免疫金標記檢測方法標準操作程序
【目的】 保證免疫金標技術檢驗準確性 【本SOP適用范圍】 免疫金標技術 【原理】 氯化金分子在還原劑作用下聚合形成金顆粒，顆粒與顆粒之間因靜電作用而相互排斥，使其保持一個比較穩定的膠體狀態，故稱作膠體金。利用膠體金顆粒的高電子密度及其表面能結合生物大分子(如抗體、SPA、植物血凝素和刀豆蛋白A等)以 及具有一定顏色等特性，可用光鏡和電鏡對細胞內抗原進行定位、定性的研究。 【方法學分類】 1. 班點金免疫滲濾試驗 固相膜免疫測定中液體在微孔膜中穿過流出呈穿流形式，為斑點金免疫滲濾試驗(dot immunogold filtration assay，DIGFA)，亦有稱免疫金溶膠斑點法、滴金免疫測定法等。試驗單位為三層反應盒，第一層為過濾器(濾紙層)，第二層為反應膜(NC膜或MC膜)上點加有特異性抗原或抗體，第三層為吸水墊料，有稱此滲濾裝置為滴金反應板。 以雙抗體夾心法測dsDNA為例：試驗中將標本加在反應盒上......閱讀全文
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒免疫金標記物儀器、耗材培養箱顯微鏡實驗步驟1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理 利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 免疫金標記物儀器、耗材 培養箱顯微鏡實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，
免疫金標記技術原理
免疫金標記技術原理：膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面，無共價鍵形成，標記后大分子物質活性不發生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應的配體處大量聚集時，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅
免疫電鏡膠體金標記法
第四節 免疫電鏡膠體金標記法 金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，
免疫電鏡膠體金標記法（簡稱金標法）
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)（1）超薄切片厚50～70nm左右，載于200～300網孔的鎳網上；（2）滴1%的H2O2液1滴于蠟板上，將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h；（3）雙蒸水洗3次，每次10分鐘。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗，水流
免疫電鏡膠體金標記法2
（4）膠體金與蛋白A的結合和純化，依上法測得所需的比例超過10%，即每30ml膠體中加入2mg蛋白A，5min后，加入0.3ml PEG作為穩定劑，然后以15000r/min離心45min（不同方法制備的金離心速度不同），略帶紅色的松散的復合物沉淀即為PAg復合物。小心棄去上清液，加入PBS沖洗
免疫電鏡膠體金標記法1
金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金標
免疫金標記檢測方法標準操作程序
【目的】保證免疫金標技術檢驗準確性【本SOP 適用范圍】免疫金標技術【該SOP 變動程序】本標準操作程序的變動，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報經下述人員批準簽字：專業主管、科主任。【原理】氯化金分子在還原劑作用下聚合形成金顆粒，顆粒與顆粒之間因靜電作用而相互排斥，使其保持一個比較穩定的膠
免疫電鏡膠體金標記法操作大全
金標法是Faulk和Taylor(1971)提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原?反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金
免疫金標記檢測方法標準操作程序
【目的】 保證免疫金標技術檢驗準確性 【本SOP適用范圍】 免疫金標技術 【原理】 氯化金分子在還原劑作用下聚合形成金顆粒，顆粒與顆粒之間因靜電作用而相互排斥，使其保持一個比較穩定的膠體狀態，故稱作膠體金。利用膠體金顆粒的高電子密度及其表面能結合生物大分子(如抗體、SPA、植物血凝素和
免疫電鏡相關技術實驗——膠體金標記免疫電鏡技術
實驗材料病毒試劑、試劑盒膠體金儀器、耗材電子顯微鏡實驗步驟免疫膠體金標記技術又稱免疫金染色技術 (immunogold staining technique), 是 Faulk 和Taylor 于 1971 年發現直徑為 5~50nm 的膠體金 (colloidal gold) 在電鏡下具有很高的電
關于免疫膠體金標記技術的簡介
免疫膠體金標記技術(immunologic colloidal gold signature，ICS) 膠體金是分散相粒子的金溶液，經凝聚法制成的金溶膠顆粒表面帶有較多電荷，能吸附抗體形成金標記的抗體。用這種金標記抗體與組織或細胞標本中的抗原反應，借助顯微鏡觀察顏色分布即可定位、定性測定組織或細
食品快速檢測技術之免疫金標記技術原理
免疫金標記技術原理：膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面，無共價鍵形成，標記后大分子物質活性不發生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應的配體處大量聚集時，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅
免疫金標記技術在體外診斷領域的應用
生產企業必須能夠克服大量的技術難題才能制備出能應用于診斷領域的免疫金復合物。免疫金標記技術是一種將膠體金顆粒與包括抗原、抗體在內的許多蛋白質標記形成免疫金復合物的技術。雖然這種免疫金標記技術呈 現出多種多樣的應用方式，但目前主要應用是以快速檢測試紙盒的形 式使用于疾病的診斷和監測。1在過去的十年里，
膠體金標記技術在免疫學中的應用
膠體金標記技術由于標記物的制備簡便，方法敏感、特異，不需要使用放射性同位素，或有潛在致癌物質的酶顯色底物，也不要熒光顯微鏡，它的應用范圍廣，除應用于光鏡或電鏡的免疫組化法外，更廣泛地應用于各種液相免疫測定和固相免疫分析以及流式細胞術等。1．液相免疫測定：將膠體金與抗體結合，建立微量凝集試驗檢測相應的
膠體金標記的全定量免疫層析技術的原理
從定性、半定量向全定量是即時檢驗（POCT）技術發展的一個趨勢。全定量的POCT檢測技術有多種原理。本文主要介紹膠體金標記的全定量免疫層析技術的原理。一、膠體金標記的全定量免疫層析POCT試劑裝置結構示意圖及作用?1、??? 吸收墊：吸收多余液體。2、??? PVC底板：提供試劑封裝外殼。3、???
膠體金標記蛋白A技術
膠體金標記蛋白A技術（Protein A-gold technique, PAg法） PAg復合物制備方法簡便，作為第二抗體，無種屬特異性，可以免去不同種屬動物要制備不同的特異性免疫球蛋白。PAg 復合物與包埋劑和細胞成分都極少發生非特異性的交互作用，蛋白A和金粒間非共價的結合特性既不影響蛋白A
膠體金標記蛋白A技術
膠體金標記蛋白A技術（Protein A-gold technique, PAg法） PAg復合物制備方法簡便，作為第二抗體，無種屬特異性，可以免去不同種屬動物要制備不同的特異性免疫球蛋白。PAg 復合物與包埋劑和細胞成分都極少發生非特異性的交互作用，蛋白A和金粒間非共價的結
免疫金染色
中文名稱免疫金染色英文名稱immuno-gold staining定 義將用膠體金（直徑大于20 nm）標記的間接抗體或A蛋白再與特異性抗體結合，在光鏡下就可見紅色的反應物出現，不需進行呈色反應的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
標記的免疫技術
免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法，即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑，以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物（例如放射性核素、熒光素、酶等）進行標記，則在與標本中的相應抗體或抗原反應后，可以不必測定抗原抗體復合物
標記的免疫技術
免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法，即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑，以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物（例如放射性核素、熒光素、酶等）進行標記，則在與標本中的相應抗體或抗原反應后，可以不必測定抗原抗體復合物
膠體金標記實驗步驟
1、蛋白質的處理：膠體金標記蛋白的制備膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值，在接近蛋白質的等電點或偏堿的條件下，二者容易形成牢固的結合物。如果膠體金的pH值低于蛋白質的等電點時，則會聚集而失去結合能力。除此以外膠體金顆粒的大小、離子強度、蛋白質的分子量等都影響膠體金與蛋白質的結合。（1）待標記蛋白溶液
金標記免疫層析法聯合ELISA法檢測傳染四項的臨床應用
金標記免疫層析法聯合ELISA法檢測傳染四項具有較高的符合率，說明在急診或門診檢測中用金標法篩查是完全必要的。兩種方法的聯合應用保證了檢測結果的準確性與及時性，避免了醫療糾紛的發生。??????? 傳染四項是指乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)，丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV),人類免疫缺陷病毒(H
免疫標記技術常用的標記物介紹
常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點，是應用最廣泛的免疫學檢測技術。 常用的免疫熒光素主要有： 1 ．異硫氰酸熒光素 (FITC) ，最大吸收光譜為 490~495nm ，最大發射光譜為 520~530nm ，呈黃綠色熒光。 2 ．
蛋白質的膠體金標記
當蛋白質的最適穩定量及標記的最佳pH值被確定以后，便可進行標記。具體步驟如下。（1）根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。（2）邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中，逐漸加入，lmg的蛋白質量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中，大約需 5~10min。（3）繼
金標記流式細胞術方法介紹
金標記流式細胞術：膠體金可以明顯改變紅色激光的散射角，利用膠體金標記的羊抗鼠Ig抗體應用于流式細胞術，分析不同類型細胞的表面抗原，結果膠體金標記的細胞在波長632nm時，90度散射角可放大10倍以上，同時不影響細胞活性。而且與熒光素共同標記，彼此互不干擾。
蛋白質的膠體金標記
當蛋白質的最適穩定量及標記的最佳pH值被確定以后，便可進行標記。具體步驟如下。（1）根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。（2）邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中，逐漸加入，lmg的蛋白質量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中，大約需5~10min。（3）繼續
膠體金標記實驗操作步驟
1、蛋白質的處理：膠體金標記蛋白的制備 膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值，在接近蛋白質的等電點或偏堿的條件下，二者容易形成牢固的結合物。如果膠體金的pH值低于蛋白質的等電點時，則會聚集而失去結合能力。除此以外膠體金顆粒的大小、離子強度、蛋白質的分子量等都影響膠體金與蛋白質的結合。 （
標記免疫分析技術概述
一、概要?定義：應用廣泛、先進的免疫分析技術，是生物活性物質分析方法的新領域；基本技術是將多種標記示蹤技術和高度靈敏性和醫學免疫學抗原抗體反應的高度特異性相結合的分析技術。?特點：靈敏度高，特異性強，重復性好，準確性高，操作簡便，易于自動化商品化。?發展：放射免疫分析，免疫放射分析，酶標記免疫分析，
標記免疫分析技術2
四、發光免疫分析：發光免疫分析：直接用發光物質標記抗原或抗體生物的發光劑：熒火蟲熒光素（酶催化發光）化學的發光劑：魯米那、吖啶脂等在有過氧化氫的弱堿溶液中即可迅速發光。美國CHIRON公司生產的ACS-180使用類均相的包被抗體的磁性微粒，擴大了反應面，加速了免疫反應，又應用吖啶脂作標記的化學發光分