厭氧菌的分離和培養
1 目的1.1 了解厭氧微生物的生長特性1.2 觀察厭氧微生物(雙歧桿菌)的形態特征1.3 掌握厭氧微生物的滾管分離、培養與計數技術 2 原理目前培養厭氧微生物的簡便而又有效的技術包括有:厭氧箱培養技術;厭氧罐培養技術;厭氧袋培養技術;亨蓋特厭氧滾管技術.這里介紹的是亨蓋特厭氧滾管技術.亨蓋特厭氧滾管技術是美國微生物學家亨蓋特(Hungate)于1950年首次提出并應用于瘤胃厭氧微生物研究的一種厭氧培養技術.以后這項技術又經歷了幾十年的不斷改進,從而使亨蓋特厭氧技術日趣完善,并逐漸發展成為研究厭氧微生物的一整套完整技術.而且多年來的實踐已經證明它是研究嚴格、專性厭氧菌的一種極為有效的技術.亨蓋特厭氧滾管培養技術不僅可用于有益厭氧菌如雙歧桿菌等的分離、與活菌培養計數,還可以用于有害腐敗菌(如酪酸菌)或病原菌(如肉毒梭狀芽孢桿菌)的分離與鑒定. 3 材料3.1 樣品雙歧酸奶(液體)、雙歧桿菌制劑(固體).3.2 ......閱讀全文
接種、分離純化和培養技術
一、接種將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種.1、接種工具和方法在實驗室或工廠實踐中,用得最多的接種工具是接種環、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種.在固體培養基表面要將菌液
接種、分離純化和培養技術
一、接種? ? 將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種.1、接種工具和方法? ? 在實驗室或工廠實踐中,用得最多的接種工具是接種環、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種.在固體培
接種、分離純化和培養技術
一、接種 將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法 在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面
新生大鼠心臟細胞的分離和培養實驗_分離及培養程序
實驗材料Sprague Dawley 幼鼠試劑、試劑盒胰酶液乙醇儀器、耗材攪拌臺燒杯實驗步驟組織消化和分離細胞1. 在細胞操作間內，放一個加熱攪拌臺，上放一個裝有 100 ml 滅菌水的容量 600 ml 的燒杯，加熱至 37℃。2. 準備胰酶液。用水浴或溫箱使胰酶液溫度保持在 37℃。3. 做一個
細菌的分離培養、純培養和生化試驗
一、目的 掌握細菌 ?培養、純培養與基本微生物操作技能，了解生化試驗原理、方法和意義。 二、實驗內容（一）細菌的分離培養：傾注法和劃線法（傾注法：此法很少應用）本次試驗采用前一種方法）劃線法： 融化普通瓊脂 ?培養基，倒平板，雜檢。取1號菌如圖1之一方法劃線，37℃培養24h。
細菌的分離培養、純培養和生化試驗
一、目的掌握細菌 ?培養、純培養與基本微生物操作技能，了解生化試驗原理、方法和意義。二、實驗內容（一）細菌的分離培養：傾注法和劃線法（傾注法：此法很少應用）本次試驗采用前一種方法）劃線法：融化普通瓊脂 ?培養基，倒平板，雜檢。取1號菌如圖1之一方法劃線，37℃培養24h。(二) 釣菌和純培養：觀察菌
人PBMC分離和培養步驟和體會
1、將靜脈血20ｍl用ACD抗凝劑以容積比血：抗凝劑＝9：1抗凝處理。 2、按血：分離液＝1：2注入國產淋巴細胞分離液上層，400g 20℃離心30分鐘。 3、交接層重浮于4倍體積的RPMI1640并通過離心法200g，10min洗三次。 4、獲得細胞可做分選或其他實驗。 體會：
糞便厭氧菌培養的臨床意義
檢查有無難辨梭狀芽胞桿菌感染造成的偽膜性腸炎。該病是由于結腸正常菌群失調、難辨梭狀芽胞桿菌繁殖并產生毒素引起黏膜損傷及炎癥所致。臨床表現主要為頻繁腹瀉、發熱、腹痛、腹脹、嘔吐及白細胞升高等癥狀。糞便厭氧培養是將糞便接種于選擇性培養基環絲氨酸頭孢西丁果糖瓊脂（CCFA）培養基上進行厭氧培養。難辨梭
微生物分離培養和鑒定
1.培養基的選擇用自動血培養分析儀時選用相應的血培養瓶，如需氧+厭氧，需氧+高滲等。2.分離和鑒定 當觀察有細菌生長時或血培養儀陽性報警時，應及時作如下檢驗：（1）涂片染色鏡檢，結果及時與臨床聯系；（2）轉種血平板、巧克力平板、厭氧血平板或其他特殊培養基等分離培養純菌再進行鑒定；（3）同時做藥敏試驗
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗概要本實驗是根據Hennings等（1980）的方法改進而來的。該方案也適用于原代大鼠角質細胞的分離。主要試劑HBSS： NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 無水Na2PO4 47.86mg/L 無水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L實驗
接種、分離純化和培養技術（二）
二、分離純化 含有一種以上的微生物培養物稱為混和培養物（Mixed culture）。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞，那么這個菌落稱為純培養（Pure culture）。在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程稱為分離純化，方法有許多種。１、傾注平板法
接種、分離純化和培養技術（一）
一、接種 將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法 在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗，然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口，用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下，用一把鑷子夾住身體，另一把鑷子拉開皮膚。4) 將
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟 1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗，然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口，用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗試劑HBSS： NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L無水Na2PO4 47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟將1~2天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠，流水徹底
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗，然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗試劑HBSS：?NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4?60mg/L無水Na2PO4?47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3?350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟1. 將1~2天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠，流
從成年骨骼肌分離和培養成肌細胞實驗——分離培養細胞
骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞，可用于（1）肌細胞的結構研究（2）肌細胞功能研究（3）對肌細胞的相關課題研究（4）臨床細胞移植。實驗方法原理骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞。在培養條件下，成肌細胞仍繼續表達一些分化特征。成肌細胞稱衛星細胞，分
生化檢測項目胃厭氧菌的分離與鑒定介紹
厭氧菌的分離與鑒定介紹： 厭氧菌的分離與鑒定是對氧敏感度高的細菌進行分離與鑒別的試驗，因為厭氧微生物在自然界分布廣泛，種類繁多，其生理作用日益受到人們的重視。專性厭氧菌，對氧氣非常敏感，因此，他們的分離、培養及活菌計數的關鍵是提供無氧和低氧化還原電勢的培養環境。厭氧菌的分離與鑒定正常值： 體內菌
微生物的接種、分離和培養
一、目的要求1、掌握各種分離、接種方法。2、掌握無菌操作基本環節。二、實驗說明微生物在自然界中呈混雜狀態存在，要獲得所需菌種，必需從中把它們分離出來。在保存菌種時不慎受到到污染也需予以分純。微生物分離和純化的方法很多，但基本原理卻是相似的，即將待分離的樣品進行一定的稀釋，并使微生物的細胞（或孢子）盡
微生物的接種、分離和培養
實驗方法原理微生物的接種分離和培養是做細胞代謝分析和體外實驗的基本步驟之一，接種分離的好壞直接影響微生物的培養以及后續的實驗操作和結果（1）用于細胞分離（2）細胞純化（3）細胞增殖培養。實驗材料大腸桿菌枯草桿菌金黃色葡萄球菌酵母菌試劑、試劑盒來蘇爾石炭酸溶液福爾馬林牛肉膏蛋白胨儀器、耗材恒溫培養箱接
血細胞分離培養方法和步驟2
收集渾濁帶分離獲得的淋巴細胞，用無鈣、鎂離子的PBS洗3次后，再用培養基洗1次后計數，分瓶培養。此法分離獲得淋巴細胞純度高。分離液的制備：9% Ficoll（20℃下相對密度約1.020）24份與33.4%泛影葡胺（用泛影鈉或Conray400也可，在20℃下相對密度約1.200）10份混合后，
細菌接種、分離純化和培養技術（1）
一、接種將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面要將菌液
細菌接種、分離純化和培養技術（2）
２、涂布平板法首先把微生物懸液通過適當的稀釋，取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養基表面上，經恒溫培養便可以得到單個菌落。（圖３－５，b）３、平板劃線法最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環取培養物少許在平板上進行劃線。劃線的
病原體培養和分離方法介紹
雖較直接檢查法為慢,且較為復雜,但更準確,應用范圍也更廣，幾乎可用于所有的病原體。一般除病毒、衣原體和立克次氏體外，都可用無生命的培養基培養和分離。培養基的種類很多，可根據不同的病原體加以選用。培養分離病原體后，還可進行各種試驗，如發酵試驗、毒力試驗等，這對病原體的進一步鑒定非常重要。病毒、衣原體和
結腸隱窩的分離和培養實驗
實驗方法原理用膠原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的組織塊，然后用山梨糖醇分離隱窩。試劑、試劑盒HBSS PSG消化混合液生長培養液S-DMEM儀器、耗材90 mm Petri 培養皿普通容器24 孔培養板保鮮膜培養瓶Moveue 吸管實驗步驟材料無菌1. HBSS/PSG: 添加 lOOU
原代細胞分離和培養基本步驟
原代細胞分離和培養基本步驟?1、器官和組織的選擇盡可能的去除不必要的組織和血跡。?2、原代細胞的分離（1）應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。（2）根據組織來源不同，可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。?3、原代細胞的培養：（1）PriCells原代細胞特制培養基（2
結腸隱窩的分離和培養實驗
實驗方法原理 用膠原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的組織塊，然后用山梨糖醇分離隱窩。試劑、試劑盒 HBSS PSG消化混合液生長培養液S-DMEM儀器、耗材 90 mm Petri 培養皿 普通容器24 孔培養板保鮮膜培養瓶 Moveue 吸管實驗步驟 材料無菌1. HBSS/PSG: 添
平滑肌細胞的分離和培養
實驗材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒平滑肌培養液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?儀
原代細胞分離和培養基本步驟
?1、器官和組織的選擇??? 盡可能的去除不必要的組織和血跡。??? 2、原代細胞的分離??? （1）應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。??? （2）根據組織來源不同，可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。??? 3、原代細胞的培養：??? （1）PriCells原代