這種染色方法的基礎是組織結構對不同染料的結合程度不同。染料蘇木精可以將嗜堿性結構染成藍紫色，而伊紅可以將嗜酸性結構染成粉紅色。嗜堿性結構通常包括含有核酸的部分，如核糖體、細胞核及細胞質中富含核糖核酸（RNA）的區域等。
| 實驗材料 | 載玻片 |
|---|
| 試劑、試劑盒 | 蘇木精染料氫氧化銨伊紅染料 |
|---|
| 儀器、耗材 | 水浴鍋培養箱 |
|---|
| 實驗步驟 | 1. 將顯影過的載玻片（在玻片架中）放入盛有水的染色盤中。
2. 按編號在染色盤中準備以下各組液體。
（1）蘇木精染液
（2）水
（3）水
（4）0.1% NH4OH
（5）水
（6）水
（7）伊紅染液
（8）95%乙醇
（9）100%乙醇
（10）100%乙醇
（11）二甲苯
（12）二甲苯
（13） 二甲苯 3. 在蘇木精染液中染玻片20~30 s（勿染過深），水中浸泡2次，每次2 min。
4. 快速浸于0.1%氫氧化銨，然后浸入水中。
5. 以水浸洗5 min，然后用伊紅染色20~30 s。 ‘ 6. 在同一盛95%乙醇的盤中，浸冼玻片8次，然后，于100%乙醇中浸8次，再置100%乙醇中2 min 使完全脫色，在二甲苯中平衡3次，每次2 min。
圖一、用固片截止固定載玻片示意圖
7. 按基本方案1，步驟5~9操作，進行固片處理。
收起 |
|---|
| 注意事項 | 1. 如在0.1%氫氧化銨中浸泡時間過長，放射自顯影乳膠會從玻片上脫離。
2. 如染色過深，可將玻片浸于50%乙醇中，脫色片刻（觀察染料擴散狀況），如染色過弱，可再染色。 |
|---|
