分離和培養人角膜內皮細胞實驗——分離人角膜內皮細胞
實驗材料完整的人角膜試劑、試劑盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP儀器、耗材手術刀或單刃安全刀片彎虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s懾子 10cm(4 in.)角膜剪 19mm刃 尖頭Colibri縫線鉗0.1 mm實驗步驟(a)用PBSA將角膜清洗3次，每次5 min。(b)剪除殘留的鞏膜，結膜和虹膜。(c)加人2 ml 1.2 U/ml中性蛋白酶II，4℃過夜，輕微攪動。(d)將加人中性蛋白酶II的角膜放人4℃搖床搖30 min。(e)用DMEM/F-12/GASP清洗角膜。(f)解剖顯微鏡下，小心去除小梁網，剝離內皮層并用胰蛋白酶/EDTA消化37℃，30 min。(g)加入同等體積的DMEM/F-12/2FB并拍散細胞。(h)離心400g,10 min,棄去上清。(i)加人......閱讀全文
內皮細胞的功能
內皮形成循環之間的界面血液或淋巴中的內腔和血管壁的其余部分。這在血管和組織之間形成屏障，并控制物質和流體流入和流出組織的流動。這可以控制物質的通過以及白細胞進出血液的過程。如在慢性炎癥的情況下，內皮的通透性過度或長期增加，可能導致組織腫脹（水腫）。屏障功能的改變也與癌癥外滲有關。內皮細胞參與血管功能
內皮細胞損傷模型
一、細胞因子損傷模型將內皮細胞鋪板后待即將單層融合時，換無血清或低血清培養基，加入細胞因子如IL－2，TNF－alpha、IFN等，共同孵育一段時間，或者加入藥物與之共孵育，或者加細胞因子之前先加入藥物孵育后，再加細胞因子，結束后測一些指標如MTT、LDH、NO、等等看藥物對細胞因子損傷的保護作用。
什么是內皮細胞？
內皮細胞，是一層鱗狀細胞，排列在血管和淋巴管的內表面。內皮形成循環之間的界面血液或淋巴中的內腔和血管壁的其余部分。內皮細胞在血管和組織之間形成屏障，并控制物質和流體進出組織的流動。與血液直接接觸的內皮細胞被稱為血管內皮細胞，而與淋巴直接接觸的內皮細胞被稱為淋巴內皮細胞。從心臟到最小的毛細血管，血管內
內皮細胞的特點
在心血管系統的內皮細胞中，還有懷布爾-帕拉德體（Weible-Palade body，簡稱W-P小體），又稱內皮特有顆粒。
分離核仁實驗—從人肝臟或胎盤組織中分離核仁
實驗材料組織試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L 乙酸鎂2.2 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖，含
手術治療眼部化學傷的簡介
1.前房穿刺 可清除房水中的堿性物質，減少其對角膜內皮細胞及眼內組織的損傷，宜早，最好在24小時內施行。 2.球結膜切開 球結膜水腫明顯時刻予放射狀切開，以減輕組織壓力、改善循環、排除結膜下毒性液體，并可用于中和沖洗。 3.切除壞死組織，防止瞼球粘連 如果球結膜有廣泛壞死，或角膜上皮壞死，可
人PBMC分離和培養步驟和體會
1、將靜脈血20ｍl用ACD抗凝劑以容積比血：抗凝劑＝9：1抗凝處理。 2、按血：分離液＝1：2注入國產淋巴細胞分離液上層，400g 20℃離心30分鐘。 3、交接層重浮于4倍體積的RPMI1640并通過離心法200g，10min洗三次。 4、獲得細胞可做分選或其他實驗。 體會：
關于角膜滴狀變性的輔助檢查介紹
1、角膜滴狀變性的虹膜角膜角鏡檢查 虹膜角膜角鏡檢查可以了解小梁網受累情況。 2、角膜滴狀變性的角膜內皮鏡面反射顯微鏡檢查 角膜內皮鏡面反射顯微鏡檢查可以了解后彈力層及角膜內皮病變情況。 3、角膜滴狀變性的病理學檢查 病理學檢查可見角膜內皮細胞數目減少，變薄，Descemet膜增厚且有
分離核仁實驗——分離核仁
實驗材料肝臟試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 制備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl
分析角膜滴狀變性的病因
角膜滴狀變性有一定的遺傳性，遺傳方式尚不十分清楚，有些病例已證實為常染色體顯性遺傳。病因不明，可能是多方面的，一些尚未被認識到的因素干擾了角膜內皮細胞的結構與功能，最終導致了內皮泵功能的失代償。 角膜滴狀變性除散發病例外，為常染色體顯性遺傳病。2001年，Biswas等對一家系進行基因組分析，
角膜上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將角膜組織置于膠原蛋白上，使其附著。然后，在涂有纖連蛋白和膠原蛋白的培養皿擴增培養。試劑、試劑盒D-PBSA無血清角質形成細胞培養液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培養板實驗步驟一、材料?滅菌無血清角質形成細胞培養液（keratinocyteserum-freemedium，KGM;C
經角膜上皮準分子激光治療性角膜切削術治療兒童角膜...
經角膜上皮準分子激光治療性角膜切削術治療兒童角膜帶狀變性病例報告病例報告患者，男，7歲，1年半前因左眼被笤帚擊傷，診斷為：左眼穿通傷，外傷性白內障，視網膜脫離，于當地醫院分別行左眼外傷縫合術，晶狀體切割、玻璃體切割視網膜手術聯合硅油填充術，硅油取出術，玻璃體切割聯合硅油填充術等4次手術。于2014年
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養，其方法較酶消化法簡便、經濟。
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
大鼠血管內皮細胞培養可以：（1）用于血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究；（2）用于選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法貼塊法實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養，其方法較酶消化法簡便、經濟。但缺點使易混有成纖維細胞和平滑肌細胞，前者的貼壁時間和內皮接
免疫學實驗抗內皮細胞抗體介紹
抗內皮細胞抗體介紹： 系統性紅斑狼瘡是一種累及多器官系統的自身免疫性疾病，主要免疫學特征為免疫調節紊亂，除T淋巴細胞活化增加外，B淋巴細胞呈多克隆活化，使患者體內產生多種自身抗體，其中之一使為抗內皮細胞抗體(AECA)。AECA可與血管內皮細胞(EC)結合，通過補體介導或抗體依賴細胞毒性作用破壞E
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養，其方法較酶消化法簡便、經濟。
雙眼ICE綜合征伴單眼角膜變性病例分析
ICE綜合征是一組由于角膜內皮細胞異常導致的疾病，臨床上罕見，常見臨床表現為：周邊虹膜前粘連，虹膜基質萎縮及虹膜結節，可致前房角關閉，角膜水腫及繼發性青光眼。多單眼發病，無遺傳因素，多見于成年女性，其病因及發病機制目前尚不清楚。雖然國內外也有雙眼ICE綜合征的報道，但成年男性，雙眼發病且合并角膜變性
后部多形性營養不良的病因
陽性家族史、雙側發病及發育不完全的后彈力膜組織學發現，支持后部多形性營養不良是遺傳性疾病，最可能假設是角膜內皮細胞或其基底膜遺傳缺陷，并受到下列發現的支持：①異常的后彈力膜后膠原層（非帶狀），提示內皮細胞在胎兒后期或出生后早期已開始變化（重組和最后分化）。②曾發現本病與其他先天性疾病聯系，如圓錐
豬蛋白角膜讓人重見光明
全世界有1200多萬人患有角膜盲，即當眼睛的透明保護外層因損傷或疾病而變得模糊或畸形時導致失明。但角膜盲的治療十分艱難，一是供體缺乏，目前每70名需要角膜移植的人中只有1人能有匹配的供體角膜；二是在許多低收入國家，昂貴的手術費用讓人們難以獲得治療。 為此，科學家一直在尋找可替代人類角膜的移植物
角膜混濁的實驗室檢查和其他檢查介紹
1.實驗室檢查 （1）刮片及培養：角膜潰瘍刮片迅速了解致病菌，結膜囊分泌物做細菌或真菌培養。 （2）細胞學檢查：潰瘍刮片細胞學檢查，病毒呈立體橢圓形。熒光顯微鏡下感染的細胞漿及核呈黃綠色熒光。 （3）血清學檢查：對單純皰疹病毒性角膜炎的診斷有意義。 2.器械檢查 裂隙燈顯微鏡配合熒光素
內皮細胞的功能特點
樹突狀細胞（Dendritic cells, DC）是機體功能最強的專職抗原遞呈細胞(Antigen presenting cells, APC)，它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原，未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始T細胞，處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節。
概述內皮細胞的功能
血管內皮細胞（EC）位于血漿與血管組織之間，它不僅能完成血漿和組織液的代謝交換，并且能合成和分泌多種生物活性物質，以保證血管正常的收縮和舒張，起到維持血管張力，調節血壓以及凝血與抗凝平衡等特殊功能，進而保持血液的正常流動和血管的長期通暢。抗凝血材料表面內皮細胞化，可以減少血栓的形成和血小板激活。
關于角膜滴狀變性的臨床分期介紹
角膜滴狀變性病程分為3期，可達20年或更長的時間。 （1）角膜滴狀變性第1期[角膜滴狀贅疣又名“滴狀角膜”（cornea guttata）期]：此期患者無自覺癥狀。采用裂隙燈直接照明法檢查時，可見角膜中央部的后表面有多個細小的、向后突起的滴狀贅疣（guttata），略帶青銅色；用后照明法時，顯
角膜白斑穿透性角膜移植術臨床路徑
一、角膜白斑穿透性角膜移植術臨床路徑標準住院流程（一）適用對象。第一診斷為角膜白斑（ICD-10:H17.801）。行穿透性角膜移植術（ICD-9:11.64）。（二）診斷依據。根據《臨床診療指南》眼科學分冊（中華醫學會編著，2006年版）。1.癥狀：嚴重視力障礙。2.體征：瞳孔區角膜白色混濁。（三
上皮細胞類培養實驗_內皮細胞培養實驗
實驗方法原理內皮細胞易于從血管分離進行培養成單層細胞，對研究內皮細胞再生生、腫瘤促血管生長因子（TAF）等有很大應用價值。人內皮細胞培養可應用人臍帶臍靜脈、動物大動脈等，用灌流消化法獲取細胞最為簡便。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液PBS儀器、耗材注射器離心管培養基實驗步驟1. ?取產后的新鮮臍
用豬的眼角膜看世界，你愿不愿意？
采訪專家：姚濤，沈陽何氏眼科醫院眼表角膜病專家組專家、中華醫學會眼科分會會員、眼組織庫主任 據報道，由中國科學家花了十年時間研發的生物工程角膜已完成臨床試驗上市。該眼角膜是用豬的眼角膜經過處理，再用于人的。醫學界預測，生物工程角膜將極大地緩解中國人體捐獻角膜奇缺的臨床困境，為中國400萬乃至全
海大攻克國際性難題－3至5年造出完整人工角膜
長達9年的科研攻關，一朝透出曙光 7月2日，由中國海洋大學角膜組織工程實驗室研制的組織工程人角膜內皮(簡稱人工角膜內皮)，已經成功完成兔、貓和猴的角膜移植實驗，這在國際上尚屬首次，表明角膜中的重要部分之一――角膜內皮已經可以人工“制造”，有望年底或明年初進入臨床實驗。此外，該實驗室已初
山東第一醫科大學附屬眼科研究所團隊研發仿生角膜內皮
大泡性角膜病變是角膜內皮細胞功能失代償引起的常見致盲眼病。由于成人角膜內皮細胞增殖能力有限，手術、感染或遺傳等因素導致細胞功能受損時，會出現上皮下水泡、角膜水腫和混濁、眼部疼痛，甚至視力喪失等。目前尚無有效治療藥物，晚期只能依靠角膜移植手術治療。但手術治療面臨著角膜供體匱乏、醫生學習曲線長等難題
飛秒激光新技術治愈白內障
把白內障渾濁晶體分解成小至0.02毫米的碎塊，方便醫生在手術時用少量的超聲波去除晶體的同時，也避免患者眼角膜的血管內皮細胞受損，手術安全性被提高，大多數白內障患者適合接受這項新手術。 新加坡國立大學醫院在東南亞首家采用這種飛秒激光(Femtosecond Laser)新技術。
全小分子化合物組合，為角膜盲治療提供新思路
人體由百萬億級數量的細胞組成。每個人都是從一個受精卵發育為數百種成熟的終末細胞，形成我們保持生命健康的基本單元。這些不同種類的成熟終末細胞，既往傳統的觀點認為無法相互轉化“變身”。近日，來自我國眼科學界的最新研究發現，皮膚細胞竟然可以化身為神經嵴，進而變成角膜內皮細胞！更為重要的是，只是簡單地通