我國科學家研發出活體內蛋白質瞬時原位激活新技術
在活細胞等復雜的生命體系中原位研究蛋白質功能具有重要的科學意義。以往在活細胞內開展的蛋白質原位研究只能在某些特定蛋白家族中應用,如何進一步發展廣泛適用于不同類型蛋白家族的原位研究方法一直是困擾眾多生物學家的科學難題。 在國家重點研發計劃“蛋白質機器與生命過程調控”重點專項“信號轉導過程中蛋白質機器的活細胞標記與在體調控”項目的支持下,北京大學陳鵬教授課題組與王初課題組合作,發展了一種在活體內瞬時激活蛋白質的普適性新技術。他們將計算機輔助設計篩選與可遺傳編碼的非天然氨基酸技術有機結合,探究并發展了一種普適性的“鄰近脫籠”新策略。他們通過向蛋白質活性中心附近引入一種帶有光保護基團的非天然酪氨酸, 實現了對其活性的遠程干擾和抑制;隨后通過光解離反應將保護基團移除,使其活性重新恢復(圖1)。該方法通過對蛋白質活性中心鄰近殘基位點的脫籠,可在活細胞及活體動物內實現對不同類型蛋白質的在體、瞬時、特異性激活。 該團隊利用“鄰近脫籠”新......閱讀全文
“化學脫籠”:實現蛋白質高時間分辨的原位激活
在活細胞等生理環境下開展蛋白質功能的原位研究具有重要的科學意義。北京大學化學與分子工程學院陳鵬課題組長期致力于發展蛋白質的原位激活技術,希望為活細胞內的每一個蛋白質安裝“調控開關”。 近日這一研究組與王初課題組合作發表了題為“Time-resolved protein activation b
我國研究人員開發了蛋白質瞬時原位激活新技術
近日,北京大學陳鵬課題組與王初課題組發展了一種在活體細胞或動物內瞬時激活蛋白質的普適性新技術,具體成果發表在Nature上,題為Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems。 在復雜的生命體系中原
我國科學家研發出活體內蛋白質瞬時原位激活新技術
在活細胞等復雜的生命體系中原位研究蛋白質功能具有重要的科學意義。以往在活細胞內開展的蛋白質原位研究只能在某些特定蛋白家族中應用,如何進一步發展廣泛適用于不同類型蛋白家族的原位研究方法一直是困擾眾多生物學家的科學難題。 在國家重點研發計劃“蛋白質機器與生命過程調控”重點專項“信號轉導過程中蛋白質
新方法可精確控制蛋白質激活過程
據4月17日發表在《自然·化學》雜志上的一項研究,美國華盛頓大學醫學院研究團隊使用短暫的閃光將經過化學修飾的蛋白質片段連接在一起,形成功能性整體。這種名為光激活SpyLigation的新方法可打開通常關閉的蛋白質,讓研究人員能夠更詳細地研究和控制它們。這項技術在組織工程、再生醫學和了解人體如何運作方
原位PCR和原位RT
(一)、儀器設備?英國Thermo Hybaid原位PCR儀?。(二)、操作流程1、原位PCR?步驟1)預處理:(1)切片常規脫蠟;(2)0.2mol/L HCl處理10min;(3)5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min;(4)Nase消化組織37℃ 30min;(5)梯度酒精脫水,室溫干燥
蛋白質工程技術助力探索離子通道激活機制
近日,北京師范大學王友軍課題組及美國德克薩斯州A&M大學Yubin Zhou課題組采用蛋白質工程技術,巧妙地實現了膜蛋白在亞細胞器和質膜之間定位的切換,為研究細胞器膜蛋白的結構和功能提供了更加便捷的手段和新的思路。基于此方法,本文的一作鄭思思、馬國林、何漣“驅使”內質網定位蛋白STIM(Stro
科學家開發蛋白質復合物原位解析新技術
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/5/500192.shtm作為生命活動的執行者,蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能。近日,中國科學院大連化學物理研究所研究員張麗華、研究員趙群等研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑,顯
原位化學交聯可以解碼細胞中蛋白質動態結構策略
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/505975.shtm
德國應用化學:蛋白質復合物原位解析新技術
作為生命活動的執行者,蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能。近日,中國科學院大連化學物理研究所研究員張麗華、研究員趙群等研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑,顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度,同時具有良好的兩親性和生物兼容性,實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和
圖文看懂|導精子發育過程中蛋白質翻譯激活重要機制
《科學》(Science)在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心(生物化學與細胞生物學研究所)劉默芳研究組與國內外多家實驗室合作完成的以LLPS of FXR1 drives spermiogenesis by activating translation of stored mRNAs為題的
精子發育過程中蛋白質翻譯激活機制被發現了
據不完全統計,全球約有15%~20%的不孕不育夫婦,其中近50%是男性因素導致。環境污染、生活壓力、遺傳病等因素是造成男性不育的重要原因,但目前有一半以上不育男性無法明確其病因。中國科學院分子細胞科學卓越創新中心(生物化學與細胞生物學研究所,簡稱“分子細胞中心”)劉默芳研究組與國內外多家實驗室合
新發現!精子發育過程中蛋白質翻譯激活重要機制
據不完全統計,近20年我國不孕不育率從6.9% 升至17.1%,其中近50%是男性因素導致,目前有一半以上不育男性無法明確其病因。在精子細胞演變為精子的過程中,細胞核內的基因轉錄活動將完全停止,為后期精子細胞發育所需的基因提前轉錄為信使核糖核酸(mRNA),然后以抑制狀態儲存在精子細胞中,直到特
凝血酶原激活激活系統介紹
體內存在有內源性及外源性兩種激活系統。前者是指心血管內膜受損,或血液流出體外通過與異常表面接觸而激活因子Ⅻ(Hageman factor)。后者則由于組織損傷釋放出因子Ⅲ,從而激活因子Ⅶ。兩者都能啟動一系列連鎖反應,并在因子Ⅹ處匯合,最后都導致凝血酶原的激活及纖維蛋白的形成。
間接原位PCR(原位雜交PCR)
與直接原位PCR所不同的是,靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入,而是標記一段與擴增片段互補的探針,在擴增結束后,應用此探針進行原位雜交。因此,此處主要介紹原位雜交,其余方法同原位PCR。實驗材料組織或細胞樣品試劑、試劑盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNAR
間接原位PCR(原位雜交PCR)
間接原位PCR(原位雜交PCR) ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織或細胞樣品 試劑、試劑盒
間接原位PCR(原位雜交PCR)
與直接原位PCR所不同的是,靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入,而是標記一段與擴增片段互補的探針,在擴增結束后,應用此探針進行原位雜交。因此,此處主要介紹原位雜交,其余方法同原位PCR。一、預雜交1. 試劑與配制2×SSC50%去離子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v)預雜交液:2×SSC,5%硫酸葡
原位PCR
About in situ PCR?(Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The?In Situ?PCR: Amplification and Detection in a Cellu
原位PCR
實驗概要原位PCR技術自上世紀90年代初建立至今,科學家就一直對原位PCR的技術和應用進行研究,目前該項技術已日臻完善。原位PCR既能分辨帶有靶序列的細胞又能標出靶序列在細胞內的位置,在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理、臨床過程以及病理的轉歸,其特異性和敏感性均高于一般PCR技術。在病毒學、病理學
蛋白質可由一種酶激活AIE熒光指示劑檢測
蛋白印跡法 (Western blot) 是分析復雜生理樣本中蛋白質表達含量最常用的方法之一。然而,目前商用的化學發光顯色劑線性區間窄且信號不穩定,無法實現長時間定量檢測蛋白質含量,故研發一種可以線性區間較寬、信號穩定的顯色劑對于蛋白的定量檢測具有重要意義。 華東理工大學化學與分子工程學院朱為
賽默飛在ASMS發布Orbitrap-Eclipse質譜-激活高端蛋白質組研究
分析測試百科網訊 2019年6月3日,賽默飛在ASMS 2019大會推出全新的Orbitrap Eclipse三合一超高分辨質譜儀,通過智能數據采集最大化獲取研究信息并提高效率,其擴展的分析功能可重新激活高端蛋白質研究。Orbitrap Eclipse 三合一超高分辨質譜儀 面對日益復雜的學術
間接原位PCR(原位雜交PCR)實驗
實驗材料 組織或細胞樣品試劑、試劑盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNARnaseDTT乙醇儀器、耗材 玻片石蠟膜橡皮泥濕盒實驗步驟 一、預雜交?1. ? 試劑與配制?2×SSC?50%去離子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v)?預雜交液:2×SSC,5%硫
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應
中科院大連化物所開發蛋白質復合物原位解析新技術
近日,中科院大連化物所生物技術研究部生物分子高效分離與表征研究組(1810組)張麗華研究員團隊研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑,顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度,同時具有良好的兩親性和生物兼容性,實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和規模化精準解析。作為生命活動的執行者,蛋白質通
補體激活途徑
①經典途徑是以結合抗原后的IgG或IgM類抗體為主要激活劑,補體C1~C9共11種成分全部參與了激活途徑。除了抗原抗體復合物外,還有許多因子可激活此途徑,如非特異性凝集的Ig、細菌脂多糖、一些RNA腫瘤病毒、雙鏈DNA等。②替代途徑又稱旁路途徑。由病原微生物等細胞壁成分提供接觸面直接激活補體C3,然
在活體細胞或動物內瞬時激活蛋白質的普適性新技術
北京大學陳鵬課題組與王初課題組發展了一種在活體細胞或動物內瞬時激活蛋白質的普適性新技術,具體成果以長文形式在Nature上在線發表題為Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems文章。 在復雜的生
旁路激活途徑與經典激活途徑不同之處
旁路激活途徑與經典激活途徑不同之處在于激活是越過了C1、C4、C2三種成分,直接激活C3繼而完成C5至C9各成分的連鎖反應,還在于激活物質并非抗原抗體復合物而是細菌的細胞壁成分—脂多糖,以及多糖、肽聚糖、磷壁酸和凝聚的IgA和IgG4等物質。旁路激活途徑在細菌性感染早期,尚未產生特異性抗體時,即可發
LabSolutions電子許可證反激活與激活方法
在使用LabSolutions工作站時,我們可能會碰到以下問題:1、LabSolutions工作站打不開,經工程師指導無效,須重裝工作站;2、重裝電腦系統或是更換新的電腦。那么我們怎么才能獲取激活碼重新激活新安裝的LabSolutions工作站呢?溫馨提示?1、電子許可證在2017年開始使用,如果不
北京大學首次用小分子鈀催化劑激活特定蛋白質
近日,北京大學化學與分子工程學院陳鵬課題組首次利用小分子鈀催化劑激活了活細胞內的特定蛋白質,相關研究成果在《自然—化學》雜志在線發表。 利用化學小分子調控生物大分子是化學與生命科學交叉領域內受到長期關注的問題,而如何在活體環境下實現高度特異的調控是目前面臨的最大挑戰之一。 陳鵬課題組