離子交換色譜
實驗方法原理離子交換色譜是將離子交換基因(CM、SP、Q、DEAE等)鍵合于一定的惰性載體(纖維素、交聯葡聚糖,交聯瓊脂糖等)之上,并以此作為固定相,依據樣品所帶電荷的不同,從而與固定相上的離子交換基團相互作用的程度不同而進行分離的一種色譜方法。離子交換色譜技術已廣泛用于蛋白質、多肽、寡核苷酸、病毒、噬菌體、多糖等的純化。 離子交換劑是在載體上鍵合了一些離子交換基團,而離子交換基團在水溶液中通過電離釋放出游離的離子,這些離子可帶正電或帶負電,可以被溶液中的其它帶相同電荷的離子取代,并對離子交換劑有較強的結合力。結合力的大小不僅受離子與離子交換劑之間作用力的影響,而且主要受離子濃度的影響,這個過程中的作用力是靜電引力,離子交換的原理是靜電相互作用。 蛋白質在離子交換色譜上的保留時間取決于蛋白質在相應色譜條件下所帶靜電荷的多少,而蛋白質所帶靜電荷的多少是由蛋白質分子的pI和所處溶液環境的pH共同決定的。在酸性條件......閱讀全文
離子交換色譜的種類
1 前言 離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化方法,其原理是指被分離物質所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結合,這種帶電分子與固定相之間的結合作用是可逆的,在改變pH 或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時,離子交換劑上結合的物質可與洗脫液中的離子發生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質
離子交換色譜儀的離子交換過程
離子交換色譜儀的離子交換過程是離子交換樹脂中的活性離子(如A+)與溶液中的樣品離子(如B+)進行交換反應的過程。離子交換過程分五步進行:步驟一:B+從溶液擴散到樹脂表面。步驟二:B+從樹脂表面擴散到樹脂內部的交換中心。步驟三:在樹脂內部的交換中心處,B+與A+發生交換反應。步驟四:A+從樹脂內部的交
高效離子交換色譜儀離子交換樹脂簡介
高效離子交換色譜儀離子交換樹脂是由苯乙稀和二乙烯基苯聚合而成的網狀結構,不溶于水和有機溶劑,性質穩定。一、離子交換樹脂的類型:1、陽離子交換樹脂:可交換的離子為陽離子。應注意 PH 值范圍,否則交換容量急劇下降。2、陰離子交換樹脂:可交換的離子為陰離子。三、離子交換樹脂的特性:1、交聯度:表示交聯劑
離子交換色譜儀多糖基離子交換劑
離子交換色譜儀多糖基離子交換劑有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑:又稱離子交換纖維素,是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成。?微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀,經處理使之降解后漂洗、研磨、脫水、烘干和粉碎制成的。微
離子交換色譜儀離子交換劑的基質
離子交換色譜儀離子交換劑的基質有聚苯乙烯、親水性較強的材料、纖維素、葡聚糖和瓊脂糖等。一、聚苯乙烯:疏水性較強。適用于小分子物質的分離。二、親水性較強的材料:適用于蛋白質等大分子物質的分離。三、纖維素:分辨率和穩定性較低,價格較低。適用于初步分離和大量制備。四、葡聚糖:分辨率和價格適中,受外界影響較
離子交換色譜儀疏水性離子交換介質
離子交換色譜儀疏水性離子交換介質由基質、活性基團和可交換離子(反離子)組成,是一種與水親和力較小的合成樹脂,zui常見的是由苯乙烯與交聯劑二乙烯苯反應生成聚合物,在此結構中再以共價鍵引入不同的電荷基團制成的。一、按引入電荷基團的性質分類:1、陽離子交換樹脂:陽離子交換樹脂的電荷基團帶負電,反離子帶
離子交換色譜儀陽離子交換樹脂
離子交換色譜儀陽離子交換樹脂的電荷基團帶負電,反離子帶正電,可與溶液中的陽離子或帶正電荷化合物進行交換反應。陽離子交換樹脂按電荷基團酸性強弱可分為強酸性、弱酸性和中等酸性陽離子交換樹脂。一、強酸性陽離子交換樹脂:強酸性陽離子交換樹脂一般是以磺酸基(-SO3H)為活性基團的離子交換樹脂。含磺酸基的強酸
離子交換色譜儀親水性離子交換介質
離子交換色譜儀親水性離子交換介質(多糖基離子交換劑)與水親和力較大,有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑:又稱離子交換纖維素,是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成。微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀,經處理使之降解后漂
高效離子交換色譜儀離子交換樹脂簡介
高效離子交換色譜儀離子交換樹脂是由苯乙稀和二乙烯基苯聚合而成的網狀結構,不溶于水和有機溶劑,性質穩定。一、離子交換樹脂的類型:1、陽離子交換樹脂:可交換的離子為陽離子。應注意PH值范圍,否則交換容量急劇下降。2、陰離子交換樹脂:可交換的離子為陰離子。三、離子交換樹脂的特性:1、交聯度:表示交聯劑在樹
高效離子交換色譜儀離子交換劑類型
一、離子交換樹脂:? 1、凝膠型離子交換樹脂:??????? 溶脹空隙。(1)強酸性陽離子交換樹脂:??? 1)活性基團:-SO3H。??? 2)典型交換反應:RSO3H + NaCl = SO3Na + HCl??? 3)特點:使用時不受pH值限制。(2)弱酸性陽離子交換樹脂:??? 1)活性基團
影響離子交換色譜離子交換速率的因素
因為離子交換反應的速率極快,所以離子交換過程不是離子交換色譜中的控制步驟。離子交換包括離子在顆粒內的擴散和在顆粒外的擴散。離子在顆粒內的擴散速率與樹脂結構、顆粒大小、離子特性等因素有關;而在顆粒外的擴散速率與溶液的性質、濃度、流動狀態等因素有關。離子交換速率主要由內部擴散速率所控制。影響離子交換
離子交換色譜儀離子交換纖維素
離子交換色譜儀離子交換纖維素是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成,與水親和力較大。微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀,經處理使之降解后,漂洗、研磨、脫水、烘干、粉碎制成。微晶纖維素為白色或幾乎白色的細小粉末,無臭,無味,可壓成自身粘合的小片,可在水中迅速分散,不
離子交換色譜儀大網格離子交換樹脂
離子交換色譜儀大網格離子交換樹脂是由苯乙烯或丙烯酸與交聯劑二乙烯苯聚合,在合成時加入惰性致孔劑形成大孔,再引入活性基團而制成。樹脂內部的大孔孔徑可達1000nm,此類空隙不因外界條件而變,稱為“*孔”。由于大孔對光線的漫反射,從外觀上看樹脂呈不透明狀。大網格離子交換樹脂的合成成功是離子交換技術最重要
離子交換色譜儀瓊脂糖離子交換劑
離子交換色譜儀瓊脂糖離子交換劑主要以交聯瓊脂糖CL-6B為基質,通過化學方法引入電荷基團制成的。一、按引入電荷基團的性質分類:1、陽離子交換瓊脂糖:CM-Sepharose CL-6B等。2、陰離子交換瓊脂糖:DEAE-Sepharose CL-6B等。二、特點:具有硬度大、性質穩定、網孔大、流速好
離子交換色譜儀疏水性離子交換劑分類
離子交換色譜儀疏水性離子交換劑由基質、活性基團和可交換離子組成,是一種與水親和力較小的人工合成樹脂,分類有多種。一、按引入電荷基團的性質可分為:1、陽離子交換樹脂:陽離子交換樹脂的電荷基團帶負電,反離子帶正電,可與溶液中的陽離子或帶正電荷化合物進行交換反應。按電荷基團酸性強弱可分為:(1)強酸型:
離子交換色譜儀離子交換樹脂的基本結構
離子交換色譜儀離子交換樹脂由固體載體、活性基團和可交換離子組成。一、固體載體:為不溶性的三維空間的高分子網狀骨架,具有良好的親水性、水不溶性、較好的化學穩定性和連接較多的活性基團。常用的載體:1、化學合成載體:如聚苯乙烯樹脂等。2、天然材料制成的載體:如瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠和纖維素等。二、活性基團
離子交換色譜儀離子交換樹脂的交換容量
離子交換色譜儀離子交換樹脂的交換容量是指離子交換樹脂能提供交換離子的量,是表征離子交換樹脂活性基團數量或交換能力的重要參數。一般情況下,交聯度越低,活性基團數量越多,交換容量越大。通常以每毫克或每毫升樹脂中含有可解離基團的毫克當量數(meq/mg或meq/mL)表示。一、理論交換容量:理論交換容量是
高效離子交換色譜儀親水性離子交換介質
?? 高效離子交換色譜儀親水性離子交換介質(多糖基離子交換劑)與水親和力較大,有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑:??????? 又稱離子交換纖維素,是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成。??????? 微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物
離子交換色譜儀纖維素離子交換劑
離子交換色譜儀纖維素離子交換劑是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成,與水親和力較大,又稱離子交換纖維素。微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀,經處理使之降解后,漂洗、研磨、脫水、烘干、粉碎制成。微晶纖維素為白色或幾乎白色的細小粉末,無臭,無味,可壓成自身粘合的小片
離子交換色譜儀凝膠型離子交換樹脂特點
離子交換色譜儀凝膠型離子交換樹脂由苯乙烯或丙烯酸與交聯劑二乙烯苯聚合而成,適用于無機小分子的分離。一、凝膠型樹脂呈透明或半透明狀,吸水后形成微細的孔隙。均孔型樹脂主要是凝膠型陰離子交換樹脂,孔徑均勻,交換容量大,機械強度高。二、凝膠型樹脂水化后處在溶脹狀態,交聯鏈之間的距離拉長,形成2~3nm空隙,
離子交換色譜儀分類
離子交換色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分:實驗室離子交換色譜儀和工業離子交換色譜儀。2、按功能可分:離子交換分析色譜儀和離子交換制備色譜儀。3、按結構可分:臺式離子交換色譜儀和落地式離子交換色譜儀。4、按分離規模可分:微型離子交換色譜儀、小型離子交換色譜儀和大型離子交換色譜儀。5、按用途可分:離
離子交換色譜法原理
?離子交換色譜法原理 :離子交換色譜法的固定相是離子交換樹脂,流動相是水溶液,它是利用待測樣品中各組分離子與離子交換樹脂的親和力的不同而進行分離的。
離子交換色譜儀概述
20世紀40年代初,離子交換色譜儀用于稀土元素和裂變產物的分離,對原子能工業的發展起了重要作用。近年來隨著液相色譜儀技術的飛速發展和各種新型離子交換材料的出現,離子交換色譜儀獲得了很大發展。一、基本原理:組分在離子交換色譜儀固定相上發生反復離子交換反應,組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑、電
離子交換色譜分析
離子交換色譜中的固定相是一些帶電荷的基團, 這些帶電基團通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結合。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子,按照質量作用定律,這些離子將與結合在固定相上的反離子進行交換。固定相基團帶正電荷的時候,其可交換離子為陰離子,這種離子交換劑為陰離子交換劑;固定相的帶電基團帶負電
關于離子交換色譜的介紹
離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換,由于各組分離子的交換能力不同,從而達到色譜的分離。 離子交換色譜法是新發展起來的一項現代分析技術,已廣泛用于氨基酸、蛋白質的分析,也適合于某些無機離子(NO3-、SO42-、Cl-等無機陰離子和Na+、Ca2+、
離子交換色譜儀概述
20世紀40年代初,離子交換色譜儀用于稀土元素和裂變產物的分離,對原子能工業的發展起了重要作用。近年來隨著高效液相色譜儀技術的飛速發展和各種新型離子交換材料的出現,離子交換色譜儀獲得了很大發展。一、基本原理:組分在離子交換色譜儀固定相上發生反復離子交換反應,組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑
離子交換色譜法介紹
離子交換色譜法(Ion-exchange Chromatography)?IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子進行可逆交換,依據這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例,其交換過程可表示如下:?X-(溶劑中)
離子交換色譜介質的選擇
離子交換介質首先要考慮目的分子的大小,因為目的分子會影響其接近介質上的帶電功能集團,因此也會影響介質對目的分子的動力載量,從而影響其分離。對于大多數純化步驟來說,建議從開始的階段使用強離子交換柱,可在摸索方法的過程中有一個寬的pH 范圍。對于已知等電點的蛋白質,可根據其等電點來選擇。而未知等電點
簡介離子交換色譜的原理
離子交換是利用一種不溶性高分子化合物,它的分子中具有解離性基團(交換基),在水溶液中能與溶液中的其他陽離子或陰離子起交換作用。此種交換反應都是可逆的,一般也都是遵循化學平衡的規律。雖然交換反應都是平衡反應,但在色譜柱上進行時,由于連續添加新的交換溶液,平衡不斷按正反應方向進行,直至完全,因此可以
離子交換色譜的應用方向
離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應用于無機離子的分離,而且廣泛地應用于有機和生物物質,如氨基酸、核酸、蛋白質等的分離,在生物化學領域得到了廣泛的應用。