩種因子是位于紅細胞中的，一般細菌不能利用，輕微的加熱（一般為75~85攝氏度左右）使紅細胞破壞釋放到細胞外方可利用。
脫纖維羊血或兔血
蛋白胨牛肉粉氯化鈉瓊脂蒸餾水
玻璃平皿量筒高壓蒸氣鍋pH計85℃水浴鍋超凈工作臺稱量天平
一、巧克力平板主要成分
1. 以羊血制備
蛋白胨 10g
牛肉粉 3g
氯化鈉 5g
脫纖維羊血 50mL
瓊脂 15g
蒸餾水 1000mL
2.以兔血制備
鮮牛肉浸出液 1000mL
脫纖維兔血 100mL
二、巧克力平板制備
1. 將除脫纖維羊血（兔血）外的主要成分混合，校正pH在7.2——7.4，高壓滅菌后，冷卻至85℃。
2. 無菌方法加入脫纖維羊血（兔血），搖勻后置于85℃水浴中，維持該溫度10分鐘，使之成巧克力色。
3. 取出，置于室溫冷卻至約50℃，傾制平板。
1. 外觀：巧克力平板培養基應為巧克力色固體，表面平整，不得有裂痕。且培養基不得有肉眼可見氣泡及肉眼可見物（但允許有少量肉眼可見纖維）。
2. pH值應在7.2±0.2。
3. 無菌要求：將巧克力平板培養基置于37℃±2℃培養箱中培養7天，不得有菌生長。
本實驗來源于牡丹江醫學院 檢驗專業實驗指導
