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  • 灌注固定實驗

    實驗材料實驗動物試劑、試劑盒無水乙醇二甲苯酒精甘油生理鹽水等儀器、耗材灌注瓶針管剪刀攝子止血鉗組織鉗咬骨鉗等實驗步驟1灌注固定用1%戊巴比妥鈉(80mg/kg)麻醉動物,沿胸骨柄剪開胸腔,剪開心包膜,暴露心臟,與心尖成30°-45°夾角剪開左心室,再剪開右心耳,將灌注針頭從左心室插入主動脈,固定針頭(圖2-I),然灌注固定用1%戊巴比妥鈉(80mg/kg)麻醉動物,沿胸骨柄剪開胸腔,剪開心包膜,暴露心臟,與心尖成30°-45°夾角剪開左心室,再剪開右心耳,將灌注針頭從左心室插入主動脈,固定針頭(圖2-I),然后快速用生理鹽水沖洗血液,再先快后慢注入固定液灌流固定1.5h(表2-2),如若固定的不理想可將材料取出后固定2-4h(4℃)2取材動物經過灌注固定后須及時取材,組織所取部位、大小、形狀根據實驗需求遵循動作輕柔、避免擠壓、切片平整、目的組織完整等原則。取出所需組織,放入20%蔗糖液中浸泡(4℃),直至組織完全脫水沉底。展開&......閱讀全文

    灌注固定實驗

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    灌注固定實驗

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    灌注固定法

    實驗概要出于多種考慮,將小組織片段簡單浸泡在固定液中便能得到合適的固定,而且對大多數組織來說這可能是唯一的固定模式。然而更快、更均一的固定方法是將固定液通過管道系統如心主動脈或腹部主動脈灌輸到組織中。下面介紹一下用 4% 多聚甲醛固定大鼠大部分器官的操作過程。主要試劑0.9% 生理鹽水500 ml

    灌注固定法

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    透射電鏡灌注固定戊二醛用多大濃度

    物品, 透射電鏡, 制備步驟 .一、取材: 組織塊于1立毫米 二、固定:2.5%戊二醛磷酸緩沖液配制固定2或更間 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 ? ? ? ? 15 三 1%鋨酸固定液固定 ? ? ? ? ? 2-3 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 ? ? ? 15 三三、脫水:50%乙醇 ? ?

    冰凍切片固定實驗

    實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PFAPBS乙醇儀器、耗材 加濕盒實驗步驟 1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2. ?吸去固定液,用毛細吸管或用噴水瓶以3×PBS沖冼切片,

    冰凍切片固定實驗

    實驗方法原理原位雜交中所用冰凍切片必須用多聚甲醛固定,然后再脫水。實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PFAPBS乙醇儀器、耗材加濕盒實驗步驟1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2.

    實驗動物捉拿、固定

    捉拿和保定是動物實驗操作技術中最基本最簡單而又很重要的一項基本功。捉拿和保定各種動物的原則是:保證實驗人員的安全,防止動物意外性損傷,禁止對動物采取粗暴動作。動物一般都是害怕陌生人接觸其身體的,對于非條件性的各種剌激則更是進行防御性反抗。在捉拿、保定時,首先應慢慢友好地接近動物,并注意觀察其表情,讓

    實驗動物捉拿、固定

    捉拿和保定是動物實驗操作技術中最基本最簡單而又很重要的一項基本功。捉拿和保定各種動物的原則是:保證實驗人員的安全,防止動物意外性損傷,禁止對動物采取粗暴動作。動物一般都是害怕陌生人接觸其身體的,對于非條件性的各種剌激則更是進行防御性反抗。在捉拿、保定時,首先應慢慢友好地接近動物,并注意觀察其表情,讓

    大鼠抓取與固定實驗

    大白鼠牙齒鋒利,捕捉時要提防被咬傷。從籠內抓取周齡較小的大白鼠時,需抓住大白鼠尾巴的根部,不要讓大白鼠懸在空中的時間過長,否則易激怒大白鼠并易致尾部皮膚脫落,抓取大的時,用左手從背部中央到胸部捏住,但用力不宜過大,最好戴防護手套,但手套不宜過厚。如若是灌胃、腹腔注射、肌肉或皮下注射,可采用抓取小鼠的

    免疫電鏡標本固定實驗

    實驗方法原理 實驗步驟 1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微結構得到很好的保存。灌注裝置由加壓氣球、壓力表、三通接頭和連接管道組成。不同的組織器官必須選擇合適的灌注壓力,詳見有關書籍。灌注固定一般維持 10~15 min。然后用相同的固定液繼續浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定組織塊切小后立即

    細胞的PFA固定實驗

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    細胞的PFA固定實驗

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    實驗步驟1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微結構得到很好的保存。灌注裝置由加壓氣球、壓力表、三通接頭和連接管道組成。不同的組織器官必須選擇合適的灌注壓力,詳見有關書籍。灌注固定一般維持 10~15 min。然后用相同的固定液繼續浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定組織塊切小后立即投入到固定液中,

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    細胞的PFA固定實驗

    實驗材料 細胞懸液試劑、試劑盒 PFAPBS儀器、耗材 載玻片加濕盒玻璃染色盤實驗步驟 1. ?吸取濃度為2×107細胞/ml 的細胞懸液10 μl,滴于多聚L-賴氨酸包被的載玻片上。置于加濕盒中,使細胞靜置30 min。?2. ?將玻片放入玻片架,浸于盛有4%PFA固定液的染色用玻璃盤中,室溫固定

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    實驗材料蛙儀器、耗材動物手術臺實驗步驟在捉拿蟾蜍時勿碰壓耳側的毒腺,提防毒液射入眼中。用左手將蛙握住,以中指、無名指和小指壓住其左腹側和后肢,拇指和食指分別壓住右、左前肢,右手進行操作(圖1)。也可用固定釘將蛙固定在蛙板上(圖2)。圖1圖2展

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    細胞固定切片和包埋實驗

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    實驗材料 狗儀器、耗材 繩子實驗步驟 實驗第一個步驟就是捆綁狗嘴,要提防被咬。對于馴服的狗,可以從側面靠近輕輕撫摸其項背部皮毛,然后用固定帶迅速綁住其嘴,在上頜打一個結,再繞回下頜打第二個結,然后引至后頸項部打第三個結(圖1)。對于未經馴服的狗,可使用狗頭鉗夾住其頸部,將狗按倒在地,再綁其嘴或靜脈麻

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    家兔的抓取與固定實驗

    家兔易于馴服,一般不會咬人,但腳爪較銳利。抓取時切記忌強抓兔的耳朵、腰部或四肢。當兔在籠內安靜下來時,打開籠門,用右手抓住頸部的被毛和皮膚,輕輕把動物提起,把兔拉至籠門口,頭朝外,然后迅速用左手托起兔的臀部,給家兔以舒適安全感(圖1)。按實驗要求,可采取用手、兔臺或兔盒固定。圖1(1)用手固定:如須

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    實驗方法原理無水乙醇能使植物細胞迅速脫水、死亡,因而細胞壁硬化,細胞形狀固定,氣孔也得以保特原樣,有利以后鏡檢研究,植物材料還可以長期保存。實驗材料植物葉片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒無水乙醇 ? ?

    小白鼠抓取和固定實驗

    實驗材料小鼠實驗步驟小白鼠較溫和,一般不會咬人,不需要戴手套捕捉,先用右手抓住鼠尾提起,置于鼠籠或實驗臺上,用左手的拇指、食指和中指抓住小鼠兩耳后項背部皮毛,以無名指及小指夾住鼠尾即可(圖1)展開

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