冰凍切片的原位雜交實驗
實驗材料 冰凍切片試劑、試劑盒 Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl儀器、耗材 加濕盒水浴鍋培養箱實驗步驟 1. 從冰箱中取出載玻片，平衡至室溫，再打開玻片盒。置載玻片于架中，浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl（pH7.5）/5 mmol/l EDTA所配的鏈霉蛋白酶液中，放10 min。 2. 室溫下將載玻片浸于含2 mg/ml 甘氨酸的PBS中30 s，然后再于PBS中浸2次，毎次30 s。 3. 浸載玻片于新配的TEA緩沖液中5 min。 4. 在一個燒杯中，配足量TEA緩沖液以沒過載玻片。加乙酸肝至終濃度0.25%，迅速倒在載玻片上，晃動玻片架使液體充分混合，放置10 min。5. 在2×SSC中洗載玻片2次，每次5 min。 6. 按順序經30%、60%、80%、......閱讀全文
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片是不需要固定的,冰凍切片新鮮取材后，應立刻放入冰凍切片機內切片。如不能立即切片，要放入液氮中速凍，然后放在-70度低溫冰箱內長期保存抗原性不會丟失。在手術臺上取下的組織放到冷凍機里面-20度左右凍成硬塊,制成切片用于快速診斷,該診斷僅作參考,應以石蠟診斷為主。
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片組織可先固定后凍存，也可直接凍存，直接凍存一般采取液氮中速凍，然后轉入-20度保存，凍存組織應避免反復凍融，且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉)，影響形態學觀察。
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片組織可先固定后凍存，也可直接凍存，直接凍存一般采取液氮中速凍，然后轉入-20度保存，凍存組織應避免反復凍融，且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉)，影響形態學觀察。
徠卡冰凍式切片機切片制樣方法
電鏡樣品制備技術直接影響樣品的結構和反差。制備高質量的超薄切片，是發揮透?射電子顯微鏡優良性能的前提。透射電子顯微鏡的分辨率理論上可達到o．3nm左右，?但是六于樣品制備技術的限制，分辨率很難達到理論值。對于生物樣品來說，一般只能?達到2nm的水平。?高質量的超薄切片基本特征：①樣品應該能耐受電子束
微生物實驗冰凍切片的方法及注意事項
一、實驗前準備⒈清理實驗臺及儀器⒉開啟冷凍切片機并將冷凍切片機預降至所需溫度（- 15~-20 ℃*）⒊準備好處理好的載玻片、刀片、膠水以及藥品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鮮組織，用干紗布或濾紙擦干后不需固定直接取材（24×24×2mm*）,以防形成冰晶造成切片中形成形狀不一的空泡,使細胞內結構
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的，具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求，冰凍片要求較高（低溫環境，液氮，冰凍切片機，OCT包埋劑等等），石蠟片的制作就比較簡單，試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話，一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話，都可以的，冰凍切片比較容
冰凍切片的制作技巧及心得（一）
下面發一個有關冰凍切片制作的資料，來自于國外病理醫生的經驗和心得，現翻譯過來供大家參考，歡迎提出不同的見解。冰凍切片技術1.從鋒利的刀片開始我發現使用新的鋒利的刀片時常常做出高質量的片子。我覺得在醫療場合中某些盡量省錢的做法顯得有些因小失大。一般我對每位患者的標本都使用一組新的刀片，當片子的質量開始
半薄冰凍切片光學顯微鏡的使用
半薄的部分，可從cryoprotected生物材料的冷凍塊切片在-90 ° C。??光學顯微鏡的使用這些路段的優點是subcellullar形態保存和改進的光學分辨率 。? 化學固定的生物材料是cryoprotected浸泡在2.3米，蔗糖和浸泡在液氮中冷凍到標本引腳 。? 切片是執行與調整，切較厚
腦組織冰凍切片的步驟和注意事項
1.固定。大鼠或小鼠灌注取腦，取腦后用多聚甲醛浸泡固定，即能達到沖洗的目的，又不損害組織。2.脫水。先后用15%，20%，30%的PB蔗糖溶液 進行腦組織梯度脫水，腦組織沉下去就是脫水好了。3.冰凍切片，推薦瑞沃德冷凍切片機。取出腦組織，用OCT膠包埋，一層層的包埋，注意:不能有氣泡，否則營銷切片；
免疫熒光操作步驟（漂片，冰凍切片）
實驗概要免疫熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定
免疫熒光操作步驟（漂片，冰凍切片）
實驗概要免疫熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定
冰凍切片包埋劑及使用方法
冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，目前已廣泛用于免疫組化實驗室中，其用途是在冰凍切片時支撐組織，以增加組織的連續性，減少皺折及碎裂。又因OCT?混合物為水溶性，故在漂片時可溶于水，所以在以后的染色中不會增加背景染色。利用OCT?混合物（opti-mum?cutting?tempe
徠卡冰凍切片機復型膜的分離與撈取
徠卡冷凍超薄切片是把預先冷凍的樣品在冷凍條件下制備超薄切片的方法。冷凍超薄切片的目的是為了避免常規樣品制備過程個脫水、包埋等步驟，因為這些步驟中的化學和物理因素常常導致細胞的變化，如大分子的變性，抗原或酶活性的喪失，可溶性成份的移位乃至流失。?下面是徠卡冷凍超薄切片法的主要步驟。?一、包裹?1、在一
冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑盒使用說明
主要用途YIJI冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑是一種旨在使用蘇木素和伊紅染料分別對組織細胞核和細胞漿進行染色，以觀察冰凍組織切片中組織細胞結構的權威而經典的廣譜染色技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。優化了Harris和Mayer方法。適用于各種冰凍組織切片，包括各種生理和病理組織切片。產品嚴
生命科學拉曼測試樣品制備篇—冰凍切片
拉曼光譜是一種無損、無標記、非接觸式的的分析檢測方法，可以為生命科學/醫學研究領域的樣品提供豐富的分子層面的信息。生命科學/醫學研究樣品有許多不同的處理和保存方法，本系列教程將介紹如何對生命科學/醫學研究樣品進行處理及不同處理方法如何進行拉曼測試準備。 冰凍切片 取材 取新鮮組織進行固定或
冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑盒使用說明
冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 YIJI冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑是一種旨在使用蘇木素和伊紅染料分別對組織細胞核和細胞漿進行染色，以觀察冰凍組織切片中組織細胞結構的權威而經典的廣譜染色技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。優化了Harris和May
冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine－T）熒...
冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）熒光染色試劑盒使用說明主要用途YIJI冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）熒光染色試劑是一種旨在使用硫磺素T染色技術，與淀粉樣蛋白結合，來分析冰凍組織切片中蘋果綠熒光現象的權威而經典的
核酸探針標記及原位雜交3
3.注意事項（1）避光下準備反應體系：由于光敏生物素醋酸鹽對光敏感，應避免光照。在分裝試劑及核酸與光敏生物素混合時應在暗室安全燈下操作。（2）核酸純度：由于光敏生物素能與任何有機物反應，因此用做標記探針的核酸要高度純化。用作標記探針的核酸最好不用Tris溶液溶解，Tris中所含氨基會干擾標記。（3）
原位雜交儀—原位雜交實驗（三）
原位雜交第三天 1） 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，最后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
原位雜交儀—原位雜交實驗（二）
原位雜交第二天 1. 1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。 3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。 4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。
冰凍切片神經元高爾基法染色試劑盒使用說明
冰凍切片神經元高爾基法染色試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 YIJI冰凍切片神經元高爾基法染色試劑是一種旨在使用親銀還原技術，分析固定處理的冰凍組織切片中神經元（neuron）、錐體細胞（pyramidal cell）、膠質細胞（glia cell）、少突觸膠質細胞（oligod
冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑盒使用說明
冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑是一種旨在使用人工電子受體染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅藍（MTT），受到NADH心肌黃酶催化還原，產生不溶性藍黑色色素沉淀，來分析冰凍組織樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術
冰凍切片膠原纖維（SIRIUS－RED）染色試劑盒使用說明
冰凍切片膠原纖維（SIRIUS RED）染色試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 YIJI冰凍切片膠原纖維（SIRIUS RED）染色試劑是一種旨在使用天狼猩紅染料，分析和區分存檔中的冰凍切片組織中的膠原纖維（collagen fiber）的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳
冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑盒使用說明
主要用途冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑是一種旨在使用人工電子受體染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅藍（MTT），受到NADH心肌黃酶催化還原，產生不溶性藍黑色色素沉淀，來分析冰凍組織樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。主要適用于動物組織細胞的心肌黃酶活性定性
冰凍切片膠原纖維（SIRIUS－RED）染色試劑盒使用說明
主要用途YIJI冰凍切片膠原纖維（SIRIUS RED）染色試劑是一種旨在使用天狼猩紅染料，分析和區分存檔中的冰凍切片組織中的膠原纖維（collagen fiber）的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。主要適用于膠原蛋白的分析。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷
冰凍切片神經元高爾基法染色試劑盒使用說明
主要用途YIJI冰凍切片神經元高爾基法染色試劑是一種旨在使用親銀還原技術，分析固定處理的冰凍組織切片中神經元（neuron）、錐體細胞（pyramidal cell）、膠質細胞（glia cell）、少突觸膠質細胞（oligodendrocyte）和其它突起（process）尤其樹突（den
CompresstomeTM應用II－基因功能研究：組織學連續切片
關鍵詞：組織學（Histology）, 基因功能（Gene Function）, 免疫組織化學（Immunohistochemistry）, 連續切片（Serial Sections）,振動切片機（Vibratome） 在基因功能的研究中，為了研究某種基因的功能或基因調控網絡時需要同時在一個動物上對
FISH熒光原位雜交實驗（原位雜交）
1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法，熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一門新興的分子細胞遺
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于：（1）動植物基因組結構研究；（2）染色體精細結構變異分析；（3）病毒感染分析；（4）腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
熒光原位雜交實驗
實驗方法原理 熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一門新興的分子細胞遺傳學技術，是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變