細胞凋亡的檢測方法
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜 的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確;(2)可用許多相關分析;(3)結合被測細胞DNA含量分析,可確定凋亡的細胞所處的細胞周期。但該法周樣也具有標本制作復雜。非原位檢測,不易與變性細胞鑒別等因素的限制。1. 檢測形態學及細胞膜完整性的Hoechs-PI雙染色法細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間,利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,采用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。常用Hoechs-PI染色法,正常細胞對染料有拒染性,熒光著色很淺,凋亡細胞主要攝取hoechs-PI染料......閱讀全文
細胞凋亡,細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側
細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨
細胞凋亡檢測方法
細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。一、細胞凋亡的形態學檢測 根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。 1 光學顯微鏡和倒
細胞凋亡檢測方法
細胞發生凋亡時,不同區域內(如細胞膜、細胞漿、線粒體、細胞核等)會發生不同的生理生化改變。因此,針對不同區域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡檢測原理:Annexin?Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結合蛋白,正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidyl
細胞凋亡的檢測方法
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜?的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比
細胞凋亡的檢測方法
(一)???測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二)???用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡,乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此,有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡,乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此,有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
細胞凋亡檢測方法介紹
細胞凋亡是指細胞在生長到一定階段及某些生理過程中,會受到多因素和機制的嚴格調控而進入死亡。這是一個動態的過程,會涉及一系列復雜的生化反應, 是一個需要酶參與的級聯反應,同時也涉及不同基因的表達及調控、信號傳導。其中有幾項生理過程能被用來檢測凋亡的發生,因此多參數分析法對于準確檢測這一過程十分
細胞凋亡檢測方法簡介
細胞凋亡是指細胞在生長到一定階段及某些生理過程中,會受到多因素和機制的嚴格調控而進入死亡。這是一個動態的過程,會涉及一系列復雜的生化反應, 是一個需要酶參與的級聯反應,同時也涉及不同基因的表達及調控、信號傳導。其中有幾項生理過程能被用來檢測凋亡的發生,因此多參數分析法對于準確檢測這一過程十分
細胞凋亡的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染色:如果
細胞凋亡的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核?呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜?不
細胞凋亡的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整
細胞凋亡的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染
細胞凋亡的早期檢測方法
1、PS(磷脂酰絲氨酸)在胞外膜分布的檢測PS從胞膜內側轉移到外側現象是在細胞凋亡的早期即可發生標志。AnnexinV是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白,能專一性的結合暴露在胞膜外側的PS,使用熒光素標記的AnnexinV 蛋白(如Annexin V-FITC)即可檢測細胞凋亡。由于這是一種凋亡早
細胞凋亡的幾種檢測方法
???? 一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍
細胞凋亡檢測:生化特征的檢測方法
根據調亡的生化特征的檢測方法一、瓊脂糖凝膠電泳1)常規的瓊脂糖凝膠電泳方法一:1.收集細胞(5×106)1000r/min,離心5min,去上清。2.PBS洗一次,1000r/min,離心5min,去上清。3.加細胞核裂解液500μl重懸細胞,50℃水浴,3~5h,不時振搖或37℃過夜。4.加0.5
常用細胞凋亡檢測方法(一)
一、細胞凋亡的形態學檢測1 光學顯微鏡和倒置顯微鏡 (1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。 (2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等
常用細胞凋亡檢測方法(五)
七、凋亡相關蛋白TFAR19蛋白的表達和細胞定位分析? TFAR19(PDCD5)是由本研究室在國際上首先報導的一個擁有自己知識產權的人類新基因,前期的功能研究表明,它是促進細胞凋亡的增強劑。利用熒光素(FITC)標記的TFAR19單克隆抗體為探針,對細胞凋亡過程中TFAR19蛋白的表達水平及定位
常用細胞凋亡檢測方法(四)
五 TUNEL法? 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端,從而可進行凋亡細胞的檢測,這類方法稱為脫氧核
細胞凋亡檢測技術與方法
細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多細胞
細胞凋亡檢測方法有哪些
細胞凋亡的形態學檢測1?光學顯微鏡和倒置顯微鏡(1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體.貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落.(2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等.凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形
細胞凋亡檢測技術與方法
細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多
常用細胞凋亡檢測方法(三)
三、線粒體膜勢能的檢測? 線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用,多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡,而線粒體跨膜電位DYmt的下降,被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件,它發生在細胞核凋亡特征(染色質濃縮、DNA斷裂)出現之前,一旦線粒體DYmt崩潰,則細胞凋亡不可逆轉。 線
常用細胞凋亡檢測方法(圖)
一、細胞凋亡的形態學檢測1、光學顯微鏡和倒置顯微鏡(1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。(2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋
常用細胞凋亡檢測方法(二)
二、磷脂酰絲氨酸外翻分析(Annexin V法)? 磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于細胞膜的內側,但在細胞凋亡的早期,PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中(圖3)。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,
細胞凋亡檢測技術與方法
細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多
常用細胞凋亡檢測方法集錦
細胞凋亡的形態學檢測1 光學顯微鏡和倒置顯微鏡(1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體.貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落.(2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等.凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形
常用細胞凋亡檢測方法集錦
細胞凋亡的形態學檢測1 光學顯微鏡和倒置顯微鏡(1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體.貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落.(2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等.凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形
細胞凋亡的檢測方法綜述4
DNA聚合酶或Klenow大片段介導的原位缺口平移(ISNT)切片常規脫蠟,梯度乙醇復水化。將切片組織浸入2×SSC液中,80℃,20min,然后蒸餾水沖盡。0.5%胃蛋白酶(pH2.0)37℃消化0~20min,PBS洗盡。用濾紙擦干組織塊周邊液體放入濕盒組織切片上滴加緩沖液A,5min。緩沖液A