兔成骨細胞與骨髓基質干細胞混合培養的實驗研究
對骨髓基質干細胞進行改造,使其在保持快速生長的同時向成骨細胞方向分化是目前國內外研究的熱點。實驗發現,成熟的成骨細胞可以通過細胞間的直接接觸作用促進骨髓基質干細胞增殖[ 1 ] ,此外成骨細胞可產生多種生長因子促進其骨髓基質干細胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基質干細胞通過誘導向成骨細胞分化后,難以再與原有的成骨細胞區分開,因此,本實驗將骨髓基質干細胞與成骨細胞以1∶1 的比例直接混合培養,同時將成骨細胞和骨髓基質干細胞在與混合培養細胞完全相同的條件下單獨進行培養并取其平均值作為對照,以細胞計數、細胞堿性磷酸酶(ALP) 染色陽性率、細胞培養液上清中堿性磷酸酶含量、細胞形成鈣結節數目為觀察指標,將混合培養細胞與相應成骨細胞及骨髓基質干細胞指標的平均值進行比較,觀察兩者的區別。 1 材料與方法 1 .1 材料 無酚紅DMEM 培養液(Hyclon 公司)、胎牛血清(杭州四季清公司)、淋巴細胞分離液......閱讀全文
兔成骨細胞與骨髓基質干細胞混合培養的實驗研究
對骨髓基質干細胞進行改造,使其在保持快速生長的同時向成骨細胞方向分化是目前國內外研究的熱點。實驗發現,成熟的成骨細胞可以通過細胞間的直接接觸作用促進骨髓基質干細胞增殖[ 1 ] ,此外成骨細胞可產生多種生長因子促進其骨髓基質干細胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基質干細胞通過誘導向成骨細胞分化后,
紅細胞裂解液法體外分離培養兔骨髓間充質干細胞
骨髓間充質干細胞是存在于骨髓腔內具有很強增殖 能力及多向分化潛能的一類成體干細胞,在一定條件下其不僅可以分化為同源于中胚層的間質細胞,還可以誘導分化為骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、上皮樣細胞、 心肌細胞、肝細胞等。近年來隨著組織工程技術的快速發展,骨髓間充質干細胞的體外分離、培養及其增殖特 性的相關研
調節骨髓間充質干細胞的微環境因素研究進展
19世紀六七十年代,Bianco等發現骨髓中含有一種能自身繁殖的間質細胞群,簡稱成纖維細胞集落形成單位。研究發現,這是一類廣泛存在于骨髓及間葉組織中的細胞,具有多向分化潛能,學者們將此類細胞稱為間充質干細胞。MSC周圍的細胞和微環境精確調節間充質干細胞的動態平衡。微環境因子失調會引起間充質干細胞
成骨細胞原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養
成骨細胞原代培養實驗
實驗方法原理采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。?實驗材料骨標本試劑、試劑盒Hams F12 培養液
成骨細胞原代培養實驗
成骨細胞原代培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時
成骨細胞的體外培養
成骨細胞的來源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外組織。及人的胚胎顱骨或新生動物的顱骨為成骨細胞的常用來源。Robey(1985)采用膠原酶處理松質骨骨塊以除去結締組織和骨髓造血組織,再將處理過的骨塊進行培養來獲得更純凈的成骨細胞。將人胚胎顱骨中所獲得的成纖維樣細胞通過加入β-甘油磷酸鈉誘導分化后培養3周
骨髓間充質干細胞(MSC)原代培養與傳代培養實驗步驟
準備工作(1)試管、試管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、燒杯、橡皮頭、剪刀、鑷子、紗布、棉球、酒精燈、滴管、移液器、細胞計數器、生理鹽水、PBS、雙抗(青鏈霉素)、75%酒精、95%酒精、培養瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周齡,18~22g,雌雄不限)、胎牛血
骨髓基質細胞的原代培養材料和方法
材料方法1.材料:1.1材料來源:取自健康成人行骨髓內固定術擴髓前收集骨髓腔內骨髓。1.2主要試劑DMEM培養基胎牛血清(FBS)β-甘油磷酸鈉(β-GP)維生素C青鏈霉素胰蛋白酶(1:250)-EDTA1.3主要儀器設備雙人超凈臺 Farma Scientific美國單人超凈臺 Farma Sci
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗
大鼠乳鼠成骨細胞培養培養可以:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)用于骨修復的細胞學機制研究。實驗方法酶消化法實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快
骨髓間充質干細胞(MSC)原代培養與傳代培養
準備工作(1)試管、試管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、燒杯、橡皮頭、剪刀、鑷子、紗布、棉球、酒精燈、滴管、移液器、細胞計數器、生理鹽水、PBS、雙抗(青鏈霉素)、75%酒精、95%酒精、培養瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周齡,18~22g,雌雄不限)、胎牛血
骨細胞新發現有助治療白血病
骨細胞是成熟骨組織中的主要細胞,對骨吸收和骨形成都起作用,是維持成熟骨新陳代謝的主要細胞。日本研究人員在動物實驗中發現,骨細胞不僅形成骨骼,還控制著骨髓內造血干細胞的活動。 用造血干細胞移植法治療白血病等血液疾病時,先要向健康人注射粒細胞集落刺激因子(G-CSF),促使骨髓內的造血干細胞流
人骨髓間充質干細胞的培養
人軟骨損傷后,可用軟骨組織工程進行軟骨缺損修復。軟骨可由間充質干細胞分化而來。因而,間充質干細胞的培養和分化具有重要作用。間充質干細胞(MSC)可以2×10的5次方/cm2的密度接種于特定的培養液(低糖DMEM,含15%FBS,100u/L氨卡青霉素,100 mg/L鏈霉素,250 mg/L兩性霉素
間充質干細胞的三系分化及鑒定操作
近年來國內外關于干細胞的研究取得了重大的突破,而這其中最熱門的研究當屬間充質干細胞(mesenchymal stem cell,MSCs)。MSC是一類具有自我更新和多種分化潛能的成體干細胞,來源于胚胎發育早期的中胚層未成熟的胚胎結締組織。1968年德國科學家Frieden Stei
中科院生化與細胞所鑒定出一種新的骨密度調節因子
本報訊(記者黃辛)中科院生化與細胞研究所鄒衛國研究組發現組蛋白去甲基化酶LSD1作為一個關鍵負向調控因子調節骨形成,揭示了一個潛在的治療骨質疏松的藥物靶點。相關研究成果近日在線發表于《骨研究》。 激活成骨細胞促進骨形成,從而形成健康的骨,是治療骨質疏松的一個新的重要策略。為此,研究人員通過篩選中
《自然》子刊:乳腺癌竟會“遙控”骨髓!
法國巴黎西岱大學的Julie Helft及其同事們的最新研究表明,乳腺癌能夠在保留其自我更新能力的情況下,誘導全身的造血干細胞向髓系細胞的分化。 他們使用轉錄組學分析和原位成像技術,發現乳腺癌能夠遠程重塑骨髓造血微環境,誘導造血干細胞和間充質干細胞在轉錄水平和空間定位上發生變化,從而影響造血微
人原代牙周膜干細胞的背景與應用!
人原代牙周膜干細胞來源于人的正常牙組織,牙周病是口腔疾病中的常見病和多發病,常導致牙周支持組織破壞或缺損。目前,牙周支持組織重建主要依賴機械、藥物或引導組織再生技術,隨著分子生物學、組織工程學和干細胞技術的飛速發展,牙周組織再生工程技術成為牙周病治療研究的熱點,牙周膜干細胞(Periodontal
正常兔骨髓間充質前體細胞的體外成軟骨培養
正常兔骨髓間充質前體細胞的體外成軟骨培養 實驗材料: 1.實驗動物:5月齡兔; 2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2; 3.完全培養液:DMEM培養液,補充10%胎牛血清、青霉素100
成骨細胞原代培養
實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。試劑、試劑盒 Hams F12 培養液用于細胞傳代
干細胞誘導分化服務
1.干細胞誘導分化是誘導干細胞定向分化,使之成為成熟的功能細胞,是目前干細胞研究的關鍵環節。2.干細胞是一種未充分分化,具有自我復制能力的多潛能細胞,在一定誘導條件下,可以分化為成骨細胞、成軟骨細胞和成脂細胞等,還可以分化為肝細胞、骨骼肌細胞、內皮細胞、神經元細胞、星形膠質細胞等,具有發育為骨、軟骨
脂肪干細胞的主要特點
脂肪干細胞特點:1、自體干細胞容易與自身細胞結合;2、有助于網狀成纖維細胞的增殖;3、可按要求誘導組織的生長及自體干細胞的遷移。 研究發現ADSCs細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低,同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞,適宜大規模培養,對機體損傷小等優點,而且其來源廣泛,體內儲備量大
概述脂肪干細胞的主要特點
脂肪干細胞特點:1、自體干細胞容易與自身細胞結合;2、有助于網狀成纖維細胞的增殖;3、可按要求誘導組織的生長及自體干細胞的遷移。 研究發現ADSCs細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低,同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞,適宜大規模培養,對機體損傷小等優點,而且其來源廣泛,體內儲備量大
國內首例“骨髓+臍血”造血干細胞混合移植獲成功
用一份爸爸的骨髓加上一份愛心人士捐獻的臍帶血進行造血干細胞移植,醫院日前對接受移植手術的7歲女孩王溢進行檢查發現,患者的血型已由原來的B型轉化為和父親一樣的O型。這標志國內首例父女間半相合造血干細胞加無血緣關系臍血聯合移植取得成功。 2007年6月份,王溢持續發燒10余天,送到第三軍醫大學新橋醫院
發酵產氫菌株與混合培養系統種群生態研究
近年來基于乙醇型發酵制氫工藝和理論,開展了大量以提高該工藝的產氫效率、完善工程控制對策、實現工業化生產為最終目的的理論和應用研究。篩選出若干株產乙醇桿菌,獲得了大量工程控制數據,研究取得了很大的進展。但是乙醇型發酵制氫工藝的工程控制對策還有待完善,產氫效率還有待進一步提高。尤其是混合菌種乙醇型發酵產
小鼠青春期前后骨骼生長模式轉變
哺乳動物在進入青春期后,骨骼從快速增長(lengthening)模式逐漸轉變成緩慢增粗(thickening)模式,然而變化的機制仍不清楚。近期,中國科學院分子細胞科學卓越創新中心(生物化學與細胞生物學研究所)研究團隊揭示了小鼠青春期前后骨骼生長模式轉變的細胞基礎,研究成果發表在《Cell St
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗_酶消化法
大鼠乳鼠成骨細胞培養培養用于:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)骨修復的細胞學機制研究。實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快速的細胞原代分離培養
培養基質量控制與保存
一、物理性狀的質量控制應包括20℃ -25 ℃時的pH,并應觀察以下內容:加入培養基的量和(或)瓊脂層的厚度、顏色、透明度、是否存在肉眼可見的雜質、凝膠穩定性/黏稠度(一致性)、濕度。滅菌前后都應測定pH,采用連接可滲透陶器型液體接頭的電極測定液體培養基的pH,固體培養基可用平頭電極或者連接微型探頭
乳腺干細胞的培養實驗
乳房縮小整形術組織標本中上皮細胞的制備IrECM三維培養乳腺干細胞實驗方法原理實驗材料組織標本試劑、試劑盒無菌DMEM F12 ?50:50 ?加人1.2 mg ml重碳酸鹽 CMD3培養基 膠原酶 ?900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培養瓶 625px2 Vitrogen包被 ?8μg