RNASI核酸酶作圖
實驗材料 [γ-32P」ATP合適的寡核苷酸DNA 模板l10XdNTP 混合物KLenow 片段合適的限 制性內切核酸酶X 射線膠片洗脫緩沖液tRNA 石蠟油S1 核酸酶試劑、試劑盒 10X 激酶緩沖液PNK10X 復性緩沖液6% 聚丙烯酰胺 8mol L 尿素溶液 (溶于 0.5XTBE) 及甲酰胺染料乙酸鈉4X 雜交緩沖液去離子甲酰胺S1 緩沖液S1 終止緩沖液異丙醇儀器、耗材 垂直電泳裝置 水浴 雜交管 雜交爐實驗步驟 一、材料與設備1) 垂直電泳裝置2) 水浴3) 雜交管4) 雜交爐5) 用于從單鏈 DNA 模板制備單鏈 DNA 探針的試劑。①10X 激酶緩沖液:400 mmol/LTris-HCl(pH7.8),100 mmol/LMgCL2,1OOmmol/L 疏基乙醇,250 ug/ml 牛血淸白蛋白儲存于 -20℃ ②[γ-32P」ATP(比活度 3000Ci/mmol)③合適的寡核苷酸:溶于蒸餾水......閱讀全文
RNA-SI-核酸酶作圖
實驗材料 [γ-32P」ATP合適的寡核苷酸DNA 模板l10XdNTP 混合物KLenow 片段合適的限 制性內切核酸酶X 射線膠片洗脫緩沖液tRNA 石蠟油S1 核酸酶試劑、試劑盒 10X 激酶緩沖液PNK10X 復性緩沖液6% 聚丙烯酰胺 8mol L 尿素溶液 (溶于 0.5XTBE) 及甲
RNA-SI-核酸酶作圖
? ? ? ? ? ? 實驗材料 [γ-32P」ATP 合適的寡核苷酸 DNA 模板l 10XdNTP 混合物 KLenow 片段 合適的限 制性內切核酸酶
5.5-RNA-SI-核酸酶作圖
SI 核酸酶是種內切酶,它是從米曲霉米曲霉 (Aspergillusoryzae) 中分離得到。它能降解單鏈核酸,卻不能降解雙鏈核酸。此外,它能高靈敏度地降解局部錯配的雙鏈分子,即使只有一對堿基錯配,也能因 S1 核酸酶的切割而被檢測出來。用 S1 核酸酶來識別和切割錯配或未復性的區域,再通過變性內
用S1核酸酶對RNA作圖
三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。當檢測 RNA 被雜交到 DNA 模板上時,用核酸酶 S1 進行保護試驗的分析;當檢測 RNA 被雜交
用S1核酸酶對RNA作圖
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。當檢測 RNA 被雜交到
用S1核酸酶對RNA作圖
實驗方法原理?三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。當檢測 RNA 被雜交到 DNA 模板上時,用核酸酶 S1 進行保護試驗的分析;
SI核酸酶特性和用途
這是一種從米曲霉(Aspergillus oryzae)中分離的高度單鏈特異的外切酶。活性:可以降解單鏈DNA或RNA或雙鏈的單鏈區。其主要用途有:1. 在cDNA合成過程中,切開cDNA的發夾末端;2. 載體構建過程中,切去DNA片段的單鏈尾巴,形成平末端結構。
用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖
核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理核糖核酸酶保護分析用于度量特
什么是RNA作圖?
中文名稱RNA作圖英文名稱RNA mapping定 義對RNA分子在基因上的定位分析。將RNA與相應的DNA雜交后,用單鏈特異性核酸酶(常用的如S1核酸酶)切去不發生雜交的單鏈部分,用以分析RNA與相應DNA的關系,包括確定RNA的5′和3′端、外顯子和內含子在DNA上的相應位置等。應用學科生物化
S1核酸酶作圖的方法和原理
三種不同的核酸酶——S1核酸酶、RNA酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行RNA定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的DNA模板上的mRNA 5′端和3′端的位置。當檢測RNA被雜交到DNA模板上時,用核酸酶S1進行保護試驗的分析;當檢測RNA被雜交到來自DNA模板的RNA上時用RNA酶。外切核酸酶Ⅶ有更
核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記RNA探針)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。
核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針...
核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖)實驗方法原理 核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,然后未雜交的序列被一種或幾種單鏈特異性的核糖核酸酶裂解。實驗材料
DNA作圖實驗
實驗材料?DNA試劑、試劑盒?限制酶緩沖液儀器、耗材?電泳儀實驗步驟 ? 用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。2.? 從每個反應取小份樣品作電泳分析,用已知的分子量標準作對照。剩余的樣品置于冰浴。3.? 比較分子量標準估算出DNA片段的長度,推導出每種限制性內切酶的酶切位點數目。4.?
DNA作圖實驗
多種酶消化 限制酶部分消化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。
什么是轉錄作圖?
中文名稱轉錄作圖英文名稱transcription mapping定 義標明轉錄物序列在基因組上的位置。應用學科遺傳學(一級學科),基因組學(二級學科)
什么是基因作圖?
基因作圖(英文gene mapping)是一種遺傳學作圖,用來定位染色體中特定的DNA片段。是基因組研究的成果之一,主要分為以重組率為定位依據的遺傳輿圖,以及以DNA片段實際位置為依據的物理輿圖,兩這各有不同用途與優缺點。
糖作圖的概念
中文名稱糖作圖英文名稱carbohydrate mapping定 義利用各種分析方法(如層析、電泳、質譜、核磁共振等)研究糖的組成時所得到結果的圖示化。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
粒度分析的作圖
粒度分析的結果,可按表6-3所示的格式整理,然后作出直方圖、頻率曲線圖、累積曲線圖和概率累積曲線圖(圖6-5,圖6-6)。圖的橫坐標表示顆粒大小,縱坐標表示百分數或累積百分數。直方圖是廣泛使用的一種粒度分布的圖解形式,以并排高低不同的矩形表示各粒級百分比。如果把每個矩形頂連點連接成一平滑曲線,即成頻
應用Daudi細胞研究核糖核酸酶P的M1RNA
探討抗MHC-Ⅱ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P對Daudi細胞表面MHC-Ⅱ類分子表達的抑制作用. M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位.以pTK117質粒為模板,PCR擴增帶有抗CⅡTA第452及629位點的引導序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),
應用Daudi細胞研究核糖核酸酶P的M1RNA
探討抗MHC-Ⅱ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P對Daudi細胞表面MHC-Ⅱ類分子表達的抑制作用.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位.以pTK117質粒為模板,PCR擴增帶有抗CⅡTA第452及629位點的引導序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),再分別插
應用Jurkat細胞研究核糖核酸酶P的M1RNA
探討抗MHCⅡ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細胞表面MHCⅡ類分子的表達. M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位,設計并克隆針對CⅡTA第3408位點的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相應的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分別插入pUC19、pGEM-7
應用Jurkat細胞研究核糖核酸酶P的M1RNA
探討抗MHCⅡ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細胞表面MHCⅡ類分子的表達.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位,設計并克隆針對CⅡTA第3408位點的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相應的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分別插入pUC19、pGEM-7zf(+
新SI到底改變了什么?國際計量資深專家談SI修訂
11月13至16日,由國際計量局(BIPM)組織的第26屆國際計量大會(CGPM)將在法國凡爾賽召開。大會最終日將對“修訂國際單位制(SI)”的1號決議進行表決。來自世界六十多個國家的測量科學家將共同到現場見證此次表決。如果決議被通過,7個SI基本單位中的4個將改由自然常數來定義,并于2019年
應用Jurkat細胞研究核糖核酸酶P的M1RNA介紹
探討抗MHCⅡ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細胞表面MHCⅡ類分子的表達.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位,設計并克隆針對CⅡTA第3408位點的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相應的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分別插入pUC19、pGEM-7zf(+
應用Daudi細胞研究核糖核酸酶P的M1RNA介紹
探討抗MHC-Ⅱ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P對Daudi細胞表面MHC-Ⅱ類分子表達的抑制作用.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位.以pTK117質粒為模板,PCR擴增帶有抗CⅡTA第452及629位點的引導序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),再分別插
基因作圖的方法特點
基因作圖(英文gene mapping)是一種遺傳學作圖,用來定位染色體中特定的DNA片段。是基因組研究的成果之一,主要分為以重組率為定位依據的遺傳輿圖,以及以DNA片段實際位置為依據的物理輿圖,兩這各有不同用途與優缺點。
希爾作圖法的用途
中文名稱希爾作圖法英文名稱Hill plotting定 義對希爾方程的數據圖解表示法,可用于酶動力學、蛋白質與配體結合等分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
核糖核酸酶T1的基本信息介紹
核糖核酸酶T1(RNase T1)來源于米曲霉(Aspergillus orjzae),它特異地作用于鳥嘌呤3’端磷酸,切割位點在鳥嘌呤的3’磷酸和相鄰核苷酸的5‘羥基之問的磷酸二酯鍵,反應終產物為3’鳥苷酸和末端帶3’鳥苷酸的寡核苷酸片段。RNaseTl的反應條件極廣,且極難失活,其催化活性類
核糖核酸酶的基本分類
(一)核糖核酸酶A核糖核酸酶A(RNase A)來源于牛胰臟,是一種內切核糖核酸酶,可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端,切割胞嘧啶或尿嘧啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵,反應終產物是3’嘧啶核苷酸和末端帶3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。無輔助因子及二價陽離子存在時,核糖核酸酶A的作用可以被胎盤RNA酶抑制劑
核糖核酸酶的分類
(一)核糖核酸酶A核糖核酸酶A(RNase A)來源于牛胰臟,是一種內切核糖核酸酶,可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端,切割胞嘧啶或尿嘧啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵,反應終產物是3’嘧啶核苷酸和末端帶3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。無輔助因子及二價陽離子存在時,核糖核酸酶A的作用可以被胎盤RNA酶抑制劑