AAV基因治療的應用研究（一）

GSK獲批，基因治療曙光來臨

所謂基因治療，就是把一個具有治療作用的基因放到病人的細胞中，借此替換缺失和功能異常的基因，最終達到治療某種疾病的方法。盡管早在1990年美國就批準了基因治療的方案，但是基因治療真正在臨床獲批卻少之又少。不過近期的一則新聞，無疑是為致力于醫學轉化的我們打了一針強心劑。5月27日，全球制藥巨頭葛蘭素史克公司（GlaxoSmithKline，GSK）的基因療法Strimvelis被歐盟批準上市。 GSK獲批代表著大型藥企正式進入基因治療商業化的市場，是基因治療走向市場的又一里程碑事件。這一領域從此不再是鏡花水月，而是新一輪的搶跑，終將成為一場血雨腥風的競爭。

當然，Strimvelis并不是全球首個獲批的基因治療藥物。早在2012年，歐盟已經批準了UniQure公司研發的應用于脂蛋白脂酶缺乏（lipoprotein lipase deficiency）的基因治療藥物，Glybera。Glybera將功能性LPLD基因包裹進AAV（腺相關病毒），注射入患者的骨骼肌。通過一次性的治療，達到長期的顯著降低急性胰腺炎的發病率。

早期的基因治療由于不可控的免疫風險，讓人又愛又恨，AAV作為免疫原性最低，不整合入細胞核基因組，感染效果最好的載體，為基因治療帶來了新的希望（詳見6月23日的文章《醫療黑科技：治病不用藥，有光就夠了》）。Glybera打響了AAV基因治療的第一槍，同時開啟了基因治療的可能性。4年過去了，AAV在基因治療領域又取得了哪些引人矚目的進展呢？

目前在FDA注冊在案的腺相關病毒臨床實驗有超過100例，其中絕大部分集中在臨床一期和二期，一例完成臨床三期的招募。今天我們給大家介紹一下2016年上半年最新的，比較有影響力的幾個案例。

AAV與Crispr/Cas9基因編輯結合

以往的AAV技術主要集中于將外緣基因導入體內，安全穩定地表達。Cas9作為全新的基因編輯技術被普遍認為擁有廣泛的臨床應用前景，其與AAV的聯合應用，使得基因改造更加有靶向性和高效，兩者相得益彰。

2016年2月，AAV載體制造之父，賓夕法尼亞州大學基因治療研究所的James Wilson 教授利用AAV治療罕見代謝尿素循環系統障礙。該病是由鳥氨酸轉氨甲酰酶（OTC）缺失導致的。當該酶系中一種酶丟失或者缺陷，氨就會積累在血液中，循環至大腦，最終嚴重損傷大腦。據報道每40000名出生嬰兒中就有一名患有OTC的缺失。James Wilson團隊用AAV8血清型載體將作為剪切工具的核酸酶Cas9特異性導入肝細胞中。另一個載體將gRNA帶到特異性DNA靶位點，從而達到定點突變。此研究有效提高病理模型小鼠的成活率，文章發表在Nature Biotechnology，發表4個月以來已被多次引用。