知識分享:AAV在肺部的應用
腺相關病毒(AAV)屬于依賴病毒屬,細小病毒亞科,是一類自然缺陷的單鏈DNA病毒。野生型AAV基因組約4.7kb,含有rep和cap基因以及兩端的ITR序列。盡管人類對AAV易感,但臨床還并未發現與AAV相關的疾病。根據AAV衣殼蛋白基因的變異,可將AAV分為不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同的組織特異性。將興趣基因取代rep和cap基因構建一個兩段帶有ITR的載體,并將rep和cap置于一個獨立的載體上,加上帶有腺病毒輔助基因載體,便可包裝出帶有興趣基因的重組腺相關病毒(rAAV)。 目前rAAV已被廣泛作為基因轉導載體使用,rAAV在人體實驗中的安全性也已被證實。早在1996年,科學家們就選擇肺作為rAAV的第一個靶向實驗器官。下面我們旨在介紹rAAV在肺部實驗中的啟動子、血清型的選擇,及其小鼠肺部的AAV注射方法。 啟動子的選擇 根據不同的注射方式和實驗目的,可選擇不同的啟動子以提高肺部表達效率。CMV在......閱讀全文
知識分享:AAV在肺部的應用
腺相關病毒(AAV)屬于依賴病毒屬,細小病毒亞科,是一類自然缺陷的單鏈DNA病毒。野生型AAV基因組約4.7kb,含有rep和cap基因以及兩端的ITR序列。盡管人類對AAV易感,但臨床還并未發現與AAV相關的疾病。根據AAV衣殼蛋白基因的變異,可將AAV分為不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
AAV在肺部的應用
腺相關病毒(AAV)屬于依賴病毒屬,細小病毒亞科,是一類自然缺陷的單鏈DNA病毒。野生型AAV基因組約4.7kb,含有rep和cap基因以及兩端的ITR序列。盡管人類對AAV易感,但臨床還并未發現與AAV相關的疾病。根據AAV衣殼蛋白基因的變異,可將AAV分為不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
腺相關病毒(AAV)在動物實驗中的應用
腺相關病毒屬于微小病毒科 (parvovirus),為無包膜的單鏈線狀 DNA 病毒,基因組大小約 4.7 kb。利用腺相關病毒可以將外源基因轉入動物組織和細胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范圍廣、表達穩定等多種優點,廣泛應用于動物體內研究。 腺相關病毒血清型眾多(12種),不同血清型
腺相關病毒(AAV)在動物實驗中的應用
腺相關病毒屬于微小病毒科 (parvovirus),為無包膜的單鏈線狀 DNA 病毒,基因組大小約 4.7 kb。利用腺相關病毒可以將外源基因轉入動物組織和細胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范圍廣、表達穩定等多種優點,廣泛應用于動物體內研究。 腺相關病毒血清型眾多(12種),不同血清型
關于工業內窺鏡應用領域知識分享
工業內窺鏡隨著科學技術的不斷發展,在各行業應用的頻率越來越高,根據技術及應用范圍的不同分為電子工業內窺鏡、管道內窺鏡、工業電子內窺鏡等,下面給大家具體講一講工業內窺鏡的應用領域。 一、發電廠 用于核電站、風力電廠、水力發電廠、火力電廠以及電力建設單位的設備檢測, 如對渦輪機、管道、
腺相關病毒(AAV)在動物實驗中的應用(一)
腺相關病毒屬于微小病毒科 (parvovirus),為無包膜的單鏈線狀 DNA 病毒,基因組大小約 4.7 kb。利用腺相關病毒可以將外源基因轉入動物組織和細胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范圍廣、表達穩定等多種優點,廣泛應用于動物體內研究。腺相關病毒血清型眾多(12種),不同血清型對不同組織親
腺相關病毒(AAV)在動物實驗中的應用(二)
三、肝臟AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8,其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常選擇門靜脈、外周靜脈和尾靜脈。注射病毒滴度一般選擇 8×10^10-2×10^12(GC/kg)(人、靈長類);1×10^11 GC/只鼠,稀釋成 50-10
射頻知識分享:調試篇
導語射頻產品設計,在經歷前期的器件選型,原理圖繪制,LAYOUT相關阻抗控制等一系列工作后,當第一版樣機出來之后,射頻指標的調試,也是整個射頻產品開發中比較重要的一個環節。射頻指標調試,是基于射頻產品開發初期,我們在開發方案射頻指標理論值估算的基礎上,通過調試讓實際測試指標更接近我們理論值,從而實現
知識分享:基因定點突變
實驗原理 基因定點突變是指通過聚合酶鏈式反應(PCR)等方法改變目的基因的序列,包括堿基的插入、缺失、點突變等。基因定點突變是基因研究中比較常用的方法,可以短時間內研究目的DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征。 定點突變需要設計特定的突變引物。引物長度一般為25-45 bp,建議選擇3
知識分享:腫瘤相關基因
癌基因(英語:Oncogene,亦稱為致癌基因)是細胞遺傳物質的一部分, 它們參與細胞從正常生長狀態到腫瘤的過程。它們通過誘導或突變被激活。 致癌基因 原癌基因是參與細胞生長、細胞分裂和細胞分化的正常基因。但當其發生突變后,就會變成致癌基因。它們會在諸如放射性物質,化學物
分享移液器的日常維護保養知識
移液器是生物、藥物、化學等行業科研工作者每天都使用的工具,除了正確使用移液器,日常維護保養也十分重要: 1.維護 (1)移液器不用時,應在專用支架上豎直放置。 (2)每天使用前,應檢查移液器外表面是否有灰塵和污物,要注意移液器的嘴錐處,只能用70%的酒精溶液清潔。
分享移液器的日常維護保養知識
1.維護? (1)移液器不用時,應在支架上豎直放置。? (2)每天使用前,應檢查移液器外表面是否有灰塵和污物,要注意移液器的嘴錐處,只能用70%的酒精溶液清潔。? (3)如液體不小心進入活塞室應及時清除污染物。? (4)根據使用頻率,所有的移液器應定期用肥皂水清洗,或用60%的異丙醇消毒,
知識分享:細胞傳代、培養的方法
實驗原理: 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。 細胞在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時 也將細胞數量擴大,就
密度計的小知識分享
1.密度計應滿足的技術條件: a.光源的輻射函數(相對輻射分布)s(λ); b.傳感器的相對光譜靈敏度s(λ)r; c.濾光片的光譜透射率τ(λ); d.測量的幾何條件和測量塊的大小; e.讀數的精確性和顯示的線性; f.被測樣本的光譜反射參數;
密度計的小知識分享
1.密度計應滿足的技術條件:? ? a.光源的輻射函數(相對輻射分布)s(λ);? ? b.傳感器的相對光譜靈敏度s(λ)r;? ? c.濾光片的光譜透射率τ(λ);? ? d.測量的幾何條件和測量塊的大小;? ? e.讀數的性和顯示的線性;? ? f.被測樣本的光譜反射參數;? ? g.定標板的光
知識分享:穩轉株的制備
實驗原理: 利用哺乳動物系統生產蛋白的方式有兩種:瞬時轉染和穩轉株篩選。通過穩定細胞系構建篩選穩定表達細胞株。針對瞬時轉染,外源基因在短時間轉錄翻譯得到的蛋白量較少,能夠滿足小量蛋白制備,大量生產成本很高。相對于此,穩定轉染的是將外源基因整合到細胞自身的基因組上,隨著細胞的生長分裂外源基因
知識分享:mRNA的分離和純化
實驗原理 從細胞或組織中得到RNA是一種混合物,其中包括tRNA,rRNA和mRNA,其中RNA為75%~ 85%,tRNA占10%~16%,而mRNA僅占1%~5%,并且mRNA基因序列不同,分子量大小不均一,各基因的表達豐度也不一樣。每克細胞可分離出5-10mg RNA。 真核生
恒溫搖床基礎知識分享
?恒溫搖床具有不銹鋼萬用夾具、數顯控溫、無極調速和良好的熱循環功能,是一種多用途的生化器,是植物、生物、微生物、遺傳、病毒、環保、醫學等科研,教育和生產部門作精密培養制備不可缺少的實驗室設備,適用于各大中院校、油化工、衛生防疫、環境監測等科研部門作為生生、生化、細胞、菌種等各種液態、固態化合物的振蕩
變頻串聯諧振設備知識分享
串聯諧振變壓器優點1、所需電源容量大大減小。串聯諧振電源是利用諧振電抗器和被試品電容諧振產生高電壓和大電流的,在整個系統中,電源只需要提供系統中有功消耗的部分,因此,試驗所需的電源功率只有試驗容量的1/Q.2、設備的重量和體積大大減少。串聯諧振電源中,不但省去了笨重的大功率調壓裝置和普通的大功率工頻
知識分享:質粒提取實驗步驟
實驗原理 現在較常用的質粒提取方法有三種:堿裂解法、煮沸法和去污劑裂解法,前兩種方法較為劇烈,適用于較小的質粒(<15Kb),而去污劑裂解法則比較溫合,一般用于分子量較大的質粒(>15Kb)。 堿裂解法是一種最廣泛使用的制備質粒DNA的方法。其原理為:染色體DNA遠大于質粒DNA,且
消化爐知識經驗點分享
??? 很多人只知道凱氏定氮儀,對消化爐卻沒有太多的了解,最終出現測定結果不準確、誤差等一系列問題。因此在利用專業儀器開展試驗前,我們必須熟知儀器本身及配套設備的構造原理及操作注意事項。消化爐也不例外,它是為加速樣品消化煮解時間,提高蛋白質測定速度的理想儀器。它還能將消化管內溢出的有害氣體,經過抽氣
恒溫搖床基礎知識分享
恒溫搖床具有不銹鋼萬用夾具、數顯控溫、無極調速和良好的熱循環功能,是一種多用途的生化器,是植物、生物、微生物、遺傳、病毒、環保、醫學等科研,教育和生產部門作精密培養制備不可缺少的實驗室設備,適用于各大中院校、油化工、衛生防疫、環境監測等科研部門作為生生、生化、細胞、菌種等各種液態、固態化合物的振蕩培
單晶培養科研實驗知識分享
好多同學/老師一直培養不出單晶,或者周期太長了,希望這個分享能得到一些幫助。單晶培養的方法多種多樣,如升華法、共結晶法等。最簡單的最實用常用的有1.溶劑緩慢揮發法;2.液相擴散法;3.氣相擴散法。99%的單晶是用以上三種方法培養出來的。一、單晶培養要點?1、一般以10--25mg 為佳,如果你只有2
類器官技術在藥物研發領域的應用分享
類器官技術在藥物研發領域有廣泛的應用,以下是一些利用類器官技術開展的藥物研發項目:新冠治療藥物篩選:2020年,上海交通大學聯合威爾康奈爾醫學院、西奈山伊坎醫學院的研究團隊利用人類多能干細胞生成的肺和結腸類器官系統,對美國食品藥品管理局(FDA)批準的藥物進行篩選,鑒定出了三種顯示對新冠病毒(SAR
酶制劑在焙烤食品中的應用分享
面粉中的最重要的酶有淀粉酶和蛋白酶,但在焙烤加工中儀靠面粉中所含的酶是遠遠不夠的,否則會造成面包等焙烤食品出爐后不久就變得粗糙、發硬、掉渣,影響制品的口感和質量。因此在生產上常需要補充加入酶,以改善面包外觀色澤及焙烤風味,降低全麥粉制品粗糙口感。常用于焙烤食品中酶 一淀粉酶、B一淀粉酶、葡萄糖氧化酶
AAV基因治療的應用研究
所謂基因治療,就是把一個具有治療作用的基因放到病人的細胞中,借此替換缺失和功能異常的基因,最終達到治療某種疾病的方法。盡管早在1990年美國就批準了基因治療的方案,但是基因治療真正在臨床獲批卻少之又少。不過近期的一則新聞,無疑是為致力于醫學轉化的我們打了一針強心劑。5月27日,全球制藥巨頭葛蘭素
腺相關病毒AAV簡介及應用
一、腺相關病毒簡介腺相關病毒(Adreno-Associated Virus, AAV)是微小病毒科(Parvoviridae)家族的成員之一。這一家族成員是一類微小、無被膜及具有二十面體結構的病毒。病毒顆粒的直徑在20~26nm之間,含有大小在4.7~6kb之間的線狀單鏈DNA基因組。它的復制和增
德國Fevik菲維科分享凍干機知識
真空冷凍干燥是將含水物質先凍結成固態,然后使其中的水份從固態升華成氣態,從而除去水份而保存物質的方法。 一、凍干機系統 1. 控制系統 控制系統有可編程程序控制器、觸摸屏、外圍繼電器、傳感器等組成。 2. 制冷系統 制冷系統由制冷壓縮機及輔助設施構成,為干燥箱和冷阱
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真空冷凍干燥是將含水物質先凍結成固態,然后使其中的水份從固態升華成氣態,從而除去水份而保存物質的方法。 一、凍干機系統 1. 控制系統 控制系統有可編程程序控制器、觸摸屏、外圍繼電器、傳感器等組成。 2. 制冷系統 制冷系統由制冷壓縮機及輔助設施構成,為干燥箱和冷阱
電源濾波器綜合知識分享
在整流電路輸出的電壓是單向脈動性電壓,不能直接給電子電路使用。所以要對輸出的電壓進行濾波,消除電壓中的交流成分,成為直流電后給電子電路使用。在濾波電路中,主要使用對交流電有特殊阻抗特性的器件,如:電容器、電感器。本文對其各種形式的濾波電路進行分析。一、濾波電路種類濾波電路主要有下列幾種:電容濾波電路