液液分配色譜儀固定液和流動相介紹

液液分配色譜儀是基于樣品組分在固定液和流動相之間分配系數不同實現分離的。

一、固定相：

液液分配色譜的固定相為涂漬在載體上的固定液。

1、載體：

理想的載體應孔容大，孔徑為 10～50 nm。孔徑太小，較大的分子可能被完全排阻，而保留時間短，分離不佳。孔徑太大，固定液易流失，柱穩定性差。由于毛細管作用，固定液在小孔要比大孔內保持的好。

原則上所有多孔性的吸附材料均可作為固定液的載體。常用的有硅膠和硅藻土等，主要采用表面多孔微珠和全多孔微粒。

（1）表面多孔微珠：

柱效好，分析時間短。但多孔層很薄，只能涂漬少量固定液（最大涂漬 1%～2%），柱容量低，柱穩定性差，因為少量的固定液流失將大大改變保留體積。

（2）全多孔微粒：

孔容大，可涂漬較多的固定液，涂漬量可達1克固定液/每克載體（稱為 100% 涂漬），柱效高，柱容量高，柱穩定性好。

載體上涂漬的固定液越多，因固定液流失對樣品保留體積的影響越不顯著。

2、固定液：

由于流動相參與選擇競爭，因此對固定液的選擇比較簡單，只需使用幾種極性不同的固定液即可解決分離問題。

為了更好解決固定液在載體上的流失問題，產生了化學鍵合固定相。目前約有3/4以上的分離問題是在化學鍵合固定相上進行的，是應用最廣泛的一種固定相。

二、流動相：

液液分配色譜的流動相一般采用與固定液性質相差很大的不混溶的溶劑為流動相，流動相對固定相的溶解度盡可能小，因此固定液和流動相的性質往往處于兩個極端。例如當固定液是極性物質時，所選用的流動相通常是極性很小的溶劑或非極性溶劑。

流動相使用前需預先用固定液飽和或在分析柱前增加預飽和柱，以避免固定液流失。