主要是通過化學試劑或酶破壞細胞壁而使細胞破碎,常用的有如下一些方法。
①自溶法 將待破碎的新鮮生物樣品存放在一定pH值和適當的溫度下,利用組織細胞中自身的酶系將細胞破壞,使細胞內含物釋放出來的方法。自溶的溫度,動物樣品常選在0~4℃,微生物材料則多在室溫下進行。自溶時,需加少量防腐劑如甲苯、氯仿等以防止外界細菌的污染。
②溶菌酶處理 溶菌酶可用蛋清或微生物發酵方法制得,具有專一地破壞細菌細胞壁的功能。如用噬菌體感染的大腸桿菌細胞制備DNA時,采用pH8.0、0.1mol/L Tris-0.01mol/L EDTA制成每毫升2億個左右細胞的細胞懸液,然后加入100pg～1mg的溶菌酶,37℃ pH8.0條件下保溫10min,細胞壁即被破壞。溶菌酶作用專一性強,適用于多種微生物,人們較喜歡使用。除溶菌酶外,蝸牛酶、纖維素酶也常被選為破壞細菌及植物細胞之用。
③表面活性劑處理法 較常用的有十二烷基磺酸鈉、氯化十二烷基吡啶、去氧膽酸鈉等。