細胞消化基礎問答
細胞培養實驗中不可或缺的除了培養基，胰酶也是非常重要的一個角色，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，每種細胞的培養條件各不相同，但是，在細胞傳代過程中都少不了這個步驟—胰酶消化。細胞消化使用胰酶時需要了解哪些問題？一、 細胞培養過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細胞膜上與培養皿壁結合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時，細胞由于自身內部細胞骨架的張力以及培養液表面張力可成為球形。 圖1.胰酶酶切位點二、 使用胎牛血清培養細胞，在使用胰酶消化時發現血清可以終止此過程，這是何原因？血清終止的原理其實是競爭抑制，就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結合，使胰酶失去消化細胞蛋白的機會。三、 為什么使用了胰蛋白酶消化，細胞還是成團的，這可能是什么原因導致的？① 消化時間不夠 ② 吹打力度不夠 ③ 胰酶消化液濃......閱讀全文
細胞消化基礎問答
細胞培養實驗中不可或缺的除了培養基，胰酶也是非常重要的一個角色，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，每種細胞的培養條件各不相同，但是，在細胞傳代過程中都少不了這個步驟—胰酶消化。細胞消化使用胰酶時需要了解哪些問題？一、 細胞培養過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽
細胞培養基礎問答
細胞培養實驗中用量最多的就是細胞培養基，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件，則會導致細胞表達不同的表型因此，在實驗前，需要熟悉自己所使用的細胞系，并在實驗中嚴格遵守所有產品的操作說明。?在實驗過程中，作為實驗小白，我們應該如何應對相關問題
FBS基礎問答
血清是一種純天然培養基，含有細胞生長繁殖所需的多種營養成分，如蛋白質、多肽等，多用于細胞培養、生物制品及診斷試劑的生產。血清的主要成分是蛋白質，如：白蛋白，球蛋白，纖維粘連素（促進細胞附著）、α2巨球蛋白（抑制胰蛋白酶的作用），激素，胰島素（可促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸，促細胞分裂），類胰島素生長因
電熱套基礎問答
1.提問：燒瓶能接觸電熱套壁嗎,會不會有受熱不均的問題?回答：可以，我們經常在電熱套里加熱蒸餾!不過溫度不超過180度。應該會有加熱不均勻的問題，畢竟不是水浴。2.提問：平底燒瓶是否可用電熱套長時間加熱?(通常都用圓底燒瓶進行加熱，因為其受熱均勻、耐壓高。但我看到幾篇“分析煙絲揮發性成分”的文章里，
石油產品基礎知識問答
1、什么是油品的餾程?? ? 餾程是指以油品在規定條件下蒸餾所得到的以初餾點到終餾點表示蒸發特征的溫度范圍。主要用來判定油品輕、重餾分組成的多少，控制產品質量和使用性能等。?2、什么是辛烷值?? ? 代表點燃式發動機燃料抗爆性的一個約定數值。在規定條件下的標準發動機試驗中，通過和標準燃料進行比較來測
電熱套基礎小知識問答
提問：燒瓶能接觸電熱套壁嗎,會不會有受熱不均的問題?回答：可以，我們經常在電熱套里加熱蒸餾!不過溫度不超過180度。應該會有加熱不均勻的問題，畢竟不是水浴。提問：平底燒瓶是否可用電熱套長時間加熱?(通常都用圓底燒瓶進行加熱，因為其受熱均勻、耐壓高。但我看到幾篇“分析煙絲揮發性成分”的文章里，將煙絲和
QPCR的基礎知識問答
問：什么是QPCR？答：QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統，也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統，簡稱QPCR。問：QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系？答：聚合酶鏈式反應（Polymerase C
骨質疏松癥知識問答：基礎篇
骨質疏松癥是一種常見的老年性疾病。隨著人口老齡化趨勢的不斷加劇，其發病率也在同步增長。目前我國60歲以上人群中骨質疏松癥的發病率約為40％～50％，全國骨質疏松癥病人超過1億，男女之比為3:7，其中，80%為老年患者。 雖然人們對“骨質疏松”這個名詞耳熟能詳，但對它的認識往往是“一知半解”，甚
示波器基礎知識一百個問答
示波器基礎知識百問 1． 對一個已設計完成的產品，如何用示波器經行檢測分析其可靠性？ 答： 示波器早已成為檢測電子線路最有效的工具之一，通過觀察線路關鍵節點的電壓電流波形可以直觀地檢查線路工作是否正常，驗證設計是否恰當。這對提高可靠性極有幫助。當然對波形的正確分析判斷有賴于工程師自身的經驗。
細胞培養常見問答
細胞培養常見問答 1、加到培養基中的血清 必須滅活嗎？ ? 答：不是必須的，看做什么實驗了。 ? 2、四季青胎牛血清滅活是56 ℃30分鐘嗎？ ? 答：如果用于培養大多數的腫瘤細胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長因子 。但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞，如內皮細胞，
細胞消化知識
無論是原代細胞還是細胞系或癌細胞，細胞長滿瓶后，需要對細胞進行傳代或將細胞收集起來用作其他實驗。貼壁生長的細胞必須要做的一步便是消化過程，下面便對細胞消化、中和、洗滌等過程做個簡單介紹。1、絕大部分細胞消化的時候是只需用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留胰酶附著在細胞表面在37度一般不到2min足夠
細胞傳代實驗_消化法
實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞，用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精
細胞消化經驗總結！
一、酶消化法1、胰酶。這是用得多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存
納米激光粒度儀（動態散射光DLS）基礎知識問答
隨著納米技術的繁榮發展，基于DLS技術的納米激光粒度儀也日益普及，掌握其基本特性及基礎知識，相信會對關注納米粉體材料的粉體圈內人士有所幫助。本文將以問答的形式，向讀者介紹一些納米激光粒度儀的基本常識。1、納米激光粒度儀的測量原理是什么？由于分子熱運動，懸浮介質（多數情況下是水或者有機溶劑）的分子不斷
流式細胞術常見問題問答
1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什么的？FL2-W是只檢測熒光的脈沖寬度， FL2-H是指脈沖高度。通常在做細胞周期分析時應用，用于去除粘連細胞。2、流式同型對照怎樣選擇？同型對照（Isotype Control）：使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免
流式細胞術常見問題問答
1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什么的？ FL2-W是只檢測熒光的脈沖寬度， FL2-H是指脈沖高度。通常在做細胞周期分析時應用，用于去除粘連細胞。 2、流式同型對照怎樣選擇？ 同型對照（Isotype Control）：使用與一抗相同
飼料中添加外源性消化酶的理論基礎
幼齡動物：幼齡畜禽消化系統發育不完善，消化酶，胃酸和消化液分泌不足，不能充分分解大分子營養物質，單胃動物（豬）和家禽（雞、鴨）不能消化非淀粉多糖。成年動物應激狀態下：動物處于應激狀態時，消化道內源酶分泌量降低，需要外源酶輔助作用予以補充。老齡動物（如老齡蛋雞、種雞等），消化機能降低，也需補充酶源，使
飼料中添加外源性消化酶的理論基礎
幼齡動物：幼齡畜禽消化系統發育不完善，消化酶，胃酸和消化液分泌不足，不能充分分解大分子營養物質，單胃動物（豬）和家禽（雞、鴨）不能消化非淀粉多糖。成年動物應激狀態下：動物處于應激狀態時，消化道內源酶分泌量降低，需要外源酶輔助作用予以補充。老齡動物（如老齡蛋雞、種雞等），消化機能降低，也需補充酶源，使
細胞消化的經驗總結
一、酶消化法1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25% 的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活
細胞消化的小技巧（二）
細胞消化小技巧不一定要一次把所有細胞都要消化下來！晃動培養盤并在顯微鏡下用肉眼觀察，只要70~80%細胞都收縮了或超過適合消化時間，就該終止消化反應，如果細胞量夠即可進行后續傳代或實驗步驟；如果細胞量不夠，則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細胞，再進行一次消化反應。▲ 消化不下來的細
細胞消化的小技巧（一）
每個做細胞實驗的人，不管去哪“浪”，心里都會有個牽掛：我的細胞過兩天要傳代！大部分組織細胞離體培養時，會以貼壁的形式生長（除了取自血、脾或骨髓的細胞）;完全培養基中的血清，含有許多帶陽性電荷的促細胞附著因子（層黏連蛋白?Laminine、纖維鏈接蛋白 Fibronectin 等胞外基質），能幫助細胞
細胞消化胰酶的配制
適用于，無師兄、師姐、非細心、單獨開展細胞培養的實驗者對一般細胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步驟：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl
細胞化學基礎β轉角
β-轉角是一種常見的蛋白質二級結構，它通常出現在球狀蛋白表面，因此含有極性和帶電荷的氨基酸殘基。
細胞化學基礎嘌呤
嘌呤（Purine），分子式C5H4N4，是一種雜環芳香有機化合物，是新陳代謝過程中的一種代謝物。
細胞化學基礎腺苷
腺苷，是指由腺嘌呤的N-9與D-核糖的C-1通過β糖苷鍵連接而成的化合物，化學式為C10H13N5O4，其磷酸酯為腺苷酸。腺苷是一種遍布人體細胞的內源性核苷，可直接進入心肌經磷酸化生成腺苷酸，參與心肌能量代謝，同時還參與擴張冠脈血管，增加血流量。腺苷對心血管系統和肌體的許多其它系統及組織均有生理作用
細胞化學基礎堿基
堿基，在化學中本是“堿性基團”的簡稱。有機物中大部分的堿性基團都含有氮原子，稱為含氮堿基，氨基（-NH2）是最簡單的含氮堿基。堿基，在生物化學中又稱核堿基、含氮堿基，是形成核苷的含氮化合物，核苷又是核苷酸的組分。堿基、核苷和核苷酸等單體構成了核酸的基本構件。核堿基間可以形成堿基對，且彼此堆疊，所以，
細胞化學基礎鋅指
鋅指是一種常出現在DNA結合蛋白質中的一種結構基元。鋅螯合在氨基酸鏈中形成鋅的指狀結構。鋅是某些酶的活性輔助因子，也是某些蛋白質，包括RNA聚合酶的轉錄因子，如TFIIIA(transcription factor III，Asubtype)、類固醇受體等能結合脫氧核糖核酸(DNA)的蛋白質亦含有鋅
細胞化學基礎α螺旋
α-螺旋（α-helix）是蛋白質二級結構的主要形式之一。指多肽鏈主鏈圍繞中心軸呈有規律的螺旋式上升，每3.6 個氨基酸殘基螺旋上升一圈，向上平移0.54nm，故螺距為0.54nm，兩個氨基酸殘基之間的距離為0.15nm。螺旋的方向為右手螺旋。氨基酸側鏈R基團伸向螺旋外側，每個肽鍵的肽鍵的羰基氧和第
細胞化學基礎核酶
科學家在研究RNA的轉錄后加工時發現某些RNA有催化活性，可以催化RNA的剪接，這些由活細胞合成、起催化作用的RNA稱為核酶。許多核酶的底物也是RNA，甚至就是其自身，其催化反應也具有專一性。已經闡明的天然核酶有錘頭狀核酶、發夾狀核酶、I型內含子、Ⅱ型內含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基轉移
細胞消化成團怎么回事
細胞消化成團個人認為是和消化酶有關，消化酶是否保存不當（主要為溫度）并且時間過長失去了消化活性（可以做酶活測定），或者酶的濃度配的不合適，在允許范圍（防止消化過度損傷細胞）內適當加大酶液量。以上是某f發表的一些淺見解。關于第二個有大量細胞脫落，我想是沒有做好及時的細胞傳代，細胞匯合80%（理想）就應