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  • 概述基因治療的基本步驟

    1、轉移 在基因治療中迄今所應用的目的基因轉移方法可分為兩大類:病毒方法和非病毒方法。基因轉移的病毒方法中,RNA和DNA病毒都可用為基因轉移的載體。常用的有反轉錄病毒載體和腺病毒載體。轉移的基本過程是將目的基因重組到病毒基因組中,然后把重組病毒感染宿主細胞,以使目的基因能整合到宿主基因組內。非病毒方法有磷酸鈣沉淀法、脂質體轉染法、顯微注射法等。 2、表達 目的基因的表達是基因治療的關鍵之一。為此,可運用連鎖基因擴增等方法適當提高外源基因在細胞中的拷貝數。在重組病毒上連接啟動子或增強子等基因表達的控制信號,使整合在宿主基因組中的新基因高效表達,產生所需的某種蛋白質。 3、安全措施 為避免基因治療的風險,在應用于臨床之前,必須保證轉移-表達系統絕對安全,使新基因在宿主細胞表達后不危害細胞和人體自身,不引起癌基因的激活和抗癌基因的失活等,尤其是在將反轉錄載體用于基因轉移時,必須在應用到人體前預先在人骨髓細胞、小鼠體內和......閱讀全文

    免疫印跡的基本步驟

    免疫印跡法( 以抗原分析為例)基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因采用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。

    免疫印跡的基本步驟

    免疫印跡法( 以抗原分析為例)基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因采用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。

    酸度計的概述及使用步驟

    酸度計是測定溶液pH值的儀器。酸度計的主體是精密的電位計。測定時把復合電極插在被測溶液中,由于被測溶液的酸度(氫離子濃度)不同而產生不同的電動勢,將它通過直流放大器放大,后由讀數指示器(電壓表)指出被測溶液的pH值。酸度計能在0~14pH值范圍內使用。    酸度計有臺式、便攜式、表型式等多種,讀數

    鹽度計的基本概述

    一、鹽度計的使用原理:? ? ? ?因為光線從一種介質進入另一種介質時會產生折射現象,且入射角正弦之比恒為定值,此比值稱為折光率。利用鹽溶液中可溶性物質含量與折光率在普通環境下成正比例,可以測定出鹽溶液的折光率。這樣鹽度計/折射儀就求算出鹽的濃度。注:鹽度計是折射儀(折光儀)的細分型。?二、鹽度計的

    關于腦脊液的基本概述

      腦脊液:腦脊液是存在于腦室及蛛網膜下腔的一種無色透明的液體。比重為1.005,總量為130~150ml。平均每日產生量為524ml。腦脊液包圍并支持著整個腦及脊髓,有效地使腦的重量作用減少至1/6,對外傷起一定的保護作用。在清除代謝產物及炎性滲出物方面,起著身體其它部位淋巴液所起的作用。

    概述抗體的基本結構

      經x線晶體衍射結構分析發現,Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結構,稱為Ig單體,是構成抗體的基本單位。  (一)重鏈和輕鏈  天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為

    肝昏迷的基本概述

      肝臟是人體重要的解毒器官。人體新陳代謝產生的各種有害物質都必須經過肝臟的解毒處理,生命得以維持。當嚴重的肝病(如肝硬化、急性肝炎、肝癌)引起的代謝紊亂,肝解毒功能嚴重損害,使中樞神經系統中毒發生昏迷,稱為肝昏迷

    肝昏迷的基本概述

      肝臟是人體重要的解毒器官。人體新陳代謝產生的各種有害物質都必須經過肝臟的解毒處理,生命得以維持。當嚴重的肝病(如肝硬化、急性肝炎、肝癌)引起的代謝紊亂,肝解毒功能嚴重損害,使中樞神經系統中毒發生昏迷,稱為肝昏迷

    分離膜的基本概述

      分離膜:是一種具有選擇性透過能力的膜型材料。通常按分離機理和適用范圍可分為微濾膜,超濾膜,納濾膜,反滲透膜,滲透蒸發膜,離子交換膜等。  分離膜是指能以特定形式限制和傳遞流體物質的分隔兩相或兩部分的界面。膜的形式可以是固態的,也可以是液態的。被膜分割的流體物質可以是液態的,也可以是氣態的。  分

    氣虛咳嗽的基本概述

      氣虛咳嗽,病癥名。氣虛引起的咳嗽。多因勞役過度,肺氣有傷;或飲食勞倦,中氣有損,土不生金所致。證見面黃肌瘦,氣怯神離,咳嗽吐痰,痰色清稀,飲食減少。治宜健脾益氣補肺,方用四君子湯、參術膏、補中益氣湯、瓊玉膏、生脈散等。

    有關測厚儀的基本概述

    有關測厚儀的基本概述:一.測厚儀的使用及注意事項首先是選擇探頭。測厚用探頭一般要根據測厚范圍,測量精度和工件條件來選擇。雙晶片探頭比較好,它的測量范圍較寬,下限較低。測厚時被測工件的表面處理與探傷時的要求相同。對粗糙表面測厚,要求打磨的面積不大,關鍵在于平整。藕合劑選用也同探傷時一樣,對小徑管管壁和

    鹽度計的基本概述

    一、鹽度計的使用原理:? ? ? ?因為光線從一種介質進入另一種介質時會產生折射現象,且入射角正弦之比恒為定值,此比值稱為折光率。利用鹽溶液中可溶性物質含量與折光率在普通環境下成正比例,可以測定出鹽溶液的折光率。這樣鹽度計/折射儀就求算出鹽的濃度。注:鹽度計是折射儀(折光儀)的細分型。?二、鹽度計的

    痕量分析基本步驟

    痕量分析包括測定痕量元素在試樣中的總濃度,和用探針技術測定痕量元素在試樣中或試樣表面的分布狀況。一般分成3 個基本步驟:取樣、樣品預處理和測定。由于被測元素在樣品中含量很低、分布很不均勻,特別是環境樣品,往往隨時間、空間變化波動很大,要充分注意取樣的代表性和保證一定的樣品量。

    免疫PCR:基本實驗步驟

    主要程序(1) 抗原+生物素化抗體→抗原-生物素化抗體復合物;(2) 加親合素→抗原-生物素化抗體-親合素復合物;(3) 加生物素化DNA→抗原-生物素化抗體-親合素-生物素化DNA;(4) PCR擴增生物素化DNA部分。實驗步驟(1)制備生物素化DNA將噬粒 BLuescript skt,用生物素

    PCR技術基本反應步驟

    PCR是Polymerase Chain Reaction(聚合酶鏈式反應)的首字母縮寫,簡單說來,PCR是由高溫變性—低溫退火—中溫延伸三個基本反應步驟構成:01 DNA的變性成為單鏈模板DNA經加熱至95℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈解離成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;02低溫

    固相萃取基本步驟

    典型的固相萃取一般分為以下五個基本步驟:①根據檢測量的大小以及待檢物質的化學、物理性質,選擇合適的吸附柱。②活化填料。有利于吸附劑和目標物質相互作用,提高回收率。一般采用甲醇來活化,另外甲醇還能起到除雜的作用。每一活化溶劑的用量為(1~2)m/100mg固定相。③進樣。使樣品流經吸附柱并被吸附。為了

    基因治療的概念

    狹義概念指用具有正常功能的基因置換或增補患者體內有缺陷的基因,因而達到治療疾病的目的。廣義概念基因治療指把某些遺傳物質轉移到患者體內,使其在體內表達,最終達到治療某種疾病的方法。

    基因治療的概念

    狹義概念指用具有正常功能的基因置換或增補患者體內有缺陷的基因,因而達到治療疾病的目的。廣義概念指把某些遺傳物質轉移到患者體內,使其在體內表達,最終達到治療某種疾病的方法。

    基因治療的策略

    ?? 基因治療主要以兩種策略達到治療目的。其一是正常基因來糾正突變基因,也就是在原位修復缺陷基因的直接療法,此乃理想的基因治療策略,由于多種困難,目前尚未實現;其二是用正常基因不替代致病基因的間接療法,此法較前者難度小,也是目前眾多主張采用的策略,并已付諸臨床實踐。而就基因轉移的受體細胞不同,基因治

    固相萃取技術的基本步驟

    ?? SPE實質上是一種液相色譜分離,所用的吸附劑也與液相色譜固定相相同,只是在粒度上有所區別。SPE的一般做法是:利用選擇性吸附與選擇性洗脫的色譜分離原理,使液體樣品通過吸附劑,保留其中的分析物,用適當強度溶劑洗除雜質,然后用少量溶劑洗脫分析物,達到快速分離凈化與濃縮的目的。也有選擇性吸附干擾雜質

    基因轉移技術的基本步驟介紹

    (1)配制下列溶液①2×HEPES-緩沖鹽溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm濾器過濾除菌,分裝貯存于4℃。④DNA:將DNA(約20μg/106細胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用濃度為40μg/ml。為使轉化效率達到最高,質粒DNA應用CsCl

    PCR反應技術的反應基本步驟

    PCR 全過程包括三個基本步驟,即雙鏈 DNA 模板加熱變性成單鏈(變性);在低溫下引物與單鏈DNA互補配對(退火);在適宜溫度下 Taq DNA 聚合酶以單鏈 DNA 為模板,利用4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)催化引物引導的 DNA 合成(延伸)。這三個基本步驟構成的循環重復進行,可使特異性 DN

    顯微鏡使用的基本步驟

    顯微鏡使用的基本步驟包括三方面。一,取鏡和安放。右手握住鏡臂左手托住鏡座,放在實驗臺上距桌子邊緣七厘米,安裝好目鏡和物鏡。二,對光。讓一個低倍物鏡對準通光孔。選擇一個較大光圈對準通光孔,左眼注視目鏡,轉動反光鏡,直到看到一個白亮視野。三,觀察。將玻片標本放在載物臺上,要觀察的部分正對通光孔中心。注視

    液閃儀的基本操作步驟

    液閃儀的基本操作步驟1、將標記好同位素的樣品按順序的放在檢測架上,在第一排插上相應的同位素檢測程序牌,最后一排使用紅色架,并插上“stop”牌2、開啟電源:  A:主機  B:打印機  C:顯示器;3、在主菜單中選擇【AUTOMATIC CONNTING】按【ENTER】即可開始檢測;4、檢測完成后

    氧化數升降法的基本步驟

    1、標變價:寫出反應物和生成物的化學式,標出變價元素的氧化數。2、列升降:列出反應前后元素氧化數的升降變化值。3、求總數:使氧化數升高和降低的總數相等。4、配系數:用觀察的方法配平其他物質的化學計量數,配平后,把單線改成等號。5、查守恒:檢查方程式兩邊是否“質量守恒”、“電荷守恒”和“元素守恒”。在

    液閃儀的基本操作步驟

      1、將標記好同位素的樣品按順序的放在檢測架上,在第一排插上相應的同位素檢測程序牌,最后一排使用紅色架,并插上“stop”牌  2、開啟電源:  A:主機  B:打印機  C:顯示器;  3、在主菜單中選擇【AUTOMATIC CONNTING】按【ENTER】即可開始檢測;  4、檢測完成后將同

    配置培養基的基本步驟

      1、配制溶液  向容器內加入所需水量的一部分,按照培養基的配方,稱取各種原料,依次加入使其溶bai解,最后補足所需水分。對蛋白胨、肉膏等物質,需加熱溶解,加熱過程所蒸發的水分,應在全部原料溶解后加水補足。  配制固體培養基時,先將上述已配好的液體培養基煮沸,再將稱好的瓊脂加入,繼續加熱至完全融化

    基因克隆的基本步驟有哪些

    基因克隆的基本步驟流程如下:一、目的DNA片段的獲得:DNA克隆的第一步是獲得包含目的基因在內的一群DNA分子,這些DNA分子或來自于目的生物基因組DNA或來自目的細胞mRNA逆轉錄合成的雙鏈 cDNA分子。由于基因組DNA較大,不利于克隆,因此有必要將其處理成適合克隆的DNA小片段,常用的方法有機

    概述D葡萄糖的檢測步驟

      酸度 取本品2.0g,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴與氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L)0.20ml,應顯粉紅色。  溶液的澄清度與顏色 取本品5.0g,加熱水溶解后,放冷,用水稀釋至10ml,溶液應澄清無色;如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則 0902第一法)比較,不得更濃;如顯色,與對

    概述小兒脾切除術的手術步驟

      1.切口 主要依據脾臟大小、有無粘連、病兒體形及醫生的習慣而定,一般可采取左肋緣下“L”形切口、弧形切口、橫切口或右側腹直肌切口。在門靜脈高壓時,脾與膈肌及后腹膜有廣泛性血管性粘連,可采用胸腹聯合切口,切開膈肌在良好暴露下仔細分離及縫扎止血。  2.外傷性脾破裂時開腹后迅速吸出腹腔內積血,檢查脾

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