哺乳動物中制備基因組DNA實驗
制備DNA 實驗材料 動物組織 試劑、試劑盒 PBS 乙酸銨 乙醇 酚 氯仿 異戊醇 TE 儀器、耗材 離心機 搖床 研缽 實驗步驟 1. 切下組織并立即剪成小塊,置于......閱讀全文
哺乳動物中制備基因組DNA實驗——制備DNA
在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素,以保證DNA的完整性,為后續的實驗打下基礎。一般真核細胞基因組DNA有107-9bp,可以從新鮮組織、培養細胞或低溫保存的組織細胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細胞,隨后用酚抽提而實現的。實驗材料動物組織試劑、
哺乳動物中制備基因組DNA實驗
實驗材料 動物組織試劑、試劑盒 PBS乙酸銨乙醇酚氯仿異戊醇TE儀器、耗材 離心機搖床研缽實驗步驟 1. ?切下組織并立即剪成小塊,置于液氮中凍結。?2. ?將200 mg~1 g 的組織用預冷的研缽和研杵研碎,或用錘子將其搗為細粉末,每100 mg 組織用1. 2 ml 消化緩沖液懸浮。?3. ?
哺乳動物中制備基因組DNA實驗
制備DNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 動物組織 試劑、試劑盒
哺乳動物-DNA-的快速分離
根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb,適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 k
哺乳動物-DNA-的快速分離
實驗方法原理 根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb,適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。實驗材料 無 DNase 的 RNase蛋白酶 K哺乳動物組織或全血試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液乙
哺乳動物-DNA-的快速分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb,適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。
新研究揭示哺乳動物DNA復制機制
在細胞中,DNA及其相關物質每隔一定時間就會復制,這是所有有機體必不可少的一個過程。這導致了從身體對疾病作出的反應到頭發顏色在內的一切。DNA復制是在20世紀50年代后期確定的,但是從那以后,全球各地的研究人員都試圖了解這一過程是如何精確地受到調節的。如今,科學家們知道了。 在一項新的研究中,
從DNA變化可推測哺乳動物壽命
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/506375.shtm
從DNA變化可推測哺乳動物壽命
科學家在哺乳動物衰老和壽命研究領域取得了重磅成果。美國加州大學洛杉磯分校大衛格芬醫學院和加州大學洛杉磯分校健康中心科學家領導的國際研究小組,以兩篇開創性研究詳細介紹了一種DNA變化,而人類和其它哺乳動物在整個歷史上都有這種變化,其與所有物種的壽命和許多其他特征息息相關。 兩項研究分別發表在《科
純化DNA實驗_從哺乳動物細胞或組織分離DNA
基因純化,可以用于(1)對大量提取的質粒DNA進行純化;(2)常用的方法有柱層析法和氯化銫梯度離心法。實驗材料細胞試劑、試劑盒TBS抽提緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 根據樣品類型,從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌
哺乳動物調控DNA復制起始以維持基因組穩定性的機理
DNA是主要的遺傳物質,也是中心法則的源頭。DNA代謝包括DNA復制、轉錄及DNA修復等。其中,DNA復制保證了遺傳信息精確完整地傳遞,而轉錄則是細胞身份維持和功能調控的關鍵。DNA復制發生在整個染色質上,而轉錄則只發生在染色質上的轉錄區。如果這兩個關鍵的細胞過程碰撞,猶如獨木橋上獅虎相遇,會發
從哺乳動物細胞或組織分離DNA
1. 根據樣品類型,從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次,用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中,將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中,用 1 mlTBS 沖洗培養皿,并入離心管中的細胞懸液。于 4℃ 以
基因代謝速度決定哺乳動物進化
通常認為人類和黑猩猩之間僅有1%~2%的基因差異,但事實上,區分人類和黑猩猩的基因比科學家預料的要多。一項新的研究表明,把人類和近親——黑猩猩區分開的是人類獲得新基因、拋棄舊基因的速率。 ? 人類比黑猩猩和其他哺乳動物基因代謝速度快。(圖片提供:《科學》雜志網站) ?人類和黑猩猩這兩個物種
哺乳動物細胞基因突變試驗
哺乳動物體外培養細胞的基因正向突變試驗常用的測試系統有小鼠淋巴瘤L5178Y細胞,中國倉鼠肺V79細胞和卵巢CHO細胞的三個基因位點的突變,即次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位點。HGRPT和Na+/K+ATP酶位點突變可用于上述三種細胞,O
干細胞+基因編輯=哺乳動物同性繁殖
中國科學院的研究人員培育出了有兩個媽媽的健康小鼠(小鼠可以擁有自己的正常后代),同時,有兩個爸爸的小鼠也出生了,但只存活了幾天,研究發表在10月11日的《Cell Stem Cell》。同性動物產生后代如此具有挑戰性,這項研究指出,利用干細胞和有針對性的基因編輯可以克服這些障礙。 “我們對哺乳動物
脈沖場凝膠電泳制備DNA(哺乳動物細胞和組織DNA的分離)
本方案敘述了從培養細胞和組織制備 DNA 樣品的方法。病人或動物來源的白細胞也能用作 PFGE 的高分子質量 DNA 樣品。如果確有必要,DNA 也可以從哺乳動物細胞分離出的胞核制備。經驗表明:從胞核制備 DNA 沒有優點,因為從完整細胞制備的 DNA 同樣易于酶切。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三
脈沖場凝膠電泳制備DNA(哺乳動物細胞和組織DNA的分離)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案敘述了從培養細胞和組織制備 DNA 樣品的方法。病人或動物來源的白細胞也能用作 PFGE 的高分子質量 DNA 樣品。如果確有必要,DNA 也可以從哺乳動物細胞分離出的胞核制備。經驗表明:從胞核制備 DNA 沒有優點,
脈沖場凝膠電泳制備DNA(哺乳動物細胞和組織DNA的分離)
實驗方法原理 本方案敘述了從培養細胞和組織制備 DNA 樣品的方法。病人或動物來源的白細胞也能用作 PFGE 的高分子質量 DNA 樣品。如果確有必要,DNA 也可以從哺乳動物細胞分離出的胞核制備。經驗表明:從胞核制備 DNA 沒有優點,因為從完整細胞制備的 DNA 同樣易于酶切。實驗材料
用纏繞法從哺乳動物細胞中分離DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方法由 Bowtell 法(1987) 改進而成,可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面上,接著將沉淀的 DNA 纏繞到一個 Shepherd 氏鉤
用纏繞法從哺乳動物細胞中分離DNA
實驗方法原理 本方法由 Bowtell 法(1987) 改進而成,可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面上,接著將沉淀的 DNA 纏繞到一個 Shepherd 氏鉤上。纏在鉤上的 DNA 從乙醇溶液中轉出溶于所選擇
用纏繞法從哺乳動物細胞中分離DNA
實驗方法原理本方法由 Bowtell 法(1987) 改進而成,可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面上,接著將沉淀的 DNA 纏繞到一個 Shepherd 氏鉤上。纏在鉤上的 DNA 從乙醇溶液中轉出溶于所選擇的液體緩沖液。
哺乳動物細胞基因穩定轉染的實驗
分析基因的功能常需要形成含有穩定整合了該基因的哺乳動物細胞系。在轉染中大約有1/104細胞將穩定整合外源因而可用一顯性(正向)選擇標記來分離穩定的轉化細胞。用可高效轉染的細胞系來確保轉染成功。另外,應包括合適的對照以確定目的基因無細胞毒性。實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒完全培養液儀器、耗材培養箱離
哺乳動物細胞基因穩定轉染的實驗
實驗材料 哺乳動物細胞試劑、試劑盒 完全培養液儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?確定所要轉染的細抱系能呈獨立集落生長。對于貼壁細胞,在10 cm 組織培養培養皿中接種約100個細胞,培養10~12天,毎4天換液1次。亞甲藍染色后對成活的細胞集落進行計數。?2. ?確定母代細胞的選擇條件:將一
哺乳動物細胞基因穩定轉染的實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 哺乳動物細胞 試劑、試劑盒
哺乳動物“共同祖先”基因組重建完成
從鴨嘴獸到藍鯨,每一種現代哺乳動物都是生活在大約1.8億年前的“共同祖先”的后裔。人們對“共同祖先”知之甚少,現在,一個國際研究小組通過計算重建了其基因組。該成果將發表在《美國國家科學院院刊》上,對理解哺乳動物的進化和保護工作具有重要意義。 研究人員利用了來自32個活物種的高質量基因組序列,這
基因檢測DNA分析
DNA分析主要用于識別單個基因異常引發的遺傳性疾病,如亨廷頓病等。DNA分析的細胞來自血液或胎兒細胞。
基因“剪刀”可加速特定基因遺傳-在哺乳動物中完成實驗
近日,研究人員首次使用被稱為基因“剪刀”的基因組技術CRISPR加快哺乳動物特定基因的遺傳。這種極具爭議的基因驅動策略幾年前在實驗室飼養的昆蟲中得到證明。因為它能在整個物種中迅速傳播一種基因,從而激發了人們利用致命基因消滅瘧蚊等害蟲的夢想。現在,被消滅的對象或許還有具有破壞作物或能致病的哺乳動物
將大片段插入-DNA-導入哺乳動物細胞和胚胎實驗
? ? ? ? ? ? ? ? 基本方案1 通過質體融合將完整的 YAC 導入哺乳動物細胞 基本方案2 將細菌人工染色體(BAC或PAC)引入到哺乳動物細胞和小鼠胚胎中 ? ? ? ?
植物和哺乳動物線粒體基因組的差異
植物細胞植物細胞的線粒體基因組的大小差別很大,最小的為100kb左右,大部分由非編碼的DNA序列組成,且有許多短的同源序列,同源序列之間的DNA重組會產生較小的亞基因組環狀DNA,與完整的“主”基因組共存于細胞內,因此植物線粒體基因組的研究更為困難。哺乳動物哺乳動物的線粒體基因DNA沒有內含子,幾乎
DNA發現之前的基因
三一學院地處都柏林的中心,它那灰色的三層新古典主義建筑環繞在草坪和運動場周圍。校園的最東頭是另一棟灰色建筑,落成于1905年,則是另一種截然不同的風格。那是菲爾茲杰拉德大樓,或者依據其門楣上刻的字叫物理實驗樓。這棟樓的最頂層是一個演講廳,1943年2月第一個周五的傍晚,約有400余人聚集在這里,