摘 要:目的 研究曼地亞紅豆杉枝葉提取物中分離紫杉醇及其類似物三尖杉寧堿的方法,提高紫杉醇的回收率及質量分數。方法 曼地亞紅豆杉枝葉提取物先經Al2O3 柱純化后,再以正己烷2醋酸乙酯2甲醇2乙醇2水(5 ∶7 ∶5 ∶1 ∶615) 為溶劑系統,利用循環高速逆流色譜分離紫杉醇和三尖杉寧堿。結果 經循環高速逆流色譜循環一次后,三尖杉寧堿與紫杉醇即達到基線分離,紫杉醇質量分數達9812 %以上,回收率8310 %。結論 循環HSCCC 法為分離紫杉醇和三尖杉寧堿提供了一條簡便、快速的方法,使制備高質量分數、高回收率的紫杉醇成為可能。
紫杉醇是從紅豆杉屬植物中分離出來的一種具有獨特抗癌機制的天然產物,1992 年被美國食品與藥物管理局( FDA) 批準作為抗晚期癌癥的新藥上市,目前已成為當前世界上最熱門、最暢銷、最緊缺、最昂貴的廣譜抗癌藥物[1 ] 。但是紫杉醇在植物體中量極低而且與多種類似物共存, 其中三尖杉寧堿與紫杉醇的區別僅在于C213 位側連的不同(圖1) ,只有結構上的細微差別使得它們的分離十分困難,而實際應用中對紫杉醇的質量分數要求又很高,從而使紫杉醇及其類似物的分離成為純化紫杉醇的關鍵。高速逆流色譜( HSCCC) 是近十幾年來發展起來的新型高效液2液分配技術,具有回收率高、制備量大、操作簡便等優點。國內外已有將其應用于紫杉醇的分離純化的報道[2 ,3 ] ,取得了一定的成果,但均未能將三尖杉寧堿與紫杉醇完全分開。近年來,多維逆流色譜在類似物的分離方面取得了顯著效果[ 4 ] ,但由于需要兩臺以上的逆流色譜儀,價格較高,未能被廣泛應用。循環高速逆流色譜則是簡單的利用一臺高速逆流色譜儀通過循環閥將待分離部分多次泵入主機中進行循環分離,提高分離效果的方法。此法簡便、快速,國外已有將其應用于類似物
分離的報道[5 ] 。本實驗對循環HSCCC 法分離類似物進行了探索,并利用這種方法成功的分離了紫杉醇及其類似物三尖杉寧堿。