標本處理
1. 標本送驗必須及時,收到標本后應立即檢驗。久置可致細胞破壞,影響細胞計數及分類檢查;葡萄糖分解使含量降低;病原菌破壞或溶解。
2. 細胞計數管應避免標本凝固,遇高蛋白標本時,可用EDTA鹽抗凝。
性狀檢查
主要觀察顏色與透明度,可記錄為水樣透明、白霧狀渾濁、微黃渾濁、綠黃渾濁、灰白渾濁等。膿性標本應立即直接涂片進行革蘭氏染色檢查細菌,并應及時接種培養基。
1.紅色:標本為血性,為區別蛛網膜下腔或穿刺性損傷,應注意:將血性CSF試管離心沉淀(1500r/min),如上層液體為黃色,隱血試驗陽性,多為蛛網膜下腔出血,且出血的時間已超過4h。如上層液體澄清無色,紅細胞均沉管底,多為穿刺損傷或因病變所致的新鮮出血。紅細胞皺縮,不僅見于陳舊性出血,在穿刺外傷引起出血時也可見到。因CSF滲透壓較血漿高所致。
2.黃色:除陳舊性出血外,在腦脊髓腫瘤所致CSF滯留時,也可呈黃色。黃疸患者的CSF也可呈黃色。黃疸患者的CSF也可呈黃色。但前者黃色透明的膠凍狀。
3. 米湯樣:由于白細胞增多,可見于各種膿性細菌引起的腦膜炎。
4. 綠色:可見于綠膿桿菌、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎。
5. 褐或黑色:見于侵犯腦膜的中樞神經系統黑色素肉瘤。
潘氏球蛋白定性試驗
原理
CSF中球蛋白與苯酚結合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,產生白色渾濁或沉淀。
試劑
5%苯酚溶液:取純苯酚25ml,加蒸餾水至500ml,用力振搖,置37℃溫箱內1~2天,待完全溶解后,置棕色瓶內保存。
操作取試劑2~3ml,置于小試管內,用毛細滴管滴入CSF1~2滴,襯以黑色背景,立即觀察結果。
結果判斷
陰性:清晰透明,不顯霧狀。
極弱陽性(±):微呈白霧狀,在黑色背景下,才能看到。
弱陽性(+):灰白色云霧狀。
陽性(++):白色渾濁。
強陽性(+++):白色濃絮狀沉淀。
最強陽性(++++):白色凝塊。
臨床意義
正常時多陰性。有腦組織和腦膜疾患時常呈陽性反應,如化膿性腦膜炎、結核性腦膜炎、梅毒性中樞神經系統疾病、脊髓灰白質炎、流行性腦炎等。腦出血時多呈強陽性反應,如外傷性血液混入CSF中,亦可呈陽性反應。
細胞計數
操作
細胞總數:
對澄清的CSF可混勻后用滴管直接滴入計數池,計數10個大方格內紅、白細胞數,其總和即為每ul的細胞數。再換算成每升CSF中的細胞數。如細胞較多,可計數一大格內的細胞×10,即得每ulCSF中細胞總數。如用升表示,則再乘以106。
渾濁或帶血的CSF可用血紅蛋白吸管吸取混勻的CSF20ul,加入含紅細胞稀釋液0.38ml的小試管中,混勻后滴入計數池內,用低倍鏡計數4個大方格中的細胞總數,乘以50,即為每ulCSF的細胞總數。
白細胞數:
非血性標本:小試管內放入冰乙酸1~2滴,轉動試管,使內壁沾有冰乙酸后棄去,然后滴加混勻的CSF3~4滴,數分鐘后,混勻充入計數池,按細胞總數操作中的紅、白細胞計數法計數。
血性標本:將混勻的CSF用1%冰乙酸溶液稀釋后進行計數。為剔除因出血而來的白細胞數,用下式進行校正。
參考值
正常人CSF中無紅細胞,僅有少量白細胞。成人:(0~8)×106/L;兒童:(0~15)×106/L。
多為淋巴細胞