原位合成的基因芯片制備技術
生物芯片制備中材料的固定方式主要包括原位合成法和點樣法兩種,點樣法又分為接觸式點樣法和非接觸式點樣法。原位合成法主要用于基因芯片的制備,點樣法可用于基因芯片和蛋白質芯片的制備。細胞芯片主要是通過細胞本身的貼壁生長來完成固定。組織芯片通過一些黏性溶劑(如石蠟)使組織切片固定在載體上。某些微流體芯片不需要材料的固定,只是通過硅材料上大量的微通道來完成檢測,另外一些微流體芯片通過特殊的作用(如蛋白質的特異性結合、序列互補DNA片斷等)把材料固定在微粒上來完成檢測。在此我們主要介紹原位合成技術和直接點樣技術。 原位合成是直接在固體基質上用4種單核苷酸合成所需的DNA片段。Affymetrix公司的GeneChipTM是高密度寡核苷酸微陣列原位合成的代表,制造工藝采用原位光刻合成。其他原位合成制造工藝還有光敏抗蝕層并行合成法、微流體通道在片合成法、噴印合成法及分子印章在片合成法。 ......閱讀全文
原位合成的基因芯片制備技術
生物芯片制備中材料的固定方式主要包括原位合成法和點樣法兩種,點樣法又分為接觸式點樣法和非接觸式點樣法。原位合成法主要用于基因芯片的制備,點樣法可用于基因芯片和蛋白質芯片的制備。細胞芯片主要是通過細胞本身的貼壁生長來完成固定。組織芯片通過一些黏性溶劑(如石蠟)使組織切片固定在載體上。某些微流體芯片不需
原位合成芯片的制備方法介紹
方法一Affymetrix公司將光平版印刷技術(photolithographicapproach)運用到DNA合成化學中,利用固相化學、光敏保護基及光刻技術得到位置確定、高度多樣性的化合物集合。該法利用光敏保護基來保護堿基單位的5’羥基。第一步利用光照射使固體表面上的羥基脫保護,然后固體表面與光敏
生物芯片技術的原位合成
光引導原位合成 原位合成適于制造寡核苷酸和寡肽微點陣芯片,具有合成速度快、相對成本低、便于規模化生產等優點。照相平板印刷技術是平板印刷技術與DNA和多肽固相化學合成技術相結合的產物,可以在預設位點按照預定的序列方便快捷地合成大量寡核苷酸或多肽分子。在生物芯片研制方面享有盛譽的美國Affymet
原位合成應用于生物芯片制備
在生物基因工程領域,生物芯片制備中材料的固定方式主要包括原位合成法和點樣法兩種,點樣法又分為接觸式點樣法和非接觸式點樣法。原位合成法主要用于基因芯片的制備,點樣法可用于基因芯片和蛋白質芯片的制備。細胞芯片主要是通過細胞本身的貼壁生長來完成固定。組織芯片通過一些黏性溶劑(如石蠟)使組織切片固定在載體上
原位合成應用于復合材料制備
傳統復合材料制備方法有粉末冶金法、噴射成型法和各種鑄造技術即模壓鑄造、流變鑄造和混砂鑄造等。所有這些方法是將事先制備好的增強相加入處于熔融狀態或粉末狀態的基體材料中,于是傳統的增強相被稱為外加的。外加法制備的復合材料存在增強體顆粒尺寸粗大、熱力學不穩定、界面結合強度低等缺點。為了克服這些缺點,近年來
基因芯片的制備方法
基因芯片的片基主要有硅片、玻璃片、硝酸纖維膜、聚丙烯膜等寡核苷酸芯片以人工合成的寡核苷酸片斷作為探針,制備方法主要有原位合成法和合成后點樣法。而 cDNA 芯片以長片斷的 PCR 產物作為探針,制備方法主要為合成后點樣法。(1)原位合成法? 制備寡核苷酸芯片原位合成法設備昂貴,技術復雜。(2)合成后
原位合成的應用范圍
復合材料制備傳統復合材料制備方法有粉末冶金法、噴射成型法和各種鑄造技術即模壓鑄造、流變鑄造和混砂鑄造等。所有這些方法是將事先制備好的增強相加入處于熔融狀態或粉末狀態的基體材料中,于是傳統的增強相被稱為外加的。外加法制備的復合材料存在增強體顆粒尺寸粗大、熱力學不穩定、界面結合強度低等缺點。為了克服這些
原位合成芯片的概念
原位合成芯片是指將多個寡核苷酸片段用單核苷酸底物直接合成到載體的特定位置上制備的芯片。
基因芯片的制備、應用與前景
摘要:基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術,是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法,將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面,然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交,再對雜交信號進行檢測分析,就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國
基因芯片的制備、應用與前景
摘要:基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術,是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法,將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面,然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交,再對雜交信號進行檢測分析,就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國內
基因芯片實驗原理與方法(一)
一、目的本實驗的目的是學會cDNA芯片的使用方法。了解各種基因芯片的基本原理和優缺點。基因芯片這一技術方法在1991年的Science雜志上被首次提出,其高通量、并行檢測的特點適應了分析人類基因組計劃所提供的海量的基因序列信息的需要,可以說,人類基因組計劃是基因芯片技術發展的原因,而對深人研究基因突
生物信息學技術:基因芯片實驗原理與方法
本實驗的目的是學會cDNA芯片的使用方法。了解各種基因芯片的基本原理和優缺點。基因芯片這一技術方法在1991年的Science雜志上被提出,其高通量、并行檢測的特點適應了分析人類基因組計劃所提供的海量的基因序列信息的需要,可以說,人類基因組計劃是基因芯片技術發展的原因,而對深人研究基因突變和基因表達
基因芯片實驗原理與方法
本實驗的目的是學會cDNA芯片的使用方法。了解各種基因芯片的基本原理和優缺點。基因芯片這一技術方法在1991年的Science雜志上被首次提出,其高通量、并行檢測的特點適應了分析人類基因組計劃所提供的海量的基因序列信息的需要,可以說,人類基因組計劃是基因芯片技術發展的原因,而對深人研究基因突變和基因
基因芯片技術的簡介
隨著人類基因組( human genome p roject, HGP) 、多種模式生物(model organism)和部分病原體基因組測序的完成,基因序列數據以前所未有的速度不斷增長。傳統實驗方法已無法系統地獲得和詮釋日益龐大的基因序列信息,研究者們迫切需要一種新的手段,以便大規模、高通量地
基因芯片技術的原理
基因芯片又稱DNA芯片(DNA chip )或DNA微陣列(DNA microarray)。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法將大量特定序列的探針分子密集、有序地固定于經過相應處理的硅片、玻片、硝酸纖維素膜等載體上,然后加入標記的待測樣品,進行多元雜交,通過雜交信號的強弱及分布,來分析目的
基因芯片的必備知識和操作流程
基因芯片 ?技術的誕生為生物技術工作人員打開了一道科研的便利之門,曾被評為1998年年度十大科技進展之一。本文對基因芯片的實驗原理、技術基礎、分類、用途、操作主要環節等內容做詳細的介紹。 1.基本原理和技術基礎 基因芯片以DNA雜交 ?為基本原理,基于A和T、G和C的互補關系。它是在探針
基因芯片的必備知識和操作流程
基因芯片 技術的誕生為生物技術工作人員打開了一道科研的便利之門,曾被評為1998年年度十大科技進展之一。本文對基因芯片的實驗原理、技術基礎、分類、用途、操作主要環節等內容做詳細的介紹。 1.基本原理和技術基礎 基因芯片以DNA雜交 為基本原理,基于A和T、G和C的互補關系。它是在探針的基礎上
原位合成的概念和應用介紹
原位合成是一種制作基因芯片的方法,是原來用于電子芯片制作的光刻法轉為核酸序列的合成技術。利用光罩控制反應位置,將核苷酸分子依序列一個一個接上去;可大量生產超高密度的芯片。由于制程與光罩成本等因素,這種方法做出的探針長度約在25-mer以下;因此同一個基因需要多個探針對應,以避免誤判。
基因芯片相關技術
樣品的準備及雜交檢測目前,由于靈敏度所限,多數方法需要在標記和分析前對樣品進行適當程序的擴增,不過也有不少人試圖繞過這一問題,如 Mosaic Technologies 公司引入的固相 PCR 方法,引物特異性強,無交叉污染并且省去了液相處理的煩瑣; Lynx Therapeutics 公司引入
基因芯片技術的主要應用
1998 年底美國科學促進會將基因芯片技術列為 1998 年度自然科學領域十大進展之一,足見其在科學史上的意義。現在,基因芯片這一時代的寵兒已被應用到生物科學眾多的領域之中。它以其可同時、快速、準確地分析數以千計基因組信息的本領而顯示出了巨大的威力。這些應用主要包括基因表達檢測、突變檢測、基因組
基因芯片合成后點樣法的優缺點分析
主要優點是:保持探針長度均一,成本低用途廣泛。缺點是:密度達不到原位合成法的水平,點之間重復性差。但經過改進,已可在6.5cm2?的范圍內容納100000個核酸位點已為從事基礎研究的實驗室廣泛采用。
用DNA芯片技術檢測基因的表達
一、芯片制備基因芯片的制備主要有兩種基本方法,一是在片合成法,另一種方法是點樣法。在片合成法是基于組合化學的合成原理,它通過一組定位模板來決定基片表面上不同化學單體的偶聯位點和次序。在片合成法制備DNA芯片的關鍵是高空間分辨率的模板定位技術和固相合成化學技術的精巧結合。目前,已有多種模板技術用于基因
用DNA芯片技術檢測基因的表達
一、芯片制備基因芯片的制備主要有兩種基本方法,一是在片合成法,另一種方法是點樣法。在片合成法是基于組合化學的合成原理,它通過一組定位模板來決定基片表面上不同化學單體的偶聯位點和次序。在片合成法制備DNA芯片的關鍵是高空間分辨率的模板定位技術和固相合成化學技術的精巧結合。目前,已有多種模板技術用于基因
基因芯片相關技術介紹
樣品的準備及雜交檢測目前,由于靈敏度所限,多數方法需要在標記和分析前對樣品進行適當程序的擴增,不過也有不少人試圖繞過這一問題,如 Mosaic Technologies 公司引入的固相 PCR 方法,引物特異性強,無交叉污染并且省去了液相處理的煩瑣; Lynx Therapeutics 公司引入的大
原位分離技術
近幾年來,原位分離技術(in situ product removal,簡稱ISPR)在乳酸發酵中的應用引起了世界范圍內的廣泛關注,溶劑萃取發酵法(油酸、叔胺等為萃取劑)、吸附法(離子交換樹脂、活性炭、高分子樹脂等)、膜法發酵(滲析、電滲析、中空纖維超濾膜、反滲透膜等)等,這些方法的使用都是基于在發
原位PCR技術
除了經典的原位雜交外。原位雜交可與其他組織化學技術相結合,或與其他分子生物學技術相結合,使其應用范圍擴大,成為更有應用價值的技術。PCR技術是根據生物體內DNA復制的特點而建立的在體外經酶促反應將特定DNA序列進行高效和快速擴增的技術,它可將單一拷貝或低拷貝的待測核酸以指數形式擴增而達到用常規方法可
溴酚藍的合成制備方法
1.將苯酚紅溶于冰乙酸,攪拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液,攪拌幾分鐘后傾入60℃熱水中,冷卻至室溫,放置過夜。過濾,依次用冰乙酸、苯洗滌濾餅,晾干,得溴酚藍。2.將酚紅溶于冰乙酸中,加熱至沸,滴加溴溶于冰乙酸中的溶液,黃色固體析出時,過濾,用乙酸洗去游離溴,置于空氣中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮與冰乙
熒光原位雜交(FISH)探針的制備
實驗概要本實驗介紹了熒光原位雜交(FISH)探針的制備原理及技術。實驗原理染色體熒光原位雜交始于傳統的細胞遺傳學和DNA技術的結合,這種結合開創了一門新的學科——分子細胞遺傳學。其基礎是Southern ? blot原理,以半抗原如生物素、地高辛間接標記或以熒光素直接標記的已知核酸分子為探針,探針和
用DNA-芯片技術檢測基因的表達
實驗概要生物芯片是將生命科學研究中所涉及的不連續的分析過程(如樣品制備、化學反應和分析檢測),利用微電子、微機械、化學、物理技術、計算機技術在固體芯片表面構建的微流體分析單元和系統,使之連續化、集成化、微型化。生物芯片技術主要包括四個基本要點:芯片方陣的構建、樣品的制備、生物分子反應和信號的檢測。1
德國研發半合成氫化酶制備氫氣新技術
氫氣是一種具有廣泛應用前景的新能源,應用生物技術通過酶催化手段制備氫氣,在節能、環保方面具有明顯優勢,同時不需要貴金屬作為催化劑,生產成本大大降低,但獲得大量具有合成氫氣所需生物活性的氫化酶(Hzdrogenase)目前還非常困難。??????? 德國波鴻魯爾大學光生物技術研究所開發出一種新技術