實驗材料 器官
試劑、試劑盒 多聚甲醛石蠟已傳二甲苯
儀器、耗材 玻璃瓶培養箱巴斯德吸管包埋提環包埋模具
實驗步驟
將已解剖的器官或胚胎置于寫有標簽的20 ml 螺口玻璃小瓶中（經硅烷化處理的玻璃瓶專用于小量樣品的處理），如入4℃新鮮配制的4%PFA，置4℃固定至所需時間止。
2. 于60℃烘箱中熔化石蠟。
3. 固定完成后，倒去固定液（注意勿丟失樣品），以50%乙醇替代。然后立即換新鮮的乙醇，在50%乙醇中脫水3次，室溫放置每次20 min。繼而以70%乙醇脫水3 次，室溫每次20 min。（樣品于70%乙醇中在4℃可存數日）。
4. 室溫下，置樣品于95%乙醇2次，毎次20 min。
5. 室溫下，置樣品于100%乙醇2次，每次20 min。
6. 以二甲苯換去100%乙醇，然后立即換以新鮮二甲苯，在二甲苯中放置2次，每次10 min。
7. 倒去二甲苯并加5 新鮮的二甲苯于每個盛樣品的小瓶中，用一熱的玻璃吸管加等量的已熔化石蠟（操作要快，防止凝結），混勻，置樣品于室溫過夜。
8. 置樣品瓶于60℃溫箱中熔化混合的石蠟/二甲苯。準備1個60℃加熱塊，其上的孔可放進20 ml 的樣品瓶，當石蠟/二甲苯混合物熔化后，將瓶移至加熱塊上。
9. 將石蠟/二甲苯混合液倒于廢液瓶中，立即以熱的玻璃吸管加入新熔化的石蠟。將樣品瓶放回加熱塊中。重復此步驟，逐一完成每一樣品。將樣品瓶放回60℃溫箱中，溫育1 h。
10. 從溫箱中取出樣品瓶，再放回60℃加熱塊中，重復步驟9二次，總溫育時間為3 h。
11. 按制造商使用說明，準備好包埋模具（如進行硅烷化噴涂），用一熱的玻璃吸管加熔化的石蠟于模具中，再用一熱鑷子或截去末端的毛細吸管馬上將樣品移至充滿石蠟的模具中。
12. 置一包埋提環于模具上并加石蠟，提環上寫明標簽以便將來識別樣品。可用一熱的拉長并封口的吸管調整模具內樣品位置，將模塊放室溫使其完全凝結。
13. 從包埋模具中取出蠟塊，放在室溫干燥處，切片。
注意事項
1. 二甲苯為毒性有機溶劑，步驟6、7應在通風櫥中進行。
2. 第九步操作要快，以防石蠟凝結，如發生凝結，則應于開始1 h溫育前重新于60℃熔化石蠟。