檢查
酸度取本品,加水制成每1ml中含20mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為5.0~7.0溶液的澄清度與顏色取本品5份,分別加水制成每1m1中含50000單位的溶液,溶液應澄清無色(通則0902第法和通則0901第一法)。硫酸鹽取本品約0.250g,精密稱定,加水100ml使溶解,用濃氨溶液調節pH值至11,精密加氯化鋇滴定液(0.1mol/L)10ml及酞紫指示液5滴,用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定,注意保持滴定過程中的pH值為11滴定至紫色開始消褪,加乙醇50ml,繼續滴定至紫藍色消失并將滴定的結果用空白試驗校正。每1m氯化鋇滴定液(0.1mol/L)相當于9.606mg硫酸鹽(SO)。本品含硫酸鹽按無水物計算應為15.5%~17.5%。有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品50mg,精密稱定,置100m1量瓶中,加水-乙腈(80:20)溶解并定量稀釋至刻度,搖勻。標準品溶液(1)精密稱取多黏菌素B標準品50mg,置100ml量瓶中,加水-乙腈(80:20)溶解并定量稀釋至刻度搖勻。標準品溶液(2)精密量取標準品溶液(1)1ml,置100m量瓶中,用水乙腈(80:20)稀釋至刻度,搖勻。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以硫酸鈉溶液(取4.46g無水硫酸鈉溶解在900ml水中,用稀磷酸調節pH值至2.3后用水稀釋至1000m)-乙腈(80:20)為流動相;柱溫為30℃;檢測波長為215mm;進樣體積20l系統適用性要求標準品溶液(1)色譜圖中,多黏菌素B1峰的保留時間約為35分鐘,多黏菌素B2、多黏菌素B3、多黏菌素B1-I與多黏菌素B1的相對保留時間分別約為0.50.55、0.8與1.0。多黏菌素B2峰和多黏菌素B3峰間的分離度應不小于3.0測定法精密量取供試品溶液,注入液相色譜儀,記錄色譜圖至最大組分多黏菌素B1峰保留時間的1.4倍限度供試品溶液的色譜圖中如有雜質峰,按面積歸化法計算,單個雜質不得過3.0%,雜質總量不得過17.0%小于標準品溶液(2)主峰面積0.7倍的峰忽略不計。苯丙氨酸照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品約0.375g,精密稱定,置100m1量瓶中,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻。測定法取供試品溶液,在264nm(A24)、258nm(A258)、252nm(A252)、280nm(A280)與300nm(A30)的波長處分別測定吸光度。按下式計算硫酸多黏菌素B中苯丙氨酸的百分含量(%)(9.4787/W)(A258-0.5A252+0.5A264-1.84A280+0.8A20)式中W為硫酸多黏菌素B供試品的重量(g)。限度按干燥品計算,含苯丙氨酸應為9.0%~12.0%。干燥失重取本品,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥3小時,減失重量不得過6.0%(通則0831)。熾灼殘渣取本品1.0g,依法檢查(通則0841),遺留殘渣不得過0.75%重金屬取熾灼殘渣項下遺留的殘渣,依法檢查(通則0821第二法),含重金屬不得過百萬分之二十。多黏菌素B組分照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液、標準品溶液(1)、色譜條件與系統適用性要求見有關物質項下。測定法精密量取上述兩種溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至最大組分多黏菌素B1峰保留時間的1.4倍。限度按外標法以相應峰面積計算,按干燥品計,多黏菌素B3的含量不得過6.0%,多黏菌素B1-I的含量不得過15.0%,多黏菌素B1、B2、B3和B1I的總含量不得少于80%。可見異物取本品5份,分別加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0904),應符合規定。(供無菌分裝用) 不溶性微粒取本品,加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0903),每1g樣品中,含10m及10m以上的微粒不得過6000粒,含25m及25m以上的微粒不得過600粒。(供無菌分裝用)熱原取本品,加滅菌注射用水制成每1ml中含2萬單位的溶液,依法檢查(通則1142),劑量按家兔體重每1kg注射lml,應符合規定。(供注射用)無菌取本品,用適宜溶劑溶解并稀釋后,經薄膜過濾法處理,依法檢查(通則1101),應符合規定。(供無菌分裝用)