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  • 發布時間:2019-04-06 22:37 原文鏈接: 酶聯免疫吸附(ELISA)測定傷寒桿菌“O”抗體實驗

    測定傷寒桿菌“O”抗體

    酶聯免疫吸附試驗是用酶標記的抗體(或SPA)檢測未知抗原或抗體的方法。此法敏感性高,特異性強。常用的是ELISA方法,間接法,雙抗體法和抗原法。

    實驗材料

    傷寒桿菌

    試劑、試劑盒

    鄰苯二胺碳酸鈉碳酸氫鈉PBS磷酸氫二鈉檸檬酸

    儀器、耗材

    聚乙烯塑料反應板離心機搖床培養箱

    實驗步驟

    1.  抗原包被

    取潔凈的聚苯乙烯微量反應板,于每孔內加傷寒抗原0.1毫升(用包被緩沖液稀釋,蛋白含量10微克/毫升),置37℃1小時,棄抗原液,用洗滌液3次每次3分鐘。


    2.  加待測血清

    于每孔內分別加不同稀釋度(如1:5,1:10,1:20…1:80)的待測血清,PBS空白對照,陰性對照血清,陽性對照血清各0.1毫升。置37℃30分鐘,洗滌3次。


    3.  加酶聯A蛋白

    于每孔加酶聯A蛋白各0.1毫升,置37℃20分鐘,洗滌3次。


    4.  加臨時配制的底物溶液各0.1毫升,置暗處15分鐘。加2M碳酸1滴終止反應。


    5.  結果判斷:(肉眼判斷)

    若顏色于陰性對照相同則為陰性,若較陰性對照深則為陽性,根據顏色深淺以(+)表示。

    展開


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