銀染實驗

甲醇（50% 和5%v v) 二硫蘇糖醇 AgNO3 檸檬酸（固態) 顯影液

試劑

甲醇（50% 和5%v/v)

10umol/L二硫蘇糖醇（DTT)

AgNO₃(0.1%w/v)

檸檬酸（固態)

顯影液

操作程序

此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下，凝膠在旋轉平臺上緩慢搖動，并進行下列步驟。

1)在50% 甲醇溶液中浸泡2次，每次15 min。

2)在5% 甲醇溶液中浸泡10 min。

3)用H₂O迅速洗3次。

4)在10umol/L DTT溶液中浸泡20 min。

5)在0.1%AgNO3溶液中浸泡20min。

6)先用H₂0快速洗1次，然后用顯影液洗2次，每次不超過15s。

7)在顯影液中浸泡數分鐘，直至顯現蛋白質帶。

8)加入固體檸檬酸（雙水合物）（每200 ml顯影液加約10 g檸檬酸)，停止顯影。

9)用鋁箔蓋住凝膠（使避光)，繼續浸泡10 min。

10)用H₂O徹底清洗。凝膠在鋁箔下（在暗處）H2O中浸泡10 min。再置（暗室）H₂0中過夜，使蛋白質條帶顯色。

如需要，凝膠可在4% 甘油中浸泡>lh，然后干燥。