殺傷細胞功能的檢測實驗
實驗方法原理NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中,能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞,無需抗原或有絲分裂原刺激,也不依賴抗體或補體,在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL-2誘導下,獲得能殺傷NK抵抗的腫瘤細胞的功能,在過繼免疫治療腫瘤中已得到廣泛的應用。通過將同位素51Cr摻入到NK的靶細胞K562(紅白細胞白血病細胞)或LAK的靶細胞Libr(黑色素瘤細胞),按一定細胞比例與效應細胞(NK或LAK)孵育4小時,根據細胞上清中靶細胞被殺傷后所釋放的51Cr水平計算出殺傷細胞的殺傷活性。實驗材料細胞系試劑、試劑盒FCS RPMI 164051Cr儀器、耗材培養瓶培養板CO2孵箱離心機β-液閃儀γ-計數儀實驗步驟一、 效應細胞的制備1. NK功能效應細胞可取靜止的PBMC,或經不同細胞因子誘導的PBMC。2. LAK功能的效應細胞通常將PBMC或......閱讀全文
殺傷細胞功能的檢測實驗
實驗方法原理NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中,能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞,無需抗原或有絲分裂原刺激,也不依賴抗體或補體,在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL-2誘導下,獲得能殺傷NK抵抗的腫瘤細胞的功能,在過繼免疫治療腫瘤中
殺傷細胞功能的檢測
實驗方法原理 NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中,能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞,無需抗原或有絲分裂原刺激,也不依賴抗體或補體,在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL-2誘導下,獲得能殺傷NK抵抗的腫瘤細胞的功能,在過繼免疫治療腫瘤
T細胞殺傷功能的檢測
T細胞殺傷功能的檢測可以應用于(1)免疫細胞功能測定(2)臨床免疫診斷。實驗步驟基 本 方案 1 抗 CD3 誘 導 的 T 細胞殺傷實驗材 料展開?其他本實驗來自「精編免疫學實驗指南」作者:J.E.科利根等,譯者:曹雪濤等
自然殺傷細胞和淋巴因子激活殺傷細胞的殺傷功能實驗
實驗方法原理NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中,能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞,無需抗原或有絲分裂原刺激,亦不依賴抗體或補體,在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。 LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL-2誘導下,獲得能殺傷NK抵抗的腫瘤細胞的功能,在過繼免疫治療腫
自然殺傷細胞和淋巴因子激活殺傷細胞的殺傷功能實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中,能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞,無需抗原或有絲分裂原刺激,亦不依賴抗體或補體,在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。 LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL
自然殺傷細胞和淋巴因子激活殺傷細胞的殺傷功能實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中,能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞,無需抗原或有絲分裂原刺激,亦不依賴抗體或補體,在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。 LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL
自然殺傷細胞(NK)及功能的檢測
?? NK細胞表面至少存在CD2、CD11b、CD11c、CD16、CD56和CD69等多種抗原,但均非NK細胞所特有,因此極少以CD系列抗原為指標鑒定和計數NK細胞,現多檢測NK細胞活性,因NK細胞具有細胞介導的細胞毒作用,它能直接殺傷靶細胞。測定人NK細胞活性多以K562細胞株作為靶細胞,而測小
巨噬細胞吞噬功能和殺傷功能的檢測
基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞:如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯],或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液(balanced salt solution, BSS)細菌(如單核細胞增多
人自然殺傷細胞的功能分析實驗
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ???1975年,Herberman 等首次報道自然殺傷(nature
殺傷細胞的功能特點
殺傷細胞(kill cell)是表面具有IgG的Fc受體,當靶器官細胞與相應的IgG結合,可與結合在靶細胞上的IgG的Fc結合,從而使自身活化,釋放細胞毒素,裂解靶細胞的一種細胞。
自然殺傷細胞NK細胞的細胞功能
自然殺傷活性由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒
自然殺傷細胞的功能介紹
自然殺傷活性自然殺傷細胞由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細
自然殺傷細胞NK的功能
? (一)自然殺傷活性 由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細
自然殺傷細胞特點及功能
分布于脾和外周血中,CD16和CD56為其特異性標志。可非特異性直接殺傷腫瘤細胞和病毒的靶細胞。
外周血自然殺傷細胞(NK)細胞的檢測
外周血自然殺傷細胞(NK)細胞的檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟
外周血自然殺傷細胞(NK)細胞的檢測
實驗步驟展開
外周血自然殺傷細胞(NK)細胞的檢測
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 展開
靶細胞殺傷實驗總論-1
細胞介導的免疫反應(cell mediated immune, CMI)在機體抗感染及抗腫瘤免疫、移植排斥反應和自身免疫病中發揮重要的作用。CMI的主要效應細胞之一為細胞毒T淋細胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。目前在醫學基礎與臨床研究中重視CTL活性測定,將其作為
靶細胞殺傷實驗總論-2
2、流式細胞標記法?(1)PE-mAb/FITC-annexin V 熒光標記法?正常細胞的磷酯酰絲氨(phosphatidylserine,PS)位于細胞膜內表面,細胞凋亡時翻轉露于膜外側,可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料
靶細胞殺傷實驗:LDH法
一、效應細胞的制備 激惹5天后,于無菌條件下取出受鼠引流的腹股溝淋巴結,100目鋼網研磨,調整細胞濃度為2×107.ml-1。臺盼藍色要求存活率>95%。 二、靶細胞的制備 P815細胞株系DBA/2小鼠的肥大細胞瘤細胞株。連續傳代培養,調整細胞濃度為2×105/ml或3.33×1
自然殺傷細胞的主要功能
自然殺傷細胞(natural killer cell,NK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關,而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生,能夠識別靶細胞、殺傷介質。
細胞因子誘導的殺傷細胞的生理功能
因為CIK細胞可以殺死自然殺傷細胞或LAK細胞無法裂解的細胞,所以具備獨特的功能。CIK細胞同時具備T細胞和NK細胞樣表型特征,二者功能的獨特組合,產生強有力而又廣泛的不受MHC限制的抗腫瘤細胞毒性,具備廣譜抗腫瘤效果。CIK細胞識別腫瘤的確切機制和其靶向殺傷作用尚不完全清楚。NK樣細胞除了通過TC
靶細胞殺傷實驗:AnnexiV標記法
正常細胞的磷酯酰絲氨(phosphatidylserine,PS)位于細胞膜內表面,細胞凋亡時翻轉露于膜外側,可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的釋放。將效應細胞與靶細胞充分共育后,用PE結合的效應細胞特異性單克隆抗體(如CD
靶細胞殺傷實驗:CFSE/PI法
做免疫學特別是腫瘤學實驗,總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷,老外最常用的是Cr51放射實驗,但這個方法在國內的不少地方都不能做,而MTT這個方法又太老了,而且也不準確,那么替代方法就用流式細胞術,又方便,又準確。 1、計數靶細胞,并加入CFSE,使CFSE終濃度達到2u
靶細胞殺傷實驗:CFSE/PI法
做免疫學特別是腫瘤學實驗,總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷,老外最常用的是Cr51放射實驗,但這個方法在國內的不少地方都不能做,而MTT這個方法又太老了,而且也不準確,那么替代方法就用流式細胞術,又方便,又準確。1、計數靶細胞,并加入CFSE,使CFSE終濃度達到2uM,37度30分鐘
獼猴自然殺傷細胞亞群的功能分析
1975年,Herberman 等首次報道自然殺傷(nature killer,NK)細胞。該類細胞具有淋巴細胞形態,但不表達T、B細胞特有的TCR和BCR。對于稱其為自然殺傷細胞,是因為NK細胞無需抗原預先致敏就能破壞靶細胞,且無MHC限制性,應答速度快,在免疫應答的早期即可發揮作用。NK
NK細胞的自然殺傷活性功能介紹
由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒感染細胞
自然殺傷細胞的自然殺傷活性簡介
由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒感染細胞
靶細胞殺傷實驗:Cr51法
一、原理?用Na2 51 CrO 4 標記靶細胞,若待檢效應細胞能殺傷靶細胞,則51 Cr( 鉻) 從靶細胞內釋出。以γ計數儀測定釋出的51 Cr 放射活性,靶細胞溶解破壞越多,51 Cr 釋放就越多,上清液的放射活性也就越高,應用公式可計算出待檢效應細胞的殺傷活性。?二、步驟?(以CTL殺傷腫
流式細胞術測效靶細胞殺傷實驗
做免疫學特別是腫瘤學實驗,總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷,老外最常用的是Cr51放射實驗,但這個方法在國內的不少地方都不能做,而MTT這個方法又太老了,而且也不準確,那么替代方法就用流式細胞術,又方便,又準確,這也是偶參照老外的方法吧。1 計數靶細胞,并加入CFSE,使CFSE終濃度