PCR假陰性的原因分析
PCR假陽性問題是在PCR誕生之初就被深刻認識到了，同時由于造成假陽性的因素相對單一，因此假陽性并不是困惑檢驗工作的主要原因。如果一個項目只是陽性率高敏感性好的話，那么可以認為其陰性結果具備很高的可排除性，仍然有相當的臨床適用價值。但PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重，并且用些因素經常被人忽略，嚴重的影響了PCR的使用。可以想象一種假陽性和假陰性都很高的項目，有什么樣的診斷價值。造成PCR假陰性的原因是復雜的，也是多樣的。主要有：1.PCR儀本身的質量問題。PCR儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題（如：溫控不準等）給臨床帶來了諸如非特異性擴增（假陽性）、擴增效率下降(假陰性）等問題。（具體另外講述）2.離心機問題。離心機的質量或使用不正確，造成離心標本模板沒有分離出來造成假陰性，竊以為這是最易被忽視的問題。其時離心機使用問題不僅在PCR，在整個檢驗工作中都是最易被忽視的問題，只是因為在其他工作中不象PCR那樣明顯影響檢測結果......閱讀全文
血培養檢測:－MRSA結果或可呈假陰性
?????近日，美國食品與藥品管理局（FDA）與Cepheid公司聯合發布1級召回公告，宣布召回該公司在2008年10月21日～2010年6月21日期間生產和配發的用于GeneXpert Dx系統的Xpert耐甲氧西林金黃色葡萄球菌/金黃色葡萄球菌（MRSA/SA）血培養檢測試劑盒。 本次召回產品
什么是PCR假陽性？
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
探討兩種方法檢測HBsAg假陽性和假陰性的影響因素
目前HBsAg的檢測方法很多，但是在臨床實驗室檢測HBsAg的方法最常用的主要是金標法和酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。常常會有患者及其他工作人員反映HBsAg檢驗結果與其他醫療單位不一致，為此常會發生醫療糾紛。因此，提高HBsAg檢測的準確性，避免假陽性和假陰性所造成的不良社會影響，是我們臨床檢驗
高靈數字PCR檢測法+檢測試劑盒=避免新冠肺炎假陰性問題
中國計量科學研究院（以下簡稱“中國計量院”）前沿中心生命科學計量團隊成功研發了針對新型冠狀病毒的新型檢測方法和對應試劑盒——高靈敏數字PCR檢測法和檢測試劑盒。該方法較現行通用的RT-PCR法靈敏度顯著提升，已進行驗證測試，并將同步有序開展推廣應用。 該方法和試劑盒主要基于數字PCR系統完成相
使用血液進行基因檢測如何減少假陰性
基因檢測-入門攻略什么是基因檢測？腫瘤基因檢測是通過特定檢測設備對被檢測者細胞中的DNA分子信息作檢測，分析它所含有的各種基因突變情況，從而能針對性地為每位患者“量身定制”一套最合適的治療方案。它是腫瘤精準醫療的基礎。選擇什么樣本最合適？做基因檢測，是檢測腫瘤細胞的突變，因此需要獲取腫瘤細胞。臨床上
PCR假陽性產生原因分析
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
什么是菌落pcr假陽性
利用菌落作為模板進行PCR擴增，驗證該菌落里是否帶有目標片段。但是由于PCR是一個級聯放大的過程，所以即使菌落中不含有目標片段，而是菌落表面沾有一部分之前連接，轉化中用的目標DNA，也會導致PCR獲得擴增條帶，從而誤認為這個菌落已經帶有了目標片段，稱之為假陽性。可以通過提質粒酶切，或者測序驗證，排除
PCR陰性對照總是跑出陽性條帶
實驗室體系或者環境有污染，把所有的物料都換了，同時換一個房間重做，試試吧
PCR反應的陰性相關問題
需注意的是有時忘加Taq酶或溴乙錠。 引物：引物質量、引物的濃度、兩條引物的濃度是否對稱，是PCR失敗或擴增條帶不理想、容易彌散的常見原因。有些批號的引物合成質量有問題，兩條引物一條濃度高，一條濃度低，造成低效率的不對稱擴增，對策為：①選定一個好的引物合成單位。②引物的濃度不僅要看OD值，更要
熒光定量pcr陰性對照的定義
NC的作用在于消除試劑污染的因素～如果NC（無模板）也有擴增曲線那么說明試劑污染較為嚴重～所謂的陰性就是一定實驗后是沒有結果的～
PCR陰性對照始終有條帶
個原因：就是你的PCR體系中任一一個試劑被模板污染了，把把PCR的試劑全部換新
新冠病毒核酸檢測結果假陰性的再思考
近期專家及民眾對2019-新型冠狀病毒核酸陽性檢出率低、咽拭子屢次陰性、核酸檢測與臨床診斷不吻合等問題提出各種觀點或疑惑。回顧近三年我們對呼吸道感染患兒不同取材部位多種呼吸道病原體檢出率的研究，供大家參考，希望對2019-新型冠狀病毒核酸檢測有所指導，對臨床醫生選擇采樣位置以及解讀結果有所啟示，對民
最高可賣300歐元！國外假核酸陰性證明泛濫
據阿根廷布宜諾斯艾利斯經濟新聞網3月16日報道，隨著隔離措施的放松，人們開始在本國和鄰國進行更多的旅行。有人試圖提供虛假核酸檢測陰性證明牟利，歐洲警方已逮捕多名嫌疑人。 這種趨勢也在阿根廷出現，但阿國家衛生部不鼓勵出國旅行，主要是因為新冠病毒的新毒株仍然構成威脅。與此同時，有人試圖利用人們的旅
白血病免疫分型中假陰性，孰之過
做淋巴瘤免疫分型的FLOWER應該碰到不少這種情形：臨床表現很像淋巴瘤，但偏偏骨髓免疫分型檢測時沒測到腫瘤細胞，即“假陰性”，這是什么原因呢？是流式的問題嗎？簡單的說，可能是，也可能不是。復雜的說，以B細胞淋巴瘤為例，歸納為以下幾點：1、樣本采集問題對于血液或體液樣本，是不會存在這種問題的，但是如果
新冠肺炎檢測“假陰性”頻出，問題究竟出在哪？
最近，關于新冠肺炎核酸檢測假陰性的問題得到多家媒體報道。《南方周末》的報道顯示，在浙江一所醫院，有的病人測了6次核酸試劑都為陰性，直到第7次才測出陽性。而剛剛去世的李文亮醫生，在1月11、12號就有發熱癥狀住院，之后住進重癥監護室，但兩次核酸檢測結果均為陰性，直到2月1日核酸檢測結果才顯示陽性。
PCR儀PCR結果出現假陽性是什么原因？
假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔
尿液分析儀檢測出現假陰性的原因分析
假陰性 。即鏡檢陽性，尿液分析儀潛血反應陰性，其常見原因有： （1）食物或藥物的影響：由于飲食或藥物使尿液呈堿性時，RBC溶解破裂，形成褐色顆粒，潛血反應呈陽性，而鏡檢呈陰性。 （2）VitC 尿液中大量存在時，能競爭性奪取反應產生的氧，引起假陰性反應。 （3）高比重、高蛋白尿樣降低了試劑
尿紅細胞在沉渣鏡檢中假陰性的探討
作者單位：沁源縣人民醫院,山西沁源046500;?隨著現代科學技術的迅速發展，尿液分析儀的普及，全自動尿沉渣分析儀的開發使用，對尿液有形成份進行精確計數及分類，具有快速、簡便、精確度好、多參數等優點。但是，顯微鏡對尿沉渣的檢查仍然有一定的作用。在實際工作中，由于主觀或客觀因素引起結果的誤差，影響著尿
維生素C可以導致便潛血結果的假陰性
維生素C可以導致便潛血結果的假陰性，怎樣消除維生素C對結果的影響？北京積水潭醫院檢驗科吳俊主任：便潛血實驗一般推薦雙法檢測，即化學法+免疫法，化學法原理為過氧化物染色來判斷陽性，容易受還原性物質（如維生素C）的影響，化學法檢測抗原量寬，不受“前帶效應”影響；免疫法為血紅蛋白單抗的層析法，受還原物質的
早早孕檢測：警惕－βhCG－核心片段可致假陰性結果
眾所周知，通過檢測尿液中的人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）水平，可判斷是否為早期妊娠。hCG 是受孕后胎盤細胞分泌的糖蛋白激素, 胚胎著床 7 天, 尿中就可測出, 隨妊娠期增加分泌含量呈一定規律, 測定 hCG 在尿液標本中的濃度可視為判斷妊娠
導致PCR假陽性的污染源
?PCR反應的特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。一、標本交叉污染源：收集標本的容器：標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；吸樣槍：標本核酸模板在提取過程中，由于污染導致標本間污染；氣溶膠：zui可能
PCR－反應出現假陽性結果原因
1 ) 引物設計不合適： 選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而，在進行PCR擴增時，擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現假陽性。需重新設計引物。 2 ) 靶序列或擴增產物的交叉污染： 這種污染有兩種原因： 一是整個基因組或大片段的交叉污染，導致假
菌落pcr會出現假陽性結果嗎
最近做酶切連接轉化，最后做鑒定時，以菌落為模板進行PCR時可以見到有目的條帶;當把菌落接種到LB液擴菌后，以菌液為模板進行PCR時卻什么東東都沒有?請問會是什么原因啊?多多指教啊!建議重新以菌落為模板進行PCR檢測，再重新以菌液為模板進行PCR檢測，因為菌落或者菌液PCR假陽性的幾率還是比較高的。但
為什么pcr陰性總有條帶出現
提高退火溫度，或重新設計引物，或者是陰性對照被污染，當然還有其它好多小原因，要是還沒解決，請細說并追問。
pcr－陰性對照出現條帶，怎么辦
這個是分子實驗室常見問題，有人說是由于氣溶膠引起的假陽性。首先要防止污染，其次要優化PCR體系及反應程序。
核酸檢測頻頻出現“假陰性”－專業人士怎么看？
近日，多家媒體報道，全國有多例咽拭子核酸檢測“假陰性”病例被發現。圖片來源于網絡 中國工程院副院長、中國醫學科學院院長王辰在接受央視采訪時說：“并不是所有的病患都能檢測出核酸陽性，對于真是新型冠狀病毒感染的病人，也不過只有30%至50%的陽性率。通過采集疑似病例咽拭子的辦法，還是有很多假陰性
PCR產物的假陽性的相關問題介紹
出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。 引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行PCR擴增時，擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現假陽性。需重新設計引物。 靶序列或擴增產物的交叉污染：這種污染有兩種原因：
PCR反應陰性對照也出現明顯擴增的原因
反應體系組分（如，水）被污染：實驗過程中，更換新的Mix或者水重復實驗；標本間的交叉污染或產物污染：反應體系在超凈工作臺內配制，對實驗室進行嚴格的區分，減少氣溶膠污染；使用帶濾芯的槍頭；引物二聚體的出現：一般在35循環以后陰性對照出現擴增屬正常情況，可配合熔解曲線，PCR產物的瓊脂糖電泳結果進行分析
熒光定量PCR－陰性對照曲線上揚為什么
熒光定量PCR 陰性對照曲線上揚為什么溶解曲線是判斷擴增產物是否單一的曲線，顧名思義，其跟模板（或其濃度）沒有關系，擴增什么基因就應該有其相對應的溶解曲線，類似于電泳。那么你擴增幾種基因就應該有幾種對應的峰（一般SYBR法的目的基因在80~90℃之間），我說的是一般情況，這個跟擴增片段長短有關系。出
血清IgG4檢測中的假陰性——前帶效應不可小覷！
IgG4相關疾病是目前備受醫學界關注的一類疾病，血清IgG4水平升高、受累組織IgG4陽性漿細胞浸潤及纖維化是該病的主要特征。其中，血清IgG4水平檢測因其具有較好的診斷靈敏度、特異性和無創性的特點，成為IgG4相關疾病的重要診斷標志物。當血清IgG4水平顯示為“正常范圍”時，常不利于給出IgG4相