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  • 親和免疫組織化學實驗——CSA法

    實驗方法原理催化信號放大系統(catalyzed signal amplification system,CSA),也稱釀胺信號放大(tyramine signal amplification system,TSA)或稱 CARD(catalyzed repoter deposition)。該方法的主要原理是酪胺的過氧化物酶反應(即 HRP 在 H2O2 存在下催化酪胺鹽,形成共價鍵結合位點),產生大量的酶促產物,該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合,這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沉積,與隨后加入的鏈霉親和素-HRP 結合,如經幾次這樣的循環放大,可以網絡許許多多的酶分子,最后通過 DAB 的顯色反應,其敏感性得到幾何級放大。其感性較常規 LSAB 法要高近 1000 倍,特別適用于石蠟切片較難檢出結果的組織片。實驗材料石蠟切片非免疫性動物血清蛋清試劑、試劑盒生物素 N-羥基丁二酸亞......閱讀全文

    親和免疫組織化學實驗——-CSA法

    實驗方法原理催化信號放大系統(catalyzed signal amplification system,CSA),也稱釀胺信號放大(tyramine signal amplification system,TSA)或稱 CARD(catalyzed repoter deposition)。該方法的

    親和免疫組織化學實驗——改進-CSA法

    實驗方法原理已有的研究結果證實,CSA 法較 LSAB 法敏感 500~1000 倍,較 EnVision 法敏感 20~100 倍。其對細胞周期素等核內抗原的定位,有獨特的優點,定位準確性、敏感性、穩定性要較標準的 CSA 法好,其敏感性和穿透性要好于 EnVision 法。最近,Hasui K

    親和免疫組織化學實驗——LSAB-法

    實驗方法原理LSAB 法或稱 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有 HRP 或 AKP 酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量 60000,不含糖鏈,等電點 pI 為 6.0~6.5

    親和免疫組織化學實驗——ABC-法

    實驗方法原理ABC 法即親和素-生物素-過氧化物酶復合物法,是許世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基礎上改良的,其特點是利用親和素分別連接生物素標記的第二抗體和生物素標記的酶。ABC 法與 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗體不為生物素所標記,生物素標記的第二抗體與 ABC 復合物

    親和免疫組織化學實驗

    實驗方法原理 ABC 法即親和素-生物素-過氧化物酶復合物法,是許世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基礎上改良的,其特點是利用親和素分別連接生物素標記的第二抗體和生物素標記的酶。ABC 法與 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗體不為生物素所標記,生物素標記的第二抗體與

    小鼠腦片免疫組織化學(ABC法)實驗

    實驗方法原理 通過特異的抗原抗體反應標記上可見的顯示物系統來檢查細胞及組織上原位抗原或抗體成分的方法。在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其性質定位,還可以利用細胞分光光度計、圖像分析儀、共聚焦顯微鏡等進行細胞原位半定量測定。免疫組織化學的顯著特點是特異性強。實驗材料 冷凍切片試劑、試劑盒 一

    親和色譜法

    一、基本理論(一)原理  在生物體內,許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等,都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力,根據生物分子間親和吸附和解離的原理,建立起來的

    親和色譜法

    親和色譜法( affinity chromatography),將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質分離的色譜法。

    親和色譜法

    親和色譜法( affinity chromatography),將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質分離的色譜法。中文名:親和色譜法外文名:affinity chromatography所屬學科:生物應用領域:實驗例如利用酶與基質(或抑制劑)

    親和層析法去除交叉反應性抗體實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 細胞裂解緩沖液 NaOH Tris-緩沖鹽溶液 TBS Triton X-100 溶菌酶

    親和層析法去除交叉反應性抗體實驗

    試劑、試劑盒 緩沖液和溶液細胞裂解緩沖液NaOHTris-緩沖鹽溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制備用于文庫篩選的抗體大腸桿菌培養液儀器、耗材 離心和轉子親和層析柱溴化氫活化的 Sepharose 4B實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液,緩沖液和試劑的組分請見附錄 12將貯

    核酸親和層析法純化蛋白質實驗

    步驟一 偶聯寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步驟二 核酸親和層析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4

    核酸親和層析法純化蛋白質實驗

    實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通過它們本身的堿基實現的。從理論上講,該方法也許干擾最佳結合序列的接近路徑,但是這樣一個簡單的方法一直被廣泛地成功應用。偶聯效率的定量檢測可經 A260 值測定評估,或者更精確地從偶聯介質上水解核酸和進行磷酸鹽測定。實

    親和層析法去除交叉反應性抗體實驗

    本節介紹一種利用結合細菌蛋白質的基質去除粗制免疫球蛋白中與細菌編碼蛋白質發生反應成分的方法(de Wet et al.1984)。該方法也適用于利用培養的細胞或組織抽提物去除交叉反應抗體。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒緩沖液和

    小鼠腦片免疫組織化學(ABC法)實驗——免疫組化法

    實驗方法原理通過特異的抗原抗體反應標記上可見的顯示物系統來檢查細胞及組織上原位抗原或抗體成分的方法。在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其性質定位,還可以利用細胞分光光度計、圖像分析儀、共聚焦顯微鏡等進行細胞原位半定量測定。免疫組織化學的顯著特點是特異性強。實驗材料冷凍切片試劑、試劑盒一抗;二

    序列特異性DNA結合蛋白親和層析純化實驗_DNA親和層析法

    實驗材料制備性的DNA親和層析樹脂試劑、試劑盒緩沖液Z或其他柱緩沖液(如緩沖液Ze或TM)配制時含不同的KCl濃度(從緩沖液 Z 0.1 mol L KCl 至緩沖液 Z 1 mol L KCl對緩沖液Z 0. 1 mol L KCl透析的部分純化的蛋白質組分非特異性的競爭DNA柱再生緩沖液柱儲存緩

    親和色譜法原理

    在生物體內,許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等,都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力,根據生物分子間親和吸附和解離的原理,建立起來的色譜法稱親色譜法。親和色譜

    親和層析法概述

    親和層析法是利用生物大分子與某些對應的專一分子特異識別和可逆結合的特性而建立起來的一種分離生物大分子的色譜方法,也叫做生物親和或生物特異性親和色譜。這種特異可逆結合的物質很多,見表6–3。如抗原與抗體、底物與酶、激素與受體等,他們間的這種特異親和能力又叫親和力。親和色譜中,一對互相識別的分子互稱對方

    親和色譜法簡介

    一、基本理論(一)原理:在生物體內,許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等,都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力,根據生物分子間親和吸附和解離的原理,建立

    核酸親和層析法純化蛋白質實驗1

    核酸親和柱的應用極大地促進了核酸結合調節蛋白特性的研究,這些蛋白質涉及基因表達、染色體修復和復制、基因重組等的調控。核酸結合蛋白可以結合單鏈 DNA、雙鏈 DNA 或 RNA。DNA 結合蛋白結合 DNA 可以是序列特異的,也可以是非特異的。此外,含有特異寡核苷酸的親和樹脂能用于某些酶的分離,這些酶

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗

    實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原

    核酸親和層析法純化蛋白質實驗2

    核酸親和層析實驗材料樣品蛋白質試劑、試劑盒平衡緩沖液(Tris-HClKClEDTA)非特異 DNA實驗步驟在上樣品液到核酸親和柱之前,建議首先采用其他的純化方法,如硫酸銨沉淀、離子交換或凝膠過濾層析等富集目的蛋白。這樣可以除去絕大多數的污染物,并減少非特異結合。親和層析柱一般來講是短而粗的,例如長

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗

    檢測未知抗原 檢測未知抗體 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。

    mRNA的提取及純化實驗——親和柱層析法

    實驗方法原理該方法利用mRNA上的寡聚A可與較聯寡聚T的纖維素柱在高鹽下以堿基配對形式發生親和吸附,而在低鹽下,堿基配對能力破壞,吸附解除,而其他成分的RNA則不具該特性,因此在高鹽下當RNA抽提樣品流經該柱時,mRNA被掛在柱上,而其他RNA則隨高鹽溶液流出;當用低鹽洗脫液洗柱時,mRNA隨洗脫液

    CSA集團啟用新建運輸燃料實驗室

      全球領先的測試、認證和標準發展機構CSA集團啟用新的實驗室,用于低排放和零排放汽車的高壓燃料系統及相關組件的檢測和認證。新實驗室旨在滿足不斷增長的環保型汽車市場,以及改用氫氣、壓縮天然氣等替代燃料之后相應的基礎設施需求。  替代燃料汽車一般是指不使用汽油、柴油等傳統石油產品的汽車。加拿大政府已經

    CSA中國首個光伏實驗室成立

      測試和認證機構CSA(加拿大標準協會)日前在江蘇昆山成立了其在中國的首個光伏組件測試和認證實驗室,為國內光伏企業提供本地化的產品測試和認證服務,助力國內新能源的發展。   隨著新能源產業的飛速發展,太陽能光伏行業順勢崛起,上海地區的測試和認證實驗室測試范圍涵蓋了照明產品、加熱器具、電動工具、焊

    親和層析實驗

    實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 TrisTSA裂解緩沖液脫氧膽酸鈉洗滌緩沖液三乙醇氨緩沖液儀器、耗材 層析柱離心管離心機實驗步驟 1. ?準備一支活化后被淬滅的Sepharose預柱(5 ml 柱床)和一支Ab-Spharose免疫親和層析柱,并將它們串聯起來。2. ?以冰冷TSA溶液重懸50 g 細

    親和層析實驗

    可溶性抗原或膜結合抗原的分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒

    實驗室分析方法親和色譜法概念介紹

    親和色譜法(affinity chromatography)用連接在基體上的配位體作為固定相,使與蛋白質或其他大分子發生可逆的高選擇性的相互作用,利用不同親和力進行分離的液相色譜法。

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    刀豆素 A 親和柱純化蛋白質 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如,刀豆素 A(Con A)與糖蛋白含有的葡萄糖

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