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  • 發布時間:2020-08-24 11:09 原文鏈接: 病毒透射電鏡載網與支持膜的選擇

    實驗方法原理 因為電子的能量很弱,電子束不能透過玻璃,故用于透射電鏡觀察的標本不能置于載玻片上,尤論是病毒的懸滴標本或者病毒細胞培養物的超薄切片標本都要置于一層極薄的支持膜上。支持膜的厚度一般以 10~15nm 為宜。支持膜附在一個用銅或銖制成的載網上,載網的直徑為 3mm 。


    實驗材料 銅網


    試劑、試劑盒 聚乙烯醇縮甲醛(Formvar) 或火棉膠


    實驗步驟


    1. 載網的準備 載網大多數用銅片經特殊的方法腐蝕而成,故又稱銅網。因其網孔的多少可以分為: 400 目、 200 目、 100 目、 50 目或單孔銅網。銅網可在專業用品商店購到。如果用于細胞化學或免疫細胞化學的標本,則最好用錦網,因為銅網會產生化學反應而影響結果。載網在使用前必須經過嚴格的洗滌,以除去載網上的污物,方可使用。


    2. 支持膜的制備 附著于載網上的薄膜稱支持膜。支持膜的作用在于支撐標本使之有所依附而得到穩固。這層支持膜很薄,電子容易透過,有足夠的機械強度,耐電子束轟擊,本身無任何結構且對生物標本具有化學穩定性。支持膜中最常用的為有機材料薄膜,尤以用聚乙烯醇縮甲醛(Formvar) 和火棉膠為最。將其溶于易揮發的有機溶劑中即可。


    近年來,國內外很多實驗室在用銅網撈取承載超薄切片時,已不再在銅網上鋪一層支持膜,而是用無支持膜的銅網直接撈取切片,不用支持膜的銅網也可牢固的吸附超薄切片,且在電鏡下細胞結構更加清晰。不需支持膜的銅網只要用無水乙醇或丙酮浸泡之后待干即可用來貼附超薄切片。


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