降低上皮細胞培養過程中的污染
實驗方法原理上皮細胞易存在纖維細胞污染，其污染程度能夠采用特異的中等纖維蛋百亞基波形蛋內（vimentin，作為成纖維細胞的標記）和角蛋白（作為上皮細胞的標 記）抗體進行雙重免疫熒光染色。關于如何降低污染的方法前面已述及；另一種用來降低貼壁上皮細胞群屮成纖維細胞數量的方法是采用不同濃度的胰蛋白酶化。實驗步驟過程1) 用含 0.53 mmol/LEDTA,0.05% 胰蛋白酶的 HBSS 洗滌培養物一次。2) 加入同樣濃度的新配制的胰蛋白酶于培養物中，室溫放置 4 分鐘。3) 用吸管吸取胰蛋白酶上下吹打細胞以清洗培養物。在吹打過程中變圓的成纖維細胞漸被去除，只留下的上皮細胞。4) 再加人新鮮培養液以滅活殘留的胰蛋白酶。注意事項注意事項若有必要，上述培養液中可補加殺真菌試劑如 2.5ug/ml 兩性霉素 B。遺憾的足，殺真菌劑有可能阻止細胞的生長，盡可能不用殺真菌劑。......閱讀全文
降低上皮細胞培養過程中的污染
實驗方法原理上皮細胞易存在纖維細胞污染，其污染程度能夠采用特異的中等纖維蛋百亞基波形蛋內（vimentin，作為成纖維細胞的標記）和角蛋白（作為上皮細胞的標 記）抗體進行雙重免疫熒光染色。關于如何降低污染的方法前面已述及；另一種用來降低貼壁上皮細胞群屮成纖維細胞數量的方法是采用不同濃度的胰蛋白酶
降低上皮細胞培養過程中的污染
實驗方法原理上皮細胞易存在纖維細胞污染，其污染程度能夠采用特異的中等纖維蛋百亞基波形蛋內（vimentin，作為成纖維細胞的標記）和角蛋白（作為上皮細胞的標 記）抗體進行雙重免疫熒光染色。關于如何降低污染的方法前面已述及；另一種用來降低貼壁上皮細胞群屮成纖維細胞數量的方法是采用不同濃度的胰蛋白酶化。
細胞培養過程中的支原體污染？
支原體污染支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2μm并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性．可為圓形、絲狀或梨形。
上皮細胞培養
1）表皮細胞培養 1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。 2．EDTA處理：先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。 3．冷消化：換入0.25%胰蛋白酶中，置4℃過夜。 4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分
上皮細胞培養
1、取材：外科植皮或手術殘余皮膚小塊，早產流產兒皮膚更好，取角化層薄者，切成0.5－1平方厘米小塊。2、置0.02%EDTA中，室溫，5分鐘。3、換入0.25%胰蛋白酶中，4℃過夜。4、分離：取出皮塊，用血管鉗或鑷子將表皮與真皮層分開。5、取出表皮，剪成更小的塊后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
細胞培養過程中的原蟲污染污染現象和處理辦法？
污染現象：培養液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖 然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢， 而且細胞狀態不好， 邊緣不清楚， 細胞不透亮。他們與 細胞可共生但會與細胞爭奪營養。?這種共生是非常普遍的， 但他們的數量小， 細胞站優勢所 以不會影響到細胞的正常生長， 只有當他們到
乳腺上皮細胞培養
實驗方法原理 在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。試劑、試劑盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰島素氫化可的松霍亂毒素胰蛋白酶液儀器、耗材 培養瓶 離心管實驗步驟 材料無菌1. 生長培養液：RPMI 16402
角膜上皮細胞培養
實驗方法原理 將角膜組織置于膠原蛋白上，使其附著。然后，在涂有纖連蛋白和膠原蛋白的培養皿擴增培養。試劑、試劑盒 D-PBSA無血清角質形成細胞培養液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培養板實驗步驟 一、材料?滅菌無血清角質形成細胞培養液（keratinocyteserum-freemedium
細胞培養過程中的判斷支原體污染的依據？
支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和細胞之間。橫斷面與細胞微絨毛相似，但微絨毛電子密度比支原體小，且中央無顆粒群或中央束。支原體代謝需固醇類物質、部分種類需要精氨酸、氧氣、葡萄糖，每一種支
細胞培養過程中污染是什么原因造成的
細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。培養細胞受細菌污染后，會出現培養液變混濁，pH改變。也有的培養液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發現菌體才知污染。所以，每天應仔細觀察。污染后細胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗
細胞培養過程中的病毒污染現象和處理辦法？
組織細胞培養過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會產生病毒污染。目前，從原代猴腎細胞的培養中已發現不少于20種血清性病毒。?盡管病毒污染的細胞不影響原代培養，但生產疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
細胞培養過程中發生支原體污染的處理辦法？
(1) 丟棄所有已經污染的細胞和培養基；(2) 使用支原體清除試劑擦拭培養箱及超凈工作臺；(3) 培養試劑中加入支原體清除試劑；(4) 注意戴帽子和口罩；(5) 盡可能使用一次性耗材及成品培養基；
細胞培養過程中污染是什么原因造成的
細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。培養細胞受細菌污染后，會出現培養液變混濁，pH改變。也有的培養液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發現菌體才知污染。所以，每天應仔細觀察。污染后細胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗
細胞培養過程中污染是什么原因造成的
細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。培養細胞受細菌污染后，會出現培養液變混濁，pH改變。也有的培養液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發現菌體才知污染。所以，每天應仔細觀察。污染后細胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗
細胞培養過程中發生真菌污染如何處理？
(1) 丟棄所有已經污染的細胞和培養基；(2) 培養環境用甲醛熏蒸；(3) 培養試劑中加入兩性霉素B；(4) 盡可能保持細胞培養環境的干燥；(5) 注意戴帽子和口罩；(6) 盡可能使用一次性耗材及成品培養基；
乳腺上皮細胞培養實驗
實驗方法原理在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。試劑、試劑盒RPMI 1640 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?胎
乳腺上皮細胞培養實驗
實驗方法原理在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。試劑、試劑盒RPMI 1640胎牛血清人血清胰島素氫化可的松霍亂毒素胰蛋白酶液儀器、耗材培養瓶離心管實驗步驟材料無菌1. 生長培養液：RPMI 16402. 胎牛血
各類上皮細胞培養2
6）毛細血管內皮細胞培養?腫瘤條件培養基制備：?1．取C3H?小鼠的S-180?實體肉瘤組織。?2．胰蛋白酶消化，Dulbecco?改良Eagle?氏培養液15ml（含10％小牛血清），接種到T-75?Falcon?產培養瓶中培養。?3．在細胞生長接近完全匯合時，收集培養液制成條件培養基；再用含10
各類上皮細胞培養1
上皮細胞培養?1）表皮細胞培養?1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1?平方厘米小塊。?2．EDTA?處理：先置入0.02％EDTA?中室溫置5?分鐘。?3．冷消化：換入0.25％胰蛋白酶中，置4℃過夜。?4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮
角膜上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將角膜組織置于膠原蛋白上，使其附著。然后，在涂有纖連蛋白和膠原蛋白的培養皿擴增培養。試劑、試劑盒D-PBSA無血清角質形成細胞培養液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培養板實驗步驟一、材料?滅菌無血清角質形成細胞培養液（keratinocyteserum-freemedium，KGM;C
細胞培養過程中常見污染源是防控
廣義上來說，凡是細胞培養體系中的外來成分或成分變化，都應視為污染，細胞污染不能完全被消除，但能減少其發生的頻率和后果的嚴重性。細胞污染根據污染源主要可以分為物理性，化學性和生物性污染。1、物理性污染物理性污染通過影響細胞培養體系中的生化成分，從而影響細胞的代謝，如溫度、放射線、振動、輻射(紫外線或熒
上皮細胞類培養實驗_胃上皮細胞培養實驗
實驗方法原理胃癌為我國高發癌癥之一，培養正常人胃上皮細胞對研究胃癌癌變機理有很大應用價值。近年來培養人的腎臟上皮、氣管上皮、前列腺上皮等都有報道，但培養人胃上皮細胞少見成功。近年我研究室通過培養90例正常胃上皮細胞初代培養獲得成功，并建成轉化細胞系（Ges-1）。培養人正常胃上皮細胞獲得成功主要在于
細胞培養過程中的支原體污染的來源與控制方法
Mycoplasma國內主要有三種譯名，醫學文獻譯為“支原體”（分枝原體，枝原體，類菌質體），動物醫學文獻譯為“霉形體”或“支原體”，臺灣、香港則譯為微漿菌。支原體是目前已知一類能在無生命培養基上生長繁殖的最小的原核細胞型微生物。自然界分布廣泛，種類多，有80余種，分為兩個屬：一為支原體屬（Myco
原代腎上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。用一定孔徑大小的濾網過濾細胞懸液，除去未消化的組織塊。然后，洗細胞，清除消化酶。用添加血清的培養液混懸細胞，將細胞接種于塑料培養器皿。實驗材料腎組織片試劑、試劑盒DME
原代腎上皮細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。用一定孔徑大小的濾網過濾細胞懸液，除去未消化的組織塊。然后，洗細胞，清除消化酶。用添加血清的培養液混懸細胞，
原代腎上皮細胞培養實驗
原代腎上皮細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。
細胞培養過程中的黑膠蟲污染現象和處理辦法？
黑膠蟲可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養液不渾濁，一般不會太影響，細胞還是可以用的。污染現象：常常是細胞生長狀態良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。處理辦法：數量不多的時候對
兔食管上皮細胞培養步驟
原代細胞實驗材料：? ? ? 1. 大兔的正常食管組織? ? ? 2. 6孔培養板：用多聚賴氨酸4℃包被過夜? ? ? 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素，pH7.4? ? ? 4. 手術刀、解剖剪、解剖鑷、
細胞生物基本方法：上皮細胞培養
上皮細胞培養1）表皮細胞培養1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。2．EDTA處理：先置入0.02％EDTA中室溫置5分鐘。3．冷消化：換入0.25％胰蛋白酶中，置4℃過夜。4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。5．
方案23.3－乳腺上皮細胞培養實驗
乳腺上皮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。