機體免疫功能檢測—外周血T細胞、B細胞、NK細胞同步檢測法
實驗步驟展開 ......閱讀全文
體液免疫功能檢查B細胞數目及功能的檢測
原發性免疫缺陷和繼發性免疫缺陷均可導致體液免疫功能下降。原發性體液免疫功能缺陷可能由于B細胞分化障礙,細胞內合成Ig功能紊亂或由于抑制性細胞功能過強。繼發性體液免疫功能降低可能由于蛋白質大量丟失,蛋白質吸收障礙、營養不良、免疫抑制治療的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在診斷原發性體液免疫功能缺損中
外周血淋巴細胞HLAB27表達檢測
試驗原理??????? HLA-B27屬于1型MHC基因。基本上表達在機體所有有核細胞上,特別是淋巴細胞表面有豐富的含量。使用熒光定量標準微球,校正HLA-B27實驗條件后,測定樣本中T淋巴細胞HLA-B27表達水平。若HLA-B27表達水平大于標準微球設定MARK,則為陽性結果;若HLA-
磁珠法分離T細胞和B細胞
基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4 + 細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2 2
人外周血B、T淋巴細胞的分離方法
目前常用Ficoll密度梯度離心法直接分離和純化外周血單個核細胞。方法: 1. 在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。 2. 取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPMI1640充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,注意保持清楚的界面。水平離心2000rpm×20分鐘。 3. 離心
自然殺傷細胞NK細胞的細胞功能
自然殺傷活性由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒
NK細胞活性檢測實驗步驟
細胞毒檢測技術包括補體依賴細胞毒試驗、NK細胞介導的細胞毒試驗和特異性CTL活性檢測,常用的實驗技術有后兩種。NK細胞(natural killer cell)是在天然免疫系統發揮主要作用的效應細胞,可直接殺傷病毒感染的靶細胞和某些腫瘤細胞。而細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxic T lymp
Cell:B細胞誘導T細胞抗腫瘤免疫機制
近日,美國耶魯大學的研究團隊發現B細胞誘導腫瘤抗原特異性的濾泡輔助性CD4+T 細胞,從而發揮抗腫瘤免疫應答作用的機制。相關研究成果發表在《Cell》,題為:Neoantigen-driven B cell and CD4 T follicular helper cell collaborati
磁珠法分離小鼠T細胞和B細胞
PriCells: 磁珠法分離小鼠T細胞和B細胞?基本方案用AUTOMACS系統進行總T細胞、CD4+細胞或CD8+T細胞的自動分離?實驗材料1、小鼠2、HBSS洗滌緩沖液3、MACS緩沖液4、磁珠5、RPMI-10完全培養基6、AUTOMACS系統和分選柱7、30μm尼龍網或40μm預分離濾膜?實
關于免疫細胞的功能檢測—抗體分泌細胞檢測的介紹
分泌抗體的漿細胞由B細胞分化而來,但在此分化過程中,往往需要T細胞與單核–巨噬細胞協作。因此,對抗體分泌細胞的檢測,實際上是對B細胞、T細胞和巨噬細胞功能的綜合性評價。抗體分泌細胞的檢測可分為針對某種抗原的特異抗體分泌細胞的檢測,以及無一定特異性的免疫球蛋白分泌細胞的檢測。在自然條件下,體內存在
免疫細胞的NK淋巴細胞介紹
NK細胞(natural killer cell,自然殺傷細胞)是與T、B細胞并列的第三類群淋巴細胞。NK細胞數量較少,在外周血中約占淋巴細胞總數的15%,在脾內約有3%~4%,也可出現在肺臟、肝臟和腸粘膜,但在胸腺、淋巴結和胸導管中罕見。 NK細胞較大,含有胞漿顆粒,故稱大顆粒淋巴細胞。NK
流式細胞儀檢測外周血樹突狀細胞
概述樹突狀細胞(DC)的主要功能是吸收抗原,進行加工,并向T淋巴細胞呈遞。其它抗原呈遞細胞也有此功能,如B淋巴細胞和單核細胞。但是,與其它細胞不同的是,DC細胞具有誘導初發免疫反應的獨特功能,例如,可以活化處女T細胞(Naive T cell)。DC細胞存在于外周淋巴組織中,已在血液和非淋巴器官中發
T細胞怎么樣進行功能檢測?
1.皮膚試驗 主要檢測T細胞的遲發型超敏反應能力。結核菌素、白色念珠菌素等幾種抗原同時試驗,凡3種以上抗原皮試陽性者為正常,少于2種陽性或在48小時反應直徑小于10mm,則提示免疫缺陷或反應性降低。但2歲以內兒童可能因未曾致敏而出現陰性反應。2.T細胞功能體外試驗 通常用PHA刺激淋巴細胞的增殖、轉
T、B及其他免疫細胞的純化
經密度梯度離心法獲得的單個核細胞是不均一的細胞群,還可根據各種細胞的生物學特性、表面標記等進一步純化。例如單核細胞等具有粘附和吞噬作用,可用玻璃或塑料容器的粘壁法和吞噬羰基鐵顆粒的磁鐵吸引法除去或獲得。綿羊紅細胞能與人T細胞形成E花環,藉此可通過花環沉降法分離T與B淋巴細胞。此外,利用B細胞具有
免疫學檢測法檢測細胞因子
細胞因子均為蛋白或多肽,具有較強的抗原性。隨著重組細胞因子的出現,可較方便地獲得細胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體,因此可利用抗原抗體特異性反應的特性,用免疫學技術定量檢測細胞因子。盡管細胞因子種類繁多,只要獲得了針對某一因子的特異性抗體(包括多克隆抗體或單克隆抗體)均可采用相似的技術開展工作。
壓力或能調節機體免疫細胞的功能
機體對一般感染跡象產生有效的免疫反應常常會被稱之為先天性免疫反應的免疫系統分支所調節,這些有效的免疫反應對于去除機體有害的細菌至關重要,這種反應會在感染過度出現時結束,其能夠減緩和阻斷機體任何不需要的炎癥反應。目前,鑒于缺乏靶向作用有害炎癥的可用策略同時還要保留有益的宿主防御力,因此確定炎癥是否
關于免疫細胞的功能檢測—中性粒細胞吞噬功能檢測的介紹
血液白細胞中占比例最大的就是中性粒細胞,它能作變形運動,吞噬異物。對中性粒細胞吞噬功能的檢測常用形態學方法,于顯微鏡下觀察,以綜合評價其吞噬功能。中性粒細胞在吞噬細菌或異物后,還需要消化分解異物。這種能力與葡萄糖在細胞內的氧化分解有關,可通過葡萄糖氧化脫氫的過程來了解中性粒細胞在吞噬異物后,消化
NK-T細胞的基本信息
中文名稱NK T細胞英文名稱NK T cell定 義同時顯示NK細胞和T細胞某些特征的一類免疫細胞,具有細胞毒性和免疫調節作用,可被CD1分子提呈的脂類抗原所激活。應用學科免疫學(一級學科),免疫系統(二級學科),免疫細胞(三級學科)
T-細胞及B-細胞的分離
將淋巴細胞懸液通過尼龍棉柱,B 細胞粘附于尼龍棉上,T細胞則不粘附,先用RPMI l640 培基洗脫尼龍棉柱,流下的細胞懸液含有豐富的T 細胞。然后用力反復擠壓尼龍柱、擠出粘附在尼龍棉上的B 細胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脫,此細胞懸液含有豐富的B 細胞。尼龍柱(塑料管)的長短和尼龍棉的
免疫細胞功能檢測的臨床應用
免疫細胞功能檢測的臨床應用:–測定細胞表面特性–細胞體積大小–分析細胞DNA、RNA含量–分析細胞內某種蛋白質的含量?免疫學方面的具體應用:–分析和分類 細胞亞群–分離各類 細胞–分離活細胞和死細胞–用微量板代替收集管來克隆單個細胞–分析細胞周期動力學–檢測稀有的細胞
免疫細胞功能檢測的臨床應用
免疫細胞功能檢測可以反映機體免疫功能狀態,同時還可用于腫瘤、免疫缺陷病等疾病的診斷和預后監測。如免疫細胞的功能試驗可幫助免疫缺陷病的診斷;腫瘤患者的細胞免疫功能狀態監測有助于了解腫瘤的發展與預后判斷;組織器官移植后對受者的細胞免疫學功能監測則有利于排斥反應的早期發現,以便及時采取有效措施。
紅細胞免疫功能的檢測方法
實驗概要人及多種動物紅細胞與白細胞一樣,也具有重要的免疫功能。其基礎是紅細胞表面具有C3b受體(C3bR)。紅細胞可通過其表面的C3bR,發揮清除免疫復合物(IC)、促進吞噬、提呈抗原及激活補體等多種作用。因此,建立的檢測紅細胞免疫功能的各種方法,也多以紅細胞表面的C3bR為基礎設計的。現已建立的方
紅細胞免疫功能的檢測方法
實驗概要人及多種動物紅細胞與白細胞一樣,也具有重要的免疫功能。其基礎是紅細胞表面具有C3b受體(C3bR)。紅細胞可通過其表面的C3bR,發揮清除免疫復合物(IC)、促進吞噬、提呈抗原及激活補體等多種作用。因此,建立的檢測紅細胞免疫功能的各種方法,也多以紅細胞表面的C3bR為基礎設計的。現已建立的方
機體免疫功能的檢測
外周血T細胞、B細胞、NK細胞的同步檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟
機體免疫功能的檢測
外周血T細胞、B細胞、NK細胞的同步檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟
結核感染T細胞檢測
我國是全球五大結核病最高發國家之一,結核病患者數量居世界第二位。近年來,由于多發耐藥結核、結核桿菌與HIV的雙重感染以及流動人口的增多,結核病疫情出現回升,嚴重危害著廣大人民群眾的身體健康。據衛生部門最新調查數據顯示,我國結核感染率為44.5%,結核感染人數約5.5億人,明顯高出全球平均感染水平。每
BrdU檢測丁細胞和B細胞增殖
基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液(口 服用)或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液(注射用)P B S , p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D N A
JCB:揭示機體NK細胞破壞疾病細胞降低損傷的分子機理
當機體NK細胞遇到癌細胞或受病毒感染的細胞時,其就會吸附到這些細胞上,并且在與疾病細胞接觸的位置快速聚集破壞性的顆粒,這些顆粒包含能夠破壞細胞的特殊分子,隨后這些顆粒就會釋放到靶向細胞上并且殺滅疾病的細胞;近日一項刊登在國際雜志The Journal of Cell Biology上的研究報告中
乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 乳酸脫氫酶(LDH)是活細胞胞漿內含酶之一。在正常情況下,不能透過細胞膜。當靶細胞受到效應細胞的攻擊而損傷時,細胞膜通透性改變,LDH可釋放至介質中,釋放出來的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的過程中,使氧化型輔酶I(NAD+)變成
乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗
實驗方法原理乳酸脫氫酶(LDH)是活細胞胞漿內含酶之一。在正常情況下,不能透過細胞膜。當靶細胞受到效應細胞的攻擊而損傷時,細胞膜通透性改變,LDH可釋放至介質中,釋放出來的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的過程中,使氧化型輔酶I(NAD+)變成還原型輔酶I (NADH2),后者再通過遞氫體-吩嗪二甲酯硫酸
乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性實驗
實驗方法原理 乳酸脫氫酶(LDH)是活細胞胞漿內含酶之一。在正常情況下,不能透過細胞膜。當靶細胞受到效應細胞的攻擊而損傷時,細胞膜通透性改變,LDH可釋放至介質中,釋放出來的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的過程中,使氧化型輔酶I(NAD+)變成還原型輔酶I (NADH2),后者再通過遞氫體-吩嗪