分離度又稱分辨率，為了判斷分離物質對色譜柱在色譜柱中的分離情況，常用分離度作為柱的總分離效能指標，用R表示。R等于相鄰色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比，表示相鄰兩峰的分離程度，R越大，表明相鄰兩組分分離越好。
一般說當R<1時，兩峰有部分重疊；當R=1.0時，分離度可達98%；當R=1.5時，分離度可達99.7%。通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標志。當R=1時，稱為4σ分離，兩峰基本分離，裸露峰面積為95.4%，內側峰基重疊約2%。R=1.5時，稱為6σ分離，裸露峰面積為99.7%。R≥1.5稱為完全分離。《中國藥典》規定R應大于1.5。
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