制備細胞裂解物：
1.每100ml培養物的細胞沉淀懸于4mlPBS；
2.加入溶菌酶至終濃度1mg/ml，冰上放置30min；
3.用針筒將10ml 0.2%Triton X-100強行注入細胞裂解物中，劇烈震動數次混勻；
4.加入DNase和RNase至終濃度5μg/ml，4℃震動溫育10min；
5.4℃ 3000g（5000r/min）離心30min；
6.上清轉移到一只新試管，加入DTT至終濃度為1mmol/L。
純化融合蛋白：
7.細胞裂解物與50%谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂勻漿混合，每100ml細胞培養物加2ml樹脂，于室溫下輕搖0min；
8.混合物于4℃以500g（2100r/min）離心5min，小心去掉上清并留樣少許進行SDS-PAGE；
9.沉淀中加入10倍標準體積的PBS，顛倒離心管數次混勻，洗去未與樹脂結合的蛋白；
10.4℃以500g（2100r/min）離心5min，小心去掉上清并留樣少許進行SDS-PAGE；
11.重復步驟9和10兩次；
12.結合的GST融合蛋白可用谷胱甘肽洗脫緩沖液洗脫，也可用凝血酶，腸激酶或Xa因子切割，釋放靶蛋白。
用谷胱甘肽洗脫融合蛋白：
a. 沉淀中加入1倍柱床體積的谷胱甘肽洗脫緩沖液，室溫輕輕攪動10min，洗脫樹脂上結合的蛋白；
b. 4℃以500g（2100r/min）離心5min，上清移至新管中；
c. 重復步驟a和b兩次，合并3次的上清。
蛋白酶解從結合的GST融合蛋白上回收靶細胞：
a. 在結合了融合蛋白的樹脂中加入凝血酶，腸激酶或Xa因子。每毫升樹脂加入50單位溶于1mlPBS的蛋白酶，顛倒離心管數次混勻，室溫下震蕩2-16h，用小規模實驗確定精確時間；
b. 4℃以500g（2100r/min）離心5min，上清移至新管中；
13.10%SDS-PAGE分析每一步（細胞抽提，洗滌和洗脫）樣品的蛋白質組成。
谷胱甘肽瓊脂糖樹脂的處理：
1.輕輕顛倒盛有谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂的容器，將樹脂混成勻漿；
2.取部分勻漿放入15ml聚丙烯管（每100ml細菌培養物需要2ml勻漿）；
3.4℃以500g（2100r/min）離心5min，小心去掉上清；
4.在樹脂中加入10倍柱床體積的冷的PBS，顛倒數次，混合勻漿，4℃以500g（2100r/min）離心5min，小心去掉上清；
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