不用甲醇浸泡的PVDF很難被轉膜緩沖液浸潤。
實驗方法：
（1）PDVF膜及濾紙的預處理：剪裁與膠大小一致的PVDF膜，將其浸入甲醇液中浸泡10s（快速激活PDVF膜），去離子水處理5min，1×轉移緩沖液處理10min以上。
（2）剪裁與膠同樣大小的6層濾紙，用轉移液緩沖液浸泡后待用。
（3）取下電泳板，將其平置（使凹面玻璃板在下），小心取出夾板中的墊片及去掉上層玻璃板，切除多余凝膠，將含樣品膠在蒸餾水及1轉膜液中各漂洗一次。
（4）轉膜。
注意事項：
（1）開始轉移時一定要檢查電流大小。過高電流產生的熱量會導致轉移失敗，通常高電流是由于轉移液配制不當造成的。
（2）低離子強度轉移緩沖液可使用較高電壓，而不會導致高電流和過熱，但轉移過程中由凝膠中滲出的電解質可導致轉移緩沖液電導增加，緩沖能力降低。
（3）也可在恒流狀態下以200mA轉移2h。
（4）若轉移中因凝膠變形發生條帶扭曲或由于凝膠中電解質滲出導致過熱，可預先將凝膠在轉移緩沖液中浸泡。
（5）使用預先染色的蛋白質分子量標準品或轉移后將凝膠染色，可檢查轉移是否徹底。
（6）對于較大蛋白質，較低的丙烯酰胺濃度可獲得較好的轉移效果。
（7）對電轉移來說，最常遇到的問題是目的蛋白質轉移效率低，轉移效率可由轉移后對凝膠或膜染色來進行觀察。
