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  • 發布時間:2020-08-18 09:39 原文鏈接: 抗肽抗體的制備

    實驗材料 抗體


    試劑、試劑盒 磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS


    儀器、耗材 分光光度計離心機


    實驗步驟


    1.  將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中,置于一個2 ml 的玻璃試管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室溫下溫和攪拌30 min。

     

    2.  加樣到PD-10柱子上,上柱前用10 ml 的0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液預平衡柱子。


    3.  上樣后每0.6 ml 加I為一組分分部收集洗脫液,監測A280并收集第一個蛋白峰。


    4.  匯集第一個峰的洗脫液于15 ml 的玻璃試管中。


    5.  將10 μmol 的肽溶于20 mmol/l EDTA中,終濃度約為1 mg/ml。


    6.  將其加到裝有MBS/BSA復合物的玻璃試管中。


    7.  于室溫下在,氮氣中振搖4 h,于4℃對3 l PBS透析過夜。


    8.  換PBS后繼續透析4 h。

     

    9.  將樣品獨立分裝成小份,貯存于-20℃。


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