聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在實驗中,電泳凝膠分為兩層:上層膠為低濃度的大孔膠,稱為濃縮膠或成層膠,配制此層膠的緩沖液是Tris-HCl,pH6.7;下層膠則是高濃度的小孔膠,稱為分離膠或電泳膠,成膠的緩沖液是Tris-HCl,pH8.9。電泳槽中的電極緩沖液則是Tris-甘氨酸,pH8.3。可見,凝膠濃度、成膠成分、pH與電泳液緩沖系統各不相同,形成了一個不連續系統。電泳時,蛋白質樣品放置在濃縮膠上,為防止蛋白質樣品在電極緩沖液中擴散,因而加入等體積的40%蔗糖或50%甘油與之混合,以提高密度;為觀察蛋白質樣品泳動的情況,樣品中還加入溴酚藍等示蹤染料,......閱讀全文
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度
由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成「連續系統」和「不連續系統」兩種電泳系統。「不連續系統」最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及 pH 不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH 也不相同
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度
(一)原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不
聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度
一)原? 理?由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(二)
(三)操作方法1.安裝夾心式垂直板電泳槽夾心式垂直板電泳槽操作簡單,不易滲漏。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽,兩個電極槽中間夾有一個凝膠模,該模由一個上框形凝膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板(梳子)所組成。電泳槽由上儲槽(白金電極在上或面對短玻璃板),下儲槽(白金電極在下或面對長玻璃板)和回紋狀
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(二)
(三)操作方法1.安裝夾心式垂直板電泳槽夾心式垂直板電泳槽操作簡單,不易滲漏。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽,兩個電極槽中間夾有一個凝膠模,該模由一個上框形凝膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板(梳子)所組成。電泳槽由上儲槽(白金電極在上或面對短玻璃板),下儲槽(白金電極在下或面對長玻璃板)和回紋狀
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度1
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度2
③ 分析純過硫酸胺(AP)(AR) 0.14g加重蒸水至100ml,置棕色瓶,4℃儲存僅能用一周,最好當天配制。上述3種試劑用于制備分離膠。④ 濃縮膠緩沖液:稱取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,調pH6.7,用重蒸水定容至100ml,
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(二)
(三)操作方法1.安裝夾心式垂直板電泳槽夾心式垂直板電泳槽操作簡單,不易滲漏。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽,兩個電極槽中間夾有一個凝膠模,該模由一個上框形凝膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板(梳子)所組成。電泳槽由上儲槽(白金電極在上或面對短玻璃板),下儲槽(白金電極在下或面對長玻璃板)和回紋狀
聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度3
3.制備凝膠板不連續體系采用不同孔徑及pH的分離膠與濃縮膠 ,凝膠制備應分2步進行。① 分離膠的制備:根據實驗要求,選擇最終丙烯酰胺的濃度,本實驗需20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液,其加膠方式不同于連續系統。混合后的凝膠溶液,用細長頭的滴管加至長、短玻璃板間的窄縫內,加膠高度距樣品模板
聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度2
④ 濃縮膠緩沖液:稱取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,調pH6.7,用重蒸水定容至100ml,置棕色瓶內,4℃貯存。⑤ 濃縮膠貯液:稱Acr10g,Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml,過濾后置棕色瓶內,4℃貯存。⑥ 40%
聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度1
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度3
4.加樣作為分析用的PAGE加樣量僅需幾微克,2-3ul血清電泳后就能分出幾十條蛋白區帶。為防止樣品擴散,應在樣品中加入等體積40%蔗糖(內含少許溴酚蘭)。用微量注射器取5ul上述混合液,通過緩沖液,小心地將樣品加到凝膠凹形樣品槽底部,待所有凹形樣品槽內都加了樣品,即可開始電泳。5.電泳將直流穩壓電
蛋白質技術專題:聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不
蛋白質技術專題:聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度
由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在
銅純度的鑒定方法
原子吸收法。用原子吸收火花光譜直讀儀,很準的,而且很快。在分析天平上稱重0.1000g放在燒杯里面,然后加20ml王水,放在電爐上溶完全,配到比色管里面直接就可以拿到儀器上去看了。不過高純度的還是要用容量法才可以。硫代硫酸納滴定,具體方法不好說。你還是拿到專門的化驗機構去化驗吧。
慧眼識金丨純度計量助力黃金純度鑒定
黃金具有重要的貨幣屬性及裝飾與保值功能,在人類幾千年的歷史中始終是財富和華貴的象征。黃金相關國家標準對雜質元素規定了明確的限量,例如,《金條》(GB/T 26021)對銀(Ag)、銅(Cu)等十余種雜質元素進行了限量,《高純金》(GB/T 25933)規定了更多雜質(21種)的限量要求。由于黃金
化合物純度的鑒定方法
TLC純度的鑒定:1 展開溶劑的選擇,不只是至少需要3種不同極性展開系統展開,是首先要選擇三種分子間作用力不同的溶劑系統,如氯仿\甲醇,環己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分別展開來確定組分是否為單一斑點。這樣做的好處是很明顯的,通過組份間的各種差別將組分分開,有可能幾個相似組份在一種溶劑系統中是單
化合物純度的鑒定方法
TLC純度的鑒定:1 展開溶劑的選擇,不只是至少需要3種不同極性展開系統展開,是首先要選擇三種分子間作用力不同的溶劑系統,如氯仿\甲醇,環己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分別展開來確定組分是否為單一斑點。這樣做的好處是很明顯的,通過組份間的各種差別將組分分開,有可能幾個相似組份在一種溶劑系統中是單
核酸鑒定方法之濃度/純度及完整性鑒定
核酸純化在分子生物學實驗室已經廣泛應用。怎樣獲得高質量、高純度的DNA或RNA樣品對下游實驗的順利進行至關重要,因此,對純化后的核酸進行鑒定也是必不可少的步驟。本文簡單的回顧學習一下核酸鑒定的方法。核酸鑒定包括:濃度/純度鑒定+完整性鑒定 1.濃度/純度鑒定 (1)紫外分光光度計:原理:由于核酸中的
溶菌酶純度鑒定與分子量測定
一、實驗目的和內容目的:1. 通過本次實驗的學習與操作,使學生在實驗過程更好的理解SDS-聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)測定蛋白質純度與分子量的原理與依據;2. 要求學生掌握電泳原理以及SDS-PAGE垂直板電泳分離蛋白質技術;3. 熟悉垂直板電泳操作原理和方法,凝膠染色與脫色方法,凝膠圖譜的繪制與計算
蛋白質純度鑒定的方法有哪些
電泳,蛋白質電泳 現在常用就是 SDS 聚丙乙烯酰胺凝膠電泳特點1)靈敏度高 2)測定快速、簡便 3)干擾物質少液相色譜高效液相色譜是完全可以純化蛋白質并且進行蛋白質純度鑒定的但建議還是使用蛋白質電泳 最主流 最有效的方法
玉米種子純度鑒定試劑配制方法
一、 電極緩沖液 稱取甘氨酸6.00g,倒入2000ml燒杯中,加入約1800ml去離子水溶解,用2.0ml左右乳酸調至pH3.3,加去離子水定容至2000 ml,混勻。 二、 樣品提取液 稱取氯化鈉5.80g,蔗糖200g,甲基綠0.15g,倒入1000ml燒杯中,加去離子水約800ml溶解,加熱
農作物種子純度鑒定方法綜述3
4分子標記鑒定法廣義的分子標記是指可遺傳的并可檢測的DNA序列或蛋白質。蛋白質標記包括種子貯藏蛋白和同工酶(指由一個以上基因位點編碼的酶的不同分子形式)及等位酶(指由同一基因位點的不同等位基因編碼的酶的不同分子形式)。狹義的分子標記概念只是指DNA標記,而這個界定現在被廣泛采納。由于DNA分子中堿基
農作物種子純度鑒定方法綜述4
4.2 SSR(Simple sequence repeat,簡單序列重復標記)由Moore等于1991年創立。SSR即微衛星DNA,是一類由幾個(多為1~5個)堿基組成的基序(motif)串聯重復而成的DNA串聯重復序列,其長度一般較短,廣泛分布于基因組的不同位置,如(cA)n、(AT)n、(GG
農作物種子純度鑒定方法綜述2
2物理化學鑒定通 過物理化學方法是通過種子在某些特殊的化學藥劑中產生特定的反應,測定種子的生理生化指標以鑒定品種純度。如熒光掃描分析法、苯酚染色法、愈創木酚法等。物理鑒定法,可根據不同品種種子和幼苗含有熒光物質的差異進行鑒定。如利用紫外光處理燕麥種子可產生熒光,根據熒光的有無或強弱可區分不同品種。化
農作物種子純度鑒定方法綜述1
農作物種子純度鑒定方法綜述王從彥 胡穎 郭二輝 田朝陽 李曉慧(河南農業大學生命科學學院 河南農業科學院園藝所)高產、優質、抗病的優良品種是農業增產農民增收的前提。然而種子質量的優劣是品種特征特性能否充分發揮的關鍵,而種子純度則是種子質量的重要指標。生物學種子純度(genetic purity of
紫外可見分光光度計純度鑒定
用紫外吸收光譜確定試樣的純度是比較方便的。 如蛋白質與核酸的純度分析中,可用A280/A260或A230/A260的比值,鑒定其純度。 蛋白質濃度 = 1552×A280-757.3×A260 (ug/ml) DNA濃度 = 62.9×A260-36.0×A280 (ug/ml) 蛋白