蛋白質、多肽液相色譜純化方法介紹（一）
1、純化的一般目標和方法 首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟（例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等）成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜（capturechromatography），主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量，常采用高載量、快流速凝膠。經過濃縮的部分純化的樣品進行中級色譜（intermediatechromatography），目的是去除較難去除的雜質，此步最關心的是分辨率，常采用高分辨率的細顆粒凝膠。最后為了得到符合要求的最終產品，去除殘存的雜質以及目的蛋白的多聚物或者降解片斷，進行精制色譜（polishingchromatography），常采用具有高分辨率的凝膠過濾凝膠進行凝膠過濾色譜。......閱讀全文
病毒純化和蛋白純化區別
病毒純化和蛋白質純化都是生物制劑工程中常見的分離純化方法，但它們的對象不同，具體區別如下：1. 病毒純化與蛋白質純化對象不同。病毒純化的目標是將病毒從其它生物物質中進行分離和去除，以獲得單個且純凈的病毒顆粒，如用于疫苗生產的病毒載體，而蛋白質純化的目標是從生物體或來源中提取和純化單一或多種蛋白質，如
細胞的純化方法介紹（自然純化和人工純化）（二）
（1）上皮細胞與成纖維細胞的分離純化： 兩者在胰蛋白酶的作用下，由于成纖維細胞先脫壁，二上皮細胞要消化相當長的時間才脫壁，特別是在原代細胞初次傳代和早期傳代中兩種差別尤為明顯，故可采用多次差別消化方法將上皮細胞和成纖維細胞分開，方法步驟如下。 采用常規消化傳代方式將0.25%胰蛋白酶注入培養
細胞的純化方法介紹（自然純化和人工純化）（一）
體外培養的細胞源于人或動物或胚胎組織，體內的細胞都是混雜生長，每一種組織都有血管和間葉組織，因此，來源于上述組織的培養材料的原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長，既有上皮樣細胞又有纖維樣細胞，纖維樣細胞又包括成纖維細胞、肌細胞、骨細胞、滑膜細胞等，混雜的細胞會直接影響實驗結果，而利用體外培養細胞進
核酸純化儀簡介/核酸純化儀
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技產品，具有自動化程度高，提取速度快，結果穩定，操作簡便的優點。利用一般生化專用的96孔反應盤，可同時操作1-32個樣品，可廣泛應用于常規科研、基因組學、疾控系統、食品安全、法醫等領域。使用本儀器只需加入樣品與
抗體純化
Antibody PurificatioinPurification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose?(KPL)?Purifying Antibodies?(Perkin-Elmer)Precipitation MethodsProtein
純化DNA實驗_純化質粒（堿裂解法）
實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒LB葡萄糖緩沖液乙酸鉀儀器、耗材離心管實驗步驟1. 單個大腸桿菌克隆接種到 2 ml 含適當抗生素的 LB 中。37℃ 劇烈振蕩孵育 5~8 小時。或者可以培養過夜使飽和。2. 倒 1.5 ml 培養液到已作標記的微量離心管中。把剩下的培養液存放在 4℃。3. 在微量離心
核酸純化儀應用領域/核酸純化儀
幾乎在每個實驗室，與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要，且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的，不僅需要選擇合適的純化技術，而且工作量也特別大，很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取純化系統是使用磁珠法技術，可同時操作1-32個樣
純化RNA實驗——從組織中純化總RNA
實驗材料組織試劑、試劑盒RNA 抽提緩沖液氯仿實驗步驟1. 從動物取下組織，直接進行第 2 步或在液氮中快速冷凍新鮮解剖的組織。冷凍后的組織可以貯存在 -70℃。2. 組織（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提緩沖液中勻漿。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均勻，冰浴 15 分鐘
免疫純化實驗
實驗方法原理 制備免疫親和柱要求抗體首先共價結合到介質上。另一方法是將抗體結合到蛋白 A 或 G 小珠上，再用交聯劑固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 結合在杭體的 Fe 區， 所以結合抗原的部位獲得充分暴露，從易于接近。免疫親和柱制備完成后，抗原溶液即可以上樣，接著洗去污染物，然后洗脫抗
什么是純化
純化，即由多種物質的聚集體，通過物理、化學或生物方面的方法作用，變成一類或一種物質的過程。
蛋白純化服務
蛋白純化服務內容1、純化抗血清、免疫腹水、細胞上清得到抗體IgG或IgM純化方法免疫親和層析純化法Protein A/G親和層析法辛酸-硫酸銨沉淀法飽和硫酸銨沉淀法等2、純化重組蛋白粗品3、純化客戶天然蛋白粗品純化方法離子交換疏水分子排阻色譜法4、可用客戶提供的抗體制備免疫親和層析柱，使用免疫親和層
純化相關材料
純化相關材料：瓊脂糖凝膠介質及柱子選擇指南：?http://bbs.bioon.net/dispbbs.asp?BoardID=92&ID=56965gst融合蛋白純化指南：http://bbs.bioon.net/dispbbs.asp?BoardID=92&ID=56974染料親和純化：http
純化DNA實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 TBS抽提緩沖液儀器、耗材 離心管實驗步驟 1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次，用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凝膠純化實驗
試劑、試劑盒蒸餾水乙醇甲酰胺膠的緩沖液亞甲基藍十二烷基硫酸鈉儲存液TAE 緩沖液Tris 乙酸鹽乙酸納EDTA藍色葡聚糖TEN 緩沖液40mer聚丙烯酰胺膠儀器、耗材解剖刀UV 燈過濾 UV 的安全破璃實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑蒸餾水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀萊特單床離子交換樹脂
純化RNA實驗
從培養的細胞中純化總RNA 從組織中純化總RNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
免疫純化實驗
在蛋白質純化方法中抗體親和純化是非常有效的方法之一。僅此一步常可獲得 1000～10 000 倍的純化。如果抗體與目的蛋白的結合的特異性得到證明，并且洗脫的目的蛋白沒有受到不可逆的損傷，那么可以認為免疫純化是極好的蛋白質純化方法，特別是用在純化過程的最后步驟。實驗方法原理制備免疫親和柱要求抗體首先共
mRNA的純化
實驗概要本文介紹了mRNA的純化方法。實驗原理mRNA的分離方法較多，其中以寡聚（dT）-纖維素柱層析法最為有效，已成為常規方法。此法利用mRNA ?3‘末端含有Poly（A ?）的特點，在RNA流經寡聚（dT）纖維素柱時，在高鹽緩沖液的作用下，mRNA被特異地結合在柱上，當逐漸降低鹽的濃度時或在低
免疫純化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 制備免疫親和柱要求抗體首先共價結合到介質上。另一方法是將抗體結合到蛋白 A 或 G 小珠上，再用交聯劑固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 結合在杭體的 Fe 區， 所以結合抗原的部位獲得充分暴露，從易于接近。免疫親和柱
如何純化菌種
菌種在分離、保藏和生產過程中，極易遭致雜菌污染，因此必須對染有雜菌的菌種進行提純，方能用于生產。根據污染的類型和程度，需采用不同的純化措施。（1）排除細菌或酵母菌污染在菌種培養中，用肉眼仔細觀察培養基表面，不難發現被細菌或酵母菌污染的分離物常出現黏稠狀的菌落。取被純化物接種在無冷凝水、硬度較高（瓊脂
DNA純化實驗
實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。實驗材料?PCR產物試劑、試劑盒?PCR清潔試劑盒儀器、耗材?96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗
蛋白純化策略
（六）興風作浪的乳糖(lactose)? 晚上每天都有人做報告，我覺得讓我收獲最大的是Bill Studier的報告。本來這個報告是后來才聽到的，但是由于Burgess的模塊是唯一的涉及大腸桿菌鐘表達蛋白的，我把這一段提前來說說。Studier這老哥是Brookhaven National Labo
核酸純化方法
核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎，核酸純化方法是影響提取核酸質量高低的最重要因素，也是下游分子生物學試驗成敗的關鍵。目前常見的核酸純化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高鹽沉淀蛋白質/醇沉淀方法、離心柱法和生物磁珠法，這幾種方法各有其優勢和劣勢。?
“純化”是什么
純化，即由多種物質的聚集體，通過物理、化學或生物方面的方法作用，變成一類或一種物質的過程。純化的方法：1、TLC 薄層制備色譜2、柱層析色譜3、HPLC高效液相色譜4、結晶
“純化”是什么
純化，即由多種物質的聚集體，通過物理、化學或生物方面的方法作用，變成一類或一種物質的過程。純化的方法：1、TLC 薄層制備色譜2、柱層析色譜3、HPLC高效液相色譜4、結晶
IgM的純化
大多數IgM類抗體是優球蛋白不溶于水，故可用雙蒸水透析純化IgM。對那些溶于水的IgM類抗體可用飽和硫酸銨沉淀。沉淀后可以采用顆粒排斥層析法(凝膠過濾)進一步純化。 顆粒排斥層析(size-exclusion chromatography)法又稱分子篩層析或凝膠過濾，是利用微孔凝膠分離
凝膠純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 蒸餾水 乙醇 甲酰胺 膠的緩沖液 亞甲基藍 十二烷基硫酸鈉儲存液 TAE 緩沖液 Tris
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凝膠純化實驗
試劑、試劑盒 蒸餾水乙醇甲酰胺膠的緩沖液亞甲基藍十二烷基硫酸鈉儲存液TAE 緩沖液Tris 乙酸鹽乙酸納EDTA藍色葡聚糖TEN 緩沖液40mer聚丙烯酰胺膠儀器、耗材 解剖刀UV 燈過濾 UV 的安全破璃實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑蒸餾水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀萊特單床離子交換
DMF的純化
⑴粗略除去DMF中的水：取分析純無水DMF,向試劑瓶中加入適量無水MgSO4,振蕩，靜置過夜備用。⑵除去DMF中的水：①裝無水CaCl2柱，以防止外部水進入。②將DMF（適量）、CaH2（適量）、轉子（1粒）放入圓底燒瓶中。③將圓底燒瓶、冷凝管、無水CaCl2柱等裝架，開冷凝水，開電源，將圓底燒