一、肺炎支原體感染的特點
肺炎支原體(MP)是一種常見的非典型肺炎的病原體,經飛沫和直接接觸傳播,臨床多表現為呼吸道感染綜合征,起病可急可緩,以發熱和咳嗽為主要表現。中高度發熱多見,也可低熱或無熱。MP對大環內酯類抗生素敏感, 但對常規治療肺炎的藥物耐受。早診斷、早治療有利于避免濫用抗生素, 縮短病程。
二、肺炎支原體的實驗室診斷
肺炎支原體的診斷包含兩方面:臨床診斷(經驗性)和結合了實驗室病原學檢測的確定診斷。只根據臨床癥狀很難鑒別有支原體,病毒或細菌等引起的兒童呼吸道感染。MP培養比較挑剔,分離鑒定需要2周以上。隨著技術發展,血清檢測從冷凝集法進展到被動凝集法,再逐步過渡到MP特異IgM、IgG抗體檢測。肺炎支原體核酸檢測方法有RT-PCR技術,環介導的等溫擴增(LAMP)技術等。目前日常實驗室檢測,血清學仍是主導方法。急性期和恢復期,MP-IgM或IgG抗體水平(被動凝集法的滴度值)呈4倍或4倍以上增高或減低時,都可用于感染確診。
三、抗體分型檢測和凝集法的比較
1、被動凝集法
被動凝集法是間接血凝試驗的改良,以明膠顆粒作為載體。其原理是將吸附了MP抗原的明膠顆粒與待檢血清中相應抗體作用, 出現肉眼可見的凝集現象。被動凝集法操作簡便、無需特殊的實驗設備,已廣泛應用于臨床。早期國內有時直接將其稱為MP-IgM試驗,但實際上它測定的是肺炎支原體特異性抗體的總和,包含IgA、IgM、IgG,而非直接檢測MP-IgM,因而以其陽性結果來代替MP-IgM,勢必陽性率偏高。
2、MP-IgM提示近期感染
MP-IgM在發病7天左右出現,3~4周達到峰值,隨后開始下降。由于MP感染潛伏期為1~3周,因此當患者就診時,大部分均已出現MP-IgM。單次測定MP-IgM,結果陽性對診斷MP的近期感染很有價值。ELISA可以做到真正的分型檢測MP-IgM,。ELISA具有高敏感性、特異性強的特點, 還有重復性好、操作簡便等, 是免疫學檢驗中最為常用的方法之一。
3、MP-IgM單項檢測結果更靈敏
ELISA法僅檢測MP-IgM抗體,可在抗體水平尚未達到峰值時敏銳捕捉IgM抗體水平變化,靈敏度更高。而被動凝集法檢測的是混合抗體,當初次感染早期,或者再次感染時IgM水平不高的情況下,被動凝集法不能敏感地反應IgM抗體水平的變化。
4、 MP-IgM有效避免“凝集法假陽性”
肺炎支原體感染不能終身免疫,會反復感染,因此很多患者血清中存在既往感染產生的MP-IgG抗體。被動凝集法檢測的是IgM和IgG的混合抗體,因而凝集法陽性結果不能完全作為急性感染的指證。如以說明書中的≥1:40為判斷標準,會引入不少假陽性結果。為了減少IgG抗體的本底影響,一般指南指出凝集法的結果≥1:160才可作為近期感染的參考。但由此凝集法的敏感性也會相應下降。ELISA法僅檢測MP-IgM抗體,排除了IgG的干擾,結果更特異。
綜上所述,凝集法操作簡便,結果易讀,技術要求難度低,較適用于基層醫療機構開展。而ELISA-IgM檢測靈敏度高,特異性好,對肺炎支原體早期感染有更好的提示作用。