實驗材料 抗體
試劑、試劑盒 磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS
儀器、耗材 分光光度計離心機
實驗步驟
1. 將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中,置于一個2 ml 的玻璃試管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室溫下溫和攪拌30 min。
2. 加樣到PD-10柱子上,上柱前用10 ml 的0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液預平衡柱子。
3. 上樣后每0.6 ml 加I為一組分分部收集洗脫液,監測A280并收集第一個蛋白峰。
4. 匯集第一個峰的洗脫液于15 ml 的玻璃試管中。
5. 將10 μmol 的肽溶于20 mmol/l EDTA中,終濃度約為1 mg/ml。
6. 將其加到裝有MBS/BSA復合物的玻璃試管中。
7. 于室溫下在,氮氣中振搖4 h,于4℃對3 l PBS透析過夜。
8. 換PBS后繼續透析4 h。
9. 將樣品獨立分裝成小份,貯存于-20℃。