目前,絕大多數醫院的臨床實驗室總蛋白多采用單一試劑的雙縮尿法來檢測,當遇到脂血標本時,測定結果偏高。為排除干擾,有的文獻介紹了模擬雙試劑樣本空白法,現將我院脂血標本血清總蛋白的樣本空白法介紹如下。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 對象選取我院2008年8月~2008年12月門診及住院病人樣本中的40份脂血標本。
1.1.2 儀器及試劑 OLYMPUS AU400全自動生化分析儀,四川省邁克科技有限責任公司總蛋白試劑盒及按照全國臨床檢驗操作規程自配的雙縮脲空白試劑。
1.1.3 質控品 英國朗道質控品,批號:495UN/1,2011—03及美國伯樂質控品。
1.2 方法
1.2.1 儀器校準每周用邁克校準液對OLYMPUS AU400生化分析儀校準1次。
1.2.2 質量控制 英國朗道質控品和美國伯樂質控品在OLYMPUS AU400上每日進行室內質控,用平時建立的室內質控圖對質控結果進行監測,當質控結果符合要求后方可進行樣本測定。
1.2.3 實驗方法對40份脂血標本分別用兩種不同樣本空白方法在設置標本空白前后進行測定,并對測定結果進行比較。
1.2.4 儀器設置
1.2.4.1 儀器空白通道法參數設置總蛋白(|rP)參數按試劑給定參數設置,此反應通道稱為有色反應通道(color reactionchanne1);另設一個項目名為rrP—B即總蛋白樣本空白,其參數與TP相同,但用雙縮脲空白試劑代替雙縮脲試劑,此反應通道稱為血清空白通道(Serum blank channe1)。并在(P)pa—
rameters參數一(H)Inter related tests相關試驗之間一(B)sam—pie blank樣本空白中界面下,在“color test”處下拉菜單內選擇總蛋白(rrP)分析試驗作為顯色試驗,在“blank test空白試驗”處下拉菜單內選擇總蛋白樣本(TP—B)分析試驗作為空白試驗。脂血標本測定總蛋白時同時檢測以上兩個項目,儀器會
自動計算其差值為報告結果。
1.2.4.2 經典樣本空白法參數設置總蛋白(TP)參數按試劑盒給定參數設置;另設一個測定項目名為1]P—B即總蛋白樣本空白,其參數與TP相同,但用雙縮脲空白試劑代替雙宿脲試劑。脂血標本測定總蛋白時同時檢測以上兩個項目,手工計算其差值為報告結果。
2 結果
2.1 對40份脂血標本分別用兩種不同樣本空白方法在設置樣本空白前后進行測定結果見下表1。
表1 兩種不同樣本空白方法在設置樣本空白前后測定結果
Tab 1 Detection results before and after setting sample blank
2.2 總蛋白儀器空白通道法測定40份脂血標本的結果
(X =74.2 g/L,n=40)低于未設樣本空白結果(X =89.6 g/L,n=40)(P<0.01),差異有顯著性;經典樣本空白法測定40份脂血標本的結果(X=73.8 g/L,n:40)低于未設樣本空白測定結果(X=89.6 g/L,n=40)(P<0.01)。亦差異有顯著性。
2.3 對40份脂血標本總蛋白進行測定,兩樣本空白法結果相關系數(r)為0.9096,儀器空白通道法總蛋白結果( =
74.2,n=40)與經典空白通道法結果( =73.8,n=40)差異無顯著性(P>0.05)。
3 討論
從測定結果可知,儀器樣本空白測定的空白通道法的測定值和經典樣本空白法的測定值均低于未設樣本空白測定值且差異有顯著性(P<0.O1),因此,脂血標本要做樣本空白。儀器樣品空白測定的空白通道法與經典樣本空白法相關性好,測定結果無顯著性(P>0.05)。與經典樣本空白法相比,儀器空白通道法會自動計算其差值為報告結果,不用手工計算其差值,實現了自動化操作,操作簡便。儀器樣本空白測定的空白通道法與經典樣本空白法也適用于黃疸及溶血標本的總蛋白樣本空白測定,同時也適用于其它單一試劑項目樣本測定。儀器樣本空白測定的空白通道法只適用于OLYMPUS Au系列的生化分析儀,不同單位不同儀器應采用不同的樣本空白法來測定標本的樣本空白。