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  • 染色體分離實驗—水相法分離染色質

    實驗材料細胞試劑、試劑盒水相裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟1. 像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃,1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮,典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108 個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少 30 分鐘冷卻以幫助有絲分裂復合物的完全解離。4. 4℃ 1000 r/min 離心 10 分鐘沉淀細胞。5. 沉淀用 10 ml 75 mmol/L 的 KCI 重懸浮,4℃ 孵育 20 分鐘進行低滲溶脹。6. 4℃ 1000 r/min 離心溶脹細胞。7. 將細胞重懸浮于 10 ml 的水相裂解緩沖液中,溫和攬拌,冰上放置 5 分鐘。水相裂解緩沖液:10 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)120 mmol/L KCl20 mmol/L NaCl0.1 % Triton X-100含 2 mmol/L CaCl......閱讀全文

    染色體分離實驗—水相法分離染色質

    實驗材料細胞試劑、試劑盒水相裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟1. 像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃,1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮,典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108?個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少 30

    水相法分離染色質

    水相法分離染色質試劑、試劑盒:水相裂解緩沖液儀器、耗材:離心機實驗步驟:像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃,1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮,典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108?個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少

    染色體分離實驗——聚胺法分離染色質

    實驗材料細胞試劑、試劑盒秋水仙胺聚胺緩沖液實驗步驟有絲分裂中細胞的同步化1. 37℃,用合適的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的濃度加入秋水仙胺。收獲細胞并在聚胺緩沖液中裂解3. 收獲細胞。對于懸浮培養

    染色體分離實驗——用己二醇法分離中期染色質

    實驗材料細胞試劑、試劑盒己二醇緩沖液儀器、耗材Dounce 勻漿器實驗步驟1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述誘導 500 ml 懸浮或單層培養細胞為中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃ 1000 r/min 離心 10 分鐘,用 10 ml 培養基重懸浮。3. 將重懸浮的細胞冷卻至 4℃ 放置 20

    染色體分離實驗——Percoll梯度法

    實驗材料染色質試劑、試劑盒精胺精咪Percoll 溶液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,勻漿分離得到的染色質。Percoll 溶液:

    染色體分離實驗——甘油梯度法

    實驗材料染色質試劑、試劑盒甘油 染色質分離緩沖液溶液儀器、耗材JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟1. 準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃,1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度沉降

    聚胺法分離染色質

    聚胺法分離染色質試劑、試劑盒:秋水仙胺、聚胺緩沖液實驗步驟:有絲分裂中細胞的同步化37℃,用合適的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的濃度加入秋水仙胺。收獲細胞并在聚胺緩沖液中裂解3. 收獲細胞。對于懸浮

    染色體分離實驗——蔗糖梯度純化法

    實驗材料染色質粗品試劑、試劑盒蔗糖分離緩沖液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 準備兩種 18ml,濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液(聚胺,水相或己二醇法的緩沖液),然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中,用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品溶液輕輕

    染色體分離實驗

    聚胺法分離染色質 水相法分離染色質 用己二醇法分離中期染色質 蔗糖梯度純化法 Percoll梯度法 甘油梯度法 ? ? ? ? ? ?

    己二醇法分離中期染色質

    試劑、試劑盒:己二醇緩沖液儀器、耗材:Dounce 勻漿器實驗步驟:按聚胺法第 1 和 2 步中所述誘導 500 ml 懸浮或單層培養細胞為中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃ 1000 r/min 離心 10 分鐘,用 10 ml 培養基重懸浮。3. 將重懸浮的細胞冷卻至 4℃ 放置 20 分鐘。4.

    分離核仁實驗——高鎂法分離核仁

    實驗材料細胞試劑、試劑盒Dulbecco’s 鹽溶液蔗糖核仁保存液儀器、耗材Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液Dulbecco’s 鹽溶液:0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4,pH 7.0蔗糖 A

    組織的分離實驗_離心分離法

    實驗方法原理如培養物為血液、羊水、腹水和胸水等細胞懸液時,可采用離心法分離。一般用低速500~1000 轉/分速度,離心5~10 分鐘即可。如懸液量大,離心時間可適當延長,但如離心速度過大和時間太長,易壓擠細胞使之受損或死亡。微量全血法淋巴細胞培養時,可不必進行淋巴細胞分離,可采用全血培養法。在需用

    組織的分離實驗_EDTA-消化分離法

    實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是:一些組織,尤其是上皮組織,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子,形成螯合物,能促進細胞相互分離。EDTA 作

    【銳賽小課題】染色體分離實驗

      一、聚胺法分離染色質   試劑、試劑盒:秋水仙胺、聚胺緩沖液   實驗步驟:   有絲分裂中細胞的同步化   1. 37℃,用合適的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。   2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的

    染色體相鄰分離

    中文名稱相鄰分離英文名稱adjacent segregation定  義染色體平衡易位攜帶者相互易位雜合子,在粗線期由于同源染色體緊密配對形成特異的“十字形”圖像,并在相繼的分裂過程中十字形圖像逐漸開放形成環形,相鄰的兩條染色體分離至同一極,即稱相鄰分離。應用學科遺傳學(一級學科),細胞遺傳學(二級

    微生物分離純化實驗——平板劃線分離法

    實驗方法原理該方法操作簡便,普通用于微生物的分離與純化。其基本原理包括兩方面:1. 選擇適合于待分離微生物的生長條件,如營養、酸堿度、濕度和氧等要求或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長,而抑制其他微生物生長的環境,從面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固體培養基上生長形成的單個菌落可以是由一個

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      雙水相體系是一種高效的萃取體系,由于離子液體的可設計性,基于離子液體的雙水相體系應用更加廣泛。理想的雙水相體系應具有優異相分離行為、較低粘度和高效萃取效率等特性,完全的兩相分離是實現高選擇性萃取的前提。然而在無機鹽存在下,離子液體會出現鹽析現象。浙江大學邢華斌教授課題組通過可逆加成-斷裂鏈轉移聚

    分離核仁實驗——分離核仁

    實驗材料肝臟試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 制備溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

    組織的分離實驗_膠原酶消化分離法

    實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性,但膠原酶對細胞間質有好的消化作用,可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害,效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗

    微生物分離純化實驗——簡易單孢子分離法

    實驗方法原理簡易單孢子分離法是一種不需顯微單孢操作器,直接在普通顯微鏡下利用低倍鏡分離單孢子的方法。它采用很細的毛細管吸取較稀的萌發的孢子懸浮液滴在培養皿蓋的內壁上,在低倍鏡下逐個檢查微滴。將只含有一個萌發孢子的微滴放一小塊營養瓊脂片,使其發育成微菌落。再將微菌落轉移到培養基中,即可獲得僅由單個孢子

    氣相色譜法的分離原理

    答:氣相色譜法的分離原理就是利用樣品中各組分在流動項和固定項中吸附力或溶解度不同,也就是說分配系數不同。當兩項相對運動時,樣品各組分在兩項間也就不一樣。分配系數小的組分會較快大流出色譜柱,分配系數越大的組分就越易滯留在固定相內,流過色譜柱的速度較慢。這樣一來,當流經一定的柱長后,樣品中各組分得到了分

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    實驗中常用分離法介紹

    蒸餾、升華、結晶、沉淀、溶劑萃取、離子交換、色譜分離、離心分離、電滲析、電化學分離方法、鹽析。

    組織的分離實驗_機械分散法

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