體外診斷(In Vitro Diagnosis,IVD)是指將血液、體液、組織樣本從人體中取出后進行檢測而進行的診斷。IVD 在現代社會中扮演著越來越重要的角色,目前臨床上80%以上的疾病診斷都依靠它。其在疾病預防、診斷、監測以及指導治療的全過程中,發揮著極其重要的作用,是現代疾病與健康管理不可或缺的工具,也被人譽為了醫生的“眼睛”。
而讓這雙大“眼睛”真正具備發現和診斷能力的,則是它心中那道“光”,也就是體外診斷中所用的“光學法”。
在傳統的實驗室中,我們可以通過光的發射、吸收等特性來分析物質的種類、多少;用顆粒物對光的散射特性來分析顆粒物的大小、多少。現在人們把傳統分析儀器的方法和血液學、免疫學、生物化學、標記技術結合起來,就形成了目前的臨床檢驗的方法。光學法是一種安全、可靠、非接觸的檢測方法,測試熒光、分析光譜、讀取顏色等都是目前檢驗醫學中對光學法的典型應用。
就像在傳統分析儀器行業一樣,光電探測器和光源在體外診斷的儀器中也有著重要的地位,別看探測器在一個設備中可能僅僅是小小的一塊,但卻是方法學的核心,探測器的性能對于設備功能的實現、性能的好壞會起到非常關鍵的作用。檢驗醫學設備一般會對傳感器探測下限、信噪比、動態范圍、抗干擾性能方面有著很高的要求。
那么,體外診斷中“光學法”的種類有哪些?光電探測器、光源等如何對應相關應用?接下來,就讓我們進一步走近“光視角”下的體外診斷技術,揭開這些問題的答案吧!
發光法
目前在體外診斷中主要的發光種類有以下幾種:
化學發光(chemiluminescence) 指伴隨化學反應過程所產生的光的發射現象。某些物質(發光劑)在化學反應時,吸收了反應過程中所產生的化學能,使反應的產物分子或反應的中間態分子中的電子躍遷到激發態,當電子從激發態回復到基態時,以發射光子的形式釋放出能量,這一現象稱為化學發光。其中有酶促反應、電化學發光等,像化學發光免疫分析儀、電化學發光免疫分析儀都是利用的這種方法。 生物發光(bioluminescence) 是指發生在生物體內的發光現象,如螢火蟲的發光,反應底物為螢火蟲熒光素,在熒光素酶的催化下,利用ATP能,生成激發態氧化型熒光素,它在回復基態時多余的能量以光子的形式釋放出來。我們可以利用這種方法對一些病毒、細菌進行檢測。 螢火蟲的光芒屬于生物發光 光致發光(photoluminescence) 也就是我們常說的熒光,是指發光劑(熒光素)經短波長的入射光照射后,電子吸收能量躍遷到激發態,在其回復至基態時,發射出較長波長的可見光(熒光)。像經常聽到的實時熒光PCR、流式細胞分析儀、時間分辨免疫熒光、生物芯片掃描儀就用到這種方法。
利用免疫學、基因學的方法,我們將特定的標記物加入到要檢測的血液、體液、組織等樣本上,而這些標記物會在發生化學反應、酶催化作用、電流作用或者光照下發出特定的光,我們通過檢測光的強度就可以得到標記物的多少,從而確定樣本中含有某種物質的多少,這種方法目前被使用在化學發光免疫分析儀、電化學發光分析儀、流式細胞分析儀、熒光PCR等儀器中。
探測器和光源
光電倍增管模塊和光子計數探頭作為極微弱光檢測器件,正在發揮著不可替代的作用,而閃爍氙燈作為大功率紫外光源,也越來越受到儀器廠商的青睞。
比色法
比色法,同樣的是標記物與特定的試劑反應以后會有顯色反應,就像我們所熟悉的PH試紙一樣,在不同酸堿度下會呈現不同的顏色。體外診斷中也是如此,例如金標儀、尿液分析儀就是一種典型的顯色,不同的物質、不同物質含量會讓試紙或者試劑顯示不同的顏色。
對于傳統的方法我們可以通過我們的眼睛去判斷顏色,不過不同的人、不同的光線條件下人眼對于顏色的分辨就會有偏差,存在一定的主觀性,另外也會消耗大量的人力。現在人們使用光學法,可利用不同顏色對于光的反射不一樣這一特點,進行準確的判別。
探測器和光源
我們通過顏色傳感器或者光電二極管測試光的反射量,就可以得到顏色的信息,有效的提高檢驗的準確性。
色彩傳感器
光譜吸收法
光譜吸收法是進行物質種類、多少進行分析的典型方法,廣泛應用在實驗室設備中,有原子光譜、分子光譜、吸收光譜、發射光譜等。體外診斷中的生化分析儀就使用了這種經典的分析方法,對血清、尿液、腦脊液等不同物質的含量進行分析。生化分析儀可以看成是特殊應用的分光光度計。
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