解脲脲原體(uu)、人型支原體(MH)、生殖支原體(MG)和沙眼衣原體(CT)都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎(NGU)的最主要病因(90％以上)，且已成為發病率最高的性傳播疾病，已越來越受到重視。但由于技術局限，目前對其檢測仍存在不少問題亟待解決。筆者結合自己的工作經驗，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現狀和存在問題，以裨于試劑的改進和臨床檢測方法的提高。
1檢測現狀
1.1培養法支原體可用人工合成培養基培養，由于不具有甾醇合成能力，培養系統應添加含甾醇等長鏈不飽和脂肪醇豐富的物質，一般采用SP-4培養基加馬血清。MG生長所需的營養成分復雜，生長極緩慢，一般需2周～3月。CT必須采用細胞培養，一般用McCoy細胞系進行培養，但細胞培養需專業化技術、試劑和設備，要求較高，周期也較長，目前臨床一般不采用，僅在科研單位進行科研活動，或作為新診斷試劑方法學評價的金標準。培養法不能快速檢測支原體感染，一般uu和MH需2～3天才能出結果。不過隨著實驗水平提高，市面上已出現一些24 h可出結果的試劑。但MG尚未實現24 h培養出結果，因此臨床上不采用培養法檢測MG，僅用于科研活動。
目前臨床培養法檢測UU和MH多采用液體培養基，加樣培養變色判斷結果。理論上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發生，因此要求變色后過濾除菌，再接種到固體培養基上觀察菌落。若培養基選用適當抗生素，有效地抑制雜菌生長，單純液體培養基結果就有相當高的臨床可信度。即使有個別變色是雜菌所致，標本病人也有細菌性炎癥，采用抗生素也不為過。
1.2免疫法采用此法檢測的試劑目前臨床較常用。一般為問接法(ELISA法或金標法)檢測抗體，比較而言金標法檢測抗體的試劑用得更多；而用于檢測支原體抗原的試劑目前尚未商品化。此類試劑一般采用夾心法檢測CT特異性脂多糖抗原(LPS)，影響較大的有金標試劑和免疫熒光試劑。由于免疫反應的特異性和酶催化底物反應的高效性或熒光信號的高敏性，故此類試劑理論上靈敏度和特異性都較高。
1.3 PCR法此類衣原體試劑有定性和定量(多是PcR酶免試劑)兩類，而支原體試劑只有定性一類。pcR反應有較高的靈敏度，對實驗條件、試劑以及操作人員的要求都較高，操作不當易造成錯誤判斷，并且PcR定性試劑一般沒有藥品批準文號，臨床上使用應慎重。定量試劑有藥品批準文號，但面市不久，尚處于推廣中。科研單位使用PCR試劑一般用于鑒定血清型，而醫療單位使用PCR定量試劑多用于臨床療效觀察。
1.4快速生化法由于支原體生化酶反應速度和特異性都存在問題，目前尚無檢測支原體快速生化法試劑，但衣原體已有此方法學試劑。國內開發的生殖道cT生化檢測試劑即為此類，它是根據CT侵染上皮細胞后產生的獨特的化學結構，配以生化酶試劑與之反應，觀察變色與否判斷結果。臨床觀察資料表明，以細胞培養為金標準．此試劑的靈敏度和特異性分別為87％以上和97％以上，加之價格較低，具有良好的應用前景。
2存在問題
2.1 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根據～次抗體檢測結果，很難判斷標本病人是既往感染還是現癥感染．再次測定支原體抗體滴度增加時方可判為支原體陽性。為此要求檢測支原體抗體的應為定量試劑，而目前國內間接法檢測支原體抗體的試劑都是定性試劑，且有一定的市場占有率，這就說明了為什么許多病人檢測抗體為陽性而培養則為陰性，也在一定程度上影響了病情的確診。國內有些科研單位正研制間接法檢測支原體抗原的試劑，直接檢測病原體抗原，因此比檢測抗體試劑有更高的特異性和準確性。基于支原體抗體定性檢測試劑的可靠性存在問題，在檢測支原體抗體定量試劑和支原體抗原試劑商品化之前，宜采用液體培養法。
2.2 MG診斷問題以往資料顯示MG感染率不超過5％，鑒于培養周期長，有關研究又不多，臨床一般不檢測MG。但有資料表明MG的陽性率并不低(14.1％)，以前資料的低感染率可髓是試劑的靈敏度偏低所致。因此進一步開展MG的研究，開發臨床適用的試劑，應是當前工作重點之一。
2.3支原體計數的可靠性問題目前國內市場上銷售的支原體藥敏試劑，一般都帶支原體計數，計數的前提必須是標本采集量的標準化，若標本采集量不標準，計數就是空談。血清標本比較容易定量采集，而支原體測定所取的標本是分泌物或中段尿，則不容易定量采集。對于分泌物來講，采集標本量時多時少，如果這次取的分泌物少，而分泌物中支原體數量≥10000，采用所謂的可計數的試劑檢測可能會得到支原體數量<10000的結果；同樣中段尿是一個定性且很泛的概念，每次不可能取到相同位置的中段尿，也不可能標準化。既然取樣不能標準化，計數就不科學，可能給臨床治療工作帶來誤導。市面上的試劑帶計數功能的可能原因：①廠家沒有意識到標本采集量的標準化問題；②故弄噱頭和跟風。衣原體PCR定量試劑也是測分泌物，存在同樣問題。
2.4發病率高而陽性率低的問題隨著與國際接軌，發病率可比性會增加。西方國家NGU中UU陽性率一般為40％～60％(含多重感染，下同)，MH陽性率一般為20％～50％，cT陽性率一般為25％--55％。而縱觀近十年國內臨床資料，UU陽性率一般為20％～30％，MH陽性率一般為10％～20％，CT陽性率一般為16.2％～27.O％，國內明顯比國外低，臨床實際的陽性率更低，究其原因，可做以下分析。
支原體試劑靈敏度偏低的原因：①沒有充分考慮支原體生長增殖所需的最佳條件；②僅考慮其它微生物存在造成的假陽性而沒考慮某些微生物存在會抑制支原體的生長繁殖；③為了對UU和MH鑒別，培養基一般添加野株天然耐藥的抗生素，但臨床株可能在進化過程中突變而對這種抗生素敏感，導致假陰性的結果。我們在臨床工作中發現一種支原體試劑，性病門診uu陽性率為60.65％，MH陽性率為23.26％，與國外資料比較符合，并且與國內程文獻報道(58.97％)接近，與此對比國內另一種同類試劑UU陽性率為22.17％，MH陽性率為9.35％。有些正常人通過液體培養基培養可能判為陽性，這些人雖無任何癥狀，但其作為支原體攜帶者可看作泌尿生殖道炎癥性疾病的危險人群，臨床上也應予以高度重視。
衣原體試劑陽性率低的原因更多，除去實驗操作影響，①衣原體是寄生在上皮細胞內，采樣若沒采到上皮細胞，勢必造成假陰性；②抗原提取不徹底(只有破壞衣原體細胞壁，其LPS才溶出)，或抗原被破壞(LPS 82℃分解破壞)，也可造成假陰性；③試劑盒生產所用的單抗相應的衣原體血清型可能存在地區差異或變異，因為在臨床工作中我們發現，某同一批號衣原體試劑在有些地區(并不一定是性病高發區)的陽性率比較接近廠家標示的水平，而在另外一些地區(有些還是性病高發區)的陽性率則遠遠低于廠家標示的水平；④試劑本身靈敏度低。