上一期給大家聊了聊芯片vs RNA-seq哪個好(點我點我),但很多同學可能會發現,市場上的基因芯片有好多種啊,不知從何入手?今天就來818挑選基因芯片的小技巧。一句話—— 看研究目的。
先給大家科普兩個詞:
基因表達量:檢測基因表達量的芯片一般針對某個基因的的所有轉錄本設計探針,經過對每個探針信號的算法,得到整個基因的表達量,經常聽到的表達譜芯片就屬于這一種。
轉錄本表達量:針對每個基因不同轉錄本設計探針,除了分析基因表達量之外,還可以單獨分析每個轉錄本的表達量(那就可以用來研究大熱的可變剪接啦)。據小編所知,目前能做到這一點的,只有Affymetrix的HTA(新一代叫做Clariom)系列的芯片。
那么具體做研究的時候,有哪些選擇方案呢?
選擇1:大家是想找機制,還是找一個研究的靶標?
機制簡單說來就是找變化的信號通路,而目前我們研究的信號通路基本都是由編碼基因組成的,因此選擇芯片的時候,只需要基因表達譜就可以了。
選擇2:找靶標,那是編碼基因呢,還是非編碼呢?
編碼基因同上就好。上一篇文章也提到了,編碼基因一直都是研究的主流,因此芯片價格也相對較低,性價比非常高。
但發文章的熱點也是可以追一追的,說不定就成了明星(CNS)同款了呢。非編碼的話,根據研究的對象主要分為兩種miRNA,lncRNA。miRNA因為片段短,會有專門的探針設計方法,常常是獨立成一款芯片的。而lncRNA,因為它的機制最終也歸結到調控編碼基因的表達,因此像Affymetrix之類的生產商就將它和編碼RNA放在了一張芯片上,一次性就可以搞定兩種,還可以研究它們相互之間的表達調控關系,非常的方便。
lncRNA研究注意點:
人、大小鼠等模式生物,編碼基因基本都已經發現了,因此不同廠家的芯片檢測的基因是差不多的,就是那么20000多個。但LncRNA相對而言是新東西,近幾年成了熱點之后才有了一個大爆發,發現了很多新的lncRNA分子,因此選擇芯片的時候,一個很重要的問題就是探針設計及注釋來源的數據庫新不新了,如果還是好幾年前的lncRNA芯片,那可能就會錯失很多有意思的東西啦。
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