這些因素影響沉淀瓊脂擴散
瓊脂擴散試驗包括瓊脂雙向單擴散試驗和瓊脂雙向雙擴散試驗,后者是最常用的瓊脂擴散試驗,一般用于抗體或抗原的定性檢測,其原理是可溶性抗原與相應的抗體(抗血清)在瓊脂凝膠中向四周自由擴散,如果抗原和抗體相對應,則在二者比例適當處形成肉眼可見的白色沉淀線,反之則不會出現沉淀線。常用已知抗原檢測未知的血清樣本,也可用已知抗血清檢測未知抗原樣本。 1 瓊脂擴散試驗的影響因素 1.1 瓊脂板的制備 瓊脂板的質量、濃度、黏度、厚度、濕度等都會影響瓊脂擴散試驗的結果,瓊脂濃度越低,則孔徑越大,擴散速度也會越快;如果瓊脂濃度越大,那么瓊脂的黏度也會隨之增大,擴散速度會相對減慢,建議使用較好的瓊脂(瓊脂糖),最適濃度為1%,厚度約2.5毫米,注意倒熱融化瓊脂液時不要產生氣泡,而且空氣中的濕度很低,瓊脂中的水分容易蒸發,待瓊脂冷凝后加蓋,把平皿倒置,放在裝有濕紗布的搪瓷盤中,防止水分蒸發,保證濕度。 1.2 打孔 打孔是瓊脂擴散試驗中的關......閱讀全文
這些因素影響沉淀瓊脂擴散
瓊脂擴散試驗包括瓊脂雙向單擴散試驗和瓊脂雙向雙擴散試驗,后者是最常用的瓊脂擴散試驗,一般用于抗體或抗原的定性檢測,其原理是可溶性抗原與相應的抗體(抗血清)在瓊脂凝膠中向四周自由擴散,如果抗原和抗體相對應,則在二者比例適當處形成肉眼可見的白色沉淀線,反之則不會出現沉淀線。常用已知抗原檢測未知的血清
沉淀反應實驗:瓊脂擴散(agar-diffusion)實驗
瓊脂擴散實驗瓊脂擴散是抗原抗體在凝膠中所呈現的一種沉淀反應。抗體在含有電解質的瓊脂凝膠中相遇時,便出現可見的白色沉淀線。這種沉淀線是一組抗原抗體的特異性復合物。如果凝膠中有多種不同抗原抗體存在時,便依各自擴散速度的差異,在適當部位形成獨立的沉淀線,因此廣泛地用于抗原成分的分析。瓊脂擴散實驗可根據抗原
瓊脂擴散實驗——單向瓊脂擴散
實驗材料待檢血清試劑、試劑盒生理鹽水瓊脂粉儀器、耗材微量進樣器打孔器玻璃板濕盒實驗步驟1. ?將適當稀釋(事先滴定)的診斷血清與予溶化的2%瓊脂在60℃水浴預熱數分鐘后等量混合均勻制成免疫瓊脂板。2. ?在免疫瓊脂板上按一定距離(1.2~1.5厘米)打孔,見圖1。圖1 ?單向瓊脂擴散試驗抗原孔位置示
瓊脂擴散實驗——雙向瓊脂擴散
實驗材料待測血清試劑、試劑盒生理鹽水瓊脂粉儀器、耗材載玻片打孔器微量進樣器實驗步驟1. ?取一清潔載玻片,傾注3.5~4.0毫升加熱熔化的1%食鹽瓊脂制成瓊脂板。2. ?凝固后,用直徑3毫米打孔器,孔間距為5毫米。孔的排列方式如圖2所示。圖2 雙向瓊脂擴散原抗體孔位置示意圖3. ?用微量進樣器于中央
關于沉淀反應—單向瓊脂擴散(simple-agar-diffusion)-的介紹
單向瓊脂擴散(simple agar diffusion) 簡稱單擴,將特異性抗體與熔化的瓊脂混合均勻,使抗體均勻分布于瓊脂,然后澆制成瓊脂板,再按一定要求打孔并加入抗原,使抗原向孔周自由擴散,與板中的抗體形成沉淀圈。本法為定量試驗,沉淀圈的直徑與抗原濃度成正比。單擴常用于血清中免疫球蛋白、AF
關于沉淀反應—雙向瓊脂擴散(double-agar-diffusion)--的簡介
雙向瓊脂擴散(double agar diffusion) 簡稱雙擴,先制備瓊脂板,再按要求打孔并分別加入抗原和抗體,使兩者同時在瓊脂板上擴散,若兩者對應且比例合適,則在抗原和抗體兩孔之間形成白色沉淀線。一對相應的抗原抗體只形成一條沉淀線,因此可根據沉淀線的數目推斷待測抗原液中有多少種抗原成分;
瓊脂擴散實驗
實驗材料 待檢血清試劑、試劑盒 生理鹽水瓊脂粉儀器、耗材 微量進樣器打孔器玻璃板濕盒實驗步驟 1. ?將適當稀釋(事先滴定)的診斷血清與予溶化的2%瓊脂在60℃水浴預熱數分鐘后等量混合均勻制成免疫瓊脂板。2. ?在免疫瓊脂板上按一定距離(1.2~1.5厘米)打孔,見圖1。1~5孔加參考血清,6~7孔
影響瓊脂擴散試驗結果的因素有哪些
⑴配抗菌藥物原液前要清楚抗菌藥物原粉的百分含量、批號和生產廠家。 ⑵配制抗菌藥物原液時,可能會遇到抗菌藥物難溶的現象,這就要求用相應的助溶劑溶解。 ⑶抗菌藥物原液的終體積要用容量瓶定容。 ⑷單位的換算(如 強力霉素,含量887IU/mg,計算配制1280mg/mL 的強力霉素50毫升,需要多少克
單相瓊脂擴散試驗
原理一種定量試驗,將一定量的抗體混合于瓊脂內,傾注于玻片上,凝固后,在瓊脂層上打孔,再將抗原加入孔中,使其向四周擴散。抗原抗體復合物形成的沉淀環直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線,則未知標本中的抗原含量即可從標準曲線中求出。本試驗主要用于檢查標本中各種免疫球蛋白和血清Ig
瓊脂擴散試驗分類
1、單向瓊脂擴散試驗:是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。一定時間后,在兩者比例適當處形成白色沉淀環。沉淀環的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線,則從曲線
雙向瓊脂擴散實驗
一、原理雙向瓊脂擴散實驗,是將抗原和相應抗體分別加入同一凝膠板內的相鄰小孔中。兩者相互擴散,當擴散到他們的濃度比例合適的部位相遇時,就會形成抗原抗體復合物的沉淀。二、操作步驟1.取一塊干凈的玻璃板,用少量75%乙醇沖洗,晾干后置于水平臺,將1%瓊脂糖融化,56℃水浴中保溫。2.將瓊脂糖鋪于玻璃板上,
單向瓊脂擴散實驗
一、原理單向瓊脂擴散實驗又稱單向免疫擴散實驗。指可溶性抗原在相應抗體的瓊脂介質中的擴散,可定性、定量抗原。二、操作步驟?1.取一塊干凈的玻璃板,用少量75%乙醇沖洗,晾干后置于水平臺,將1%瓊脂糖融化,56℃水浴中保溫。2.取15ml瓊脂糖加到56℃預熱玻璃管中,加入約200微升抗血清,充分混勻后鋪
瓊脂擴散試驗檢查作用
瓊脂擴散試驗為可溶性抗原與相應抗體在含有電解質的半固體凝膠(瓊脂或瓊脂糖)中進行的一種沉淀試驗。增高,胎兒宮內感染,新生兒TORCH癥群,慢性或亞急性感染,瘧疾,傳染性單核細胞增多癥,支原體肺炎,肝病,結締組織疾病,巨球蛋白血癥,無癥狀性單克隆IgM病等。降低,遺傳性或獲得性抗體缺乏癥,混合性免
雙向瓊脂擴散的概念
中文名稱雙向瓊脂擴散英文名稱double immunodiffusion定 義將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由向四周擴散并相遇,在比例合適處形成沉淀線。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
瓊脂擴散試驗的概述
瓊脂擴散試驗為可溶性抗原與相應抗體在含有電解質的半固體凝膠(瓊脂或瓊脂糖)中進行的一種沉淀試驗。瓊脂在實驗中只起網架作用,含水量為99%,可溶性抗原與抗體在其間可以自由擴散,若抗原與抗體相對應,比例合適,在相遇處可形成白色沉淀線,是為陽性反應。沉淀線在凝膠中可長時間保持固定位置并可經染色后干燥保
雙向瓊脂擴散的定義
中文名稱雙向瓊脂擴散英文名稱double immunodiffusion定 義將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由向四周擴散并相遇,在比例合適處形成沉淀線。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
關于瓊脂擴散試驗的簡介
瓊脂擴散試驗為可溶性抗原與相應抗體在含有電解質的半固體凝膠(瓊脂或瓊脂糖)中進行的一種沉淀試驗。瓊脂在實驗中只起網架作用,含水量為99%,可溶性抗原與抗體在其間可以自由擴散,若抗原與抗體相對應,比例合適,在相遇處可形成白色沉淀線,是為陽性反應。沉淀線在凝膠中可長時間保持固定位置并可經染色后干燥保
雙向瓊脂擴散結果分析
雙向瓊脂擴散試驗常用于定性檢測,也可用于半定量檢測。 將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉淀線。根據有否出現沉淀線,可用已知的抗體鑒定未知的抗原,或用已知的抗原鑒定未知的抗體。 臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血
什么是單相瓊脂擴散試驗
單向瓊脂擴散試驗是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。一定時間后,在兩者比例適當處形成白色沉淀環。沉淀環的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線,則從曲線中可求
瓊脂擴散試驗(gel-diffusion-test)
可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。?(一)雙向瓊脂擴散試驗(Double?immunodiffusion?test)?抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者相對應,濃度比例合適,則經一定時間后,在
瓊脂擴散試驗(單向和雙向)
實驗概要可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴散試驗的操作流程。單向瓊脂擴散試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量;雙向瓊脂擴散試驗可用來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份,并用以
單相瓊脂擴散試驗的原理
一種定量試驗,將一定量的抗體混合于瓊脂內,傾注于玻片上,凝固后,在瓊脂層上打孔,再將抗原 加入孔中,使其向四周擴散。抗原抗體復合物形成的沉淀環直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線,則未知標本中的抗原含量即可從標準曲線中求出。本試驗主要用于檢查標本中各種免疫球蛋白和血清I
瓊脂擴散試驗(單向和雙向)
實驗概要可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴散試驗的操作流程。單向瓊脂擴散試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量;雙向瓊脂擴散試驗可用來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份,并用以
單相瓊脂擴散試驗的相關介紹
單向瓊脂擴散試驗是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。一定時間后,在兩者比例適當處形成白色沉淀環。沉淀環的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線,則從曲線中可求
簡述單相瓊脂擴散試驗的內容
一、檢查過程 在含有特異抗體的瓊脂板中打孔,并在孔中加入定量的抗原,當抗原向周圍擴散后與瓊脂中抗體相結合,即形成白色沉淀環,其直徑或面積與抗原濃度呈正相關。同時用標準抗原或國際參考蛋白制成標準曲線,即可用以定量檢測未知標本的抗原濃度(mg/ml 或U/ml)。 二、不適宜人群 1、服用過避
瓊脂擴散試驗的檢查過程
雙向瓊脂擴散試驗是在含有電解質的半固體瓊脂板上,將可溶性抗原和抗體分別加入具有一定距離和孔徑的小孔內,使其在一定條件下相互擴散,兩者在比例合適處相遇,形成白色沉淀線(帶)。當存在多種抗原抗體系統時可出現多條沉淀線,然后可根據沉淀線的數目、位置、形狀對抗原抗體系統進行分析。單向瓊脂擴散又稱單向環狀
瓊脂擴散試驗的類型有哪些?
(一)雙向瓊脂擴散試驗(Double immunodiffusion test) 抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者相對應,濃度比例合適,則經一定時間后,在抗原、抗體孔之間出現清晰致密的白色沉淀線。每一抗原與其相對應抗體只能形成一條沉淀線,若同時含有若干對抗原抗體系
瓊脂擴散試驗的注意事項
不合宜人群:無特殊要求。 檢查時的禁忌:禁忌暴飲暴食,和劇烈運動,適宜在早晨空腹檢測。 檢查時要求:試驗前應做預試驗,確定抗體的稀釋度。加樣時不要將瓊脂劃破,以免影響沉淀線的形成。加樣時不同濃度抗體和抗原不要混淆,影響試驗結果。
雙向瓊脂擴散試驗(Double-immunodiffusion-test)
可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。雙向瓊脂擴散試驗(Double?immunodiffusion?test)?抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者相對應,濃度比例合適,則經一定時間后,在抗原、抗體孔之間出現清晰致密的白色沉淀線。
瓊脂擴散試驗的臨床意義
異常結果:增高,胎兒宮內感染,新生兒TORCH癥群,慢性或亞急性感染,瘧疾,傳染性單核細胞增多癥,支原體肺炎,肝病,結締組織疾病,巨球蛋白血癥,無癥狀性單克隆IgM病等。降低,遺傳性或獲得性抗體缺乏癥,混合性免疫缺陷綜合癥,選擇性IgM缺乏癥,蛋白丟失性腸病,燒傷,抗Ig抗體綜合癥(混合性冷球蛋