照高效液相色譜法(通則0512)測定固相萃取柱的前處理、系統適用性試驗與要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑),依次用甲醇水(3:1)15ml與水5m沖洗,再用pH值約為9的氨水溶液(取水適量滴加氨試液至pH值為9)沖洗至流出液pH值約為9,待用。精密量取每1ml中約含嗎啡對照品0.15mg的5%醋酸溶液1ml,置處理后的固相萃取柱上,以供試品溶液中相同的洗脫條件洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻,作為固相萃取柱系統適用性溶液。精密量取該溶液與對照品溶液各10l,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。固相萃取柱系統適用性試驗結果(fs)按下列公式計算應在0.97~1.03之間系統適用性試驗結果(fs)=Ax/Cx式中Ax為系統適用性溶液中嗎啡峰面積;為對照品溶液中嗎啡峰面積Cx為系統適用性溶液濃度;CR為對照品溶液濃度。供試品溶液取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于嗎啡1.5mg),置磨口錐形瓶中,精密加入5%醋酸溶液10ml,超聲20分鐘使嗎啡溶解,取出放冷,濾過;精密量取續濾液1ml,置處理后的固相萃取柱上,滴加氨試液適量使柱內溶液的pH值約為9(上樣前,另取同體積的續濾液預先調試,以確定滴加氨試液的量),搖勻,待溶劑滴盡后,用水20ml沖洗至中性,以5%醋酸溶液洗脫,用5πl量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻。對照品溶液取嗎啡對照品適量,精密稱定,加5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含30μg的溶液。色譜條件用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以50mmol/L碳酸二氫鉀溶液-2.5mmol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈(2:2:1)為流動相,檢測波長為220nm;進樣體積10l。系統適用性要求與測定法見阿片含量測定項下。